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維拉帕米對體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細胞增殖和黏附的抑制作用

發(fā)布時間:2019-07-20 09:12
【摘要】:目的 研究鈣離子拮抗劑維拉帕米(verapamil,Ver)對體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細胞(huamn lens epithelial cell,HLEC)增殖、凋亡和黏附的影響。 方法 體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細胞株(SRA01/04)。Ver處理第二代人晶狀體上皮細胞。MTT法觀察不同濃度的Ver對HLEC增殖的影響,流式細胞術(shù)(FCM)檢測Ver對HLEC周期的影響,AO/EB雙染法觀察細胞凋亡形態(tài),Annexin V-FITC/PITC凋亡試劑盒檢測細胞凋亡率。MTT法測定Ver對HLEC貼壁的影響。 結(jié)果 (1)隨著Ver藥物濃度的增加,HELC增殖率減少,以72小時最為明顯。(2)FCM檢測細胞周期細胞變化時發(fā)現(xiàn):G1期細胞在藥物組(77.97±0.18、78.15±0.12、82.86±0.56、84.84±0.42)較正常組(72.67±0.94)增加(P0.05);S期的細胞在藥物組(10.26±0.06、10.08±0.76、8.52±0.31、8.42±0.27)較正常組(16.87±0.33)明顯減少(P0.05)。(3)形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn)HELC在80mg/l濃度的Ver作用72小時后發(fā)生了一系列形態(tài)改變,包括細胞核固縮、染色質(zhì)邊集等凋亡改變。流式細胞儀測定了10、20、40、80mg/l濃度的Ver可以誘導HLEC發(fā)生凋亡,且隨著濃度的升高凋亡率顯著升高。(4)用藥24h后HELC的貼壁量為對照組的73.17%。 結(jié)論 Ver對體外培養(yǎng)的HLEC生長有抑制作用,使細胞停留在G1期。Ver可以誘導HLEC凋亡,隨著藥物濃度增加細胞凋亡率增加,而且Ver有抑制HLEC貼壁的作用。提示Ver能改變細胞周期的進程而有效抑制HLEC的增生、誘導細胞凋亡并且抑制HLEC的黏附,有望成為防治后發(fā)性白內(nèi)障的理想藥物。
【圖文】:
細胞培養(yǎng)(×200)
圖 1 細胞培養(yǎng)(×200)晶狀體上皮細胞增殖的影響度的增加,,細胞增殖率逐漸減少,以 72 小時最l 藥物濃度組隨時間增加細胞抑制率增加,差0mg/l藥物濃度組培養(yǎng)48h與72h差異無統(tǒng)計學計學意義(P<0.05)。濃度不同時間 Ver 對 HLEC 增殖率的影響(x吸光值(A)培養(yǎng) 24h 培養(yǎng) 48h 培養(yǎng)0.73±0.08 0.74±0.12 0.770.71±0.18*#^0.59±0.02*#^0.540.70±0.01*#^0.52±0.03*#^0.52
對照組
對照組
【學位授予單位】:遼寧醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2011
【分類號】:R776.1

【參考文獻】

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本文編號:2516626

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