發(fā)布時間：2019-04-17 13:25

【摘要】：目的: 研究玻璃體結構的完整性對高氧誘導的晶狀體代謝的保護作用。 方法: 1. 16只雄性新西蘭大白兔(2.4-2.5 kg/只,6月齡),隨機分為A,B兩組。A組12只,其中右眼(A1組,12眼)實施玻璃體切除術,左眼(A2組,12眼)未行手術,術后第二日開始A組12只兔子放入高氧環(huán)境(一個大氣壓,氧濃度80%-85%)中飼養(yǎng),每日4小時。其余時間正常喂養(yǎng)。B組4只(8眼)未作任何處理為對照組。A組右眼為手術眼,在噻拉嗪(5 mg·kg-1)和氯胺酮(45 mg·kg-1)肌肉注射麻醉下行玻璃體切除術,確保切除兔眼玻璃體腔中軸、晶狀體后及視網膜前的玻璃體凝膠。術中平均玻璃體切除和平衡液灌注時間為10 min。手術嚴格無菌操作,術中注意避免手術器械碰傷晶狀體和視網膜。 2.術后用1%復方托吡卡胺滴眼液散瞳,麻醉后使用瑞士產BQ900裂隙燈觀察兔晶狀體混濁情況,每周觀察1次并記錄和照相。晶狀體混濁情況分級標準參考英國牛津大學眼科實驗室晶狀體分級方法。 3. 6個月后空氣栓塞處死新西蘭白兔,取出晶狀體,每組取1只晶狀體做HE染色,其余晶狀體分為晶狀體囊膜皮質部和核部兩部分,分別進行水溶性蛋白質,丙二醛(malonaldehyde,MDA),谷胱甘肽(glutathione, GSH),轉化生長因子-β2(transforming growth factor-β2, TGF-β2)和抗壞血酸(Ascorbate, AsA)含量測定及Na~+-K~+-ATP酶、過氧化氫酶(catalase, CAT)和谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase, GR)活性檢測。 4.同期,抽取房水和玻璃體液,分別測定其中轉化生長因子-β2(transforming growth factor-β2, TGF-β2)的含量。測定玻璃體液中抗壞血酸(Ascorbate, AsA)含量。 結果: 1.玻璃體切除術后6個月,玻切+高氧組與對照組的晶狀體在透明度和組織形態(tài)學上沒有明顯差異。 2.以對照組為標準,單純高氧組的晶狀體核部水溶性蛋白質含量與對照組相比減少了7.74%(P =0.02)。與對照組晶狀體囊膜皮質部和核部相比,單純高氧組相應部位的GSH含量,GR活性,Na+-K+-ATP酶活性和CAT活性均發(fā)生了降低,但無統(tǒng)計學意義(P0.05),而MDA含量有所增加,但無統(tǒng)計學差異(P0.05)。 3.玻璃體切除術后給予高氧處理6個月,玻切+高氧組與對照組相比,晶狀體囊膜皮質部水溶性蛋白質含量減少了8.27%(P=0.004),核部水溶性蛋白質含量減少了10.09%(P0.001)。玻切+高氧組與對照組相對應部位相比,GSH含量,GR活性,Na+-K+-ATP酶活性和CAT活性均發(fā)生了降低,但差異無統(tǒng)計學差異(P0.05)。同時,玻切+高氧組晶狀體囊膜皮質部和核部MDA含量比對照組相應部位MDA含量分別增加了15.11%(P =0.029)和16.20%(P =0.011)。 4.與單純高氧組相比,玻切+高氧組晶狀體囊膜皮質部和核部水溶性蛋白質含量分別減少了3.7%(P0.05)和1.3%(P0.05)。玻切+高氧組晶狀體兩部分與單純高氧組相應部位比較,GSH含量,GR活性,Na~+-K~+-ATP酶活性和CAT活性均發(fā)生了降低,但均無統(tǒng)計學差異(P0.05)。同時,玻切+高氧組與單純高氧組相比,晶狀體囊膜皮質部和核部MDA含量分別增加了11.11%(P0.05)和5.1%(P0.05)。 5.給予高氧處理6個月后,與對照組相比,單純高氧組晶狀體核部TGF-β2含量增加了75.88%(P=0.043),而房水,晶狀體核部以及玻璃體液中TGF-β2含量與對照組相應部位相比,均無統(tǒng)計學差異(P0.05)。而玻璃體切除+高氧處理6個月后,與對照組相比,玻切+高氧組眼內四個部分TGF-β2含量均有明顯的增加,其中晶狀體囊膜皮質部和核部分別增加了90.47%(P=0.016)和217.94%(P=0.001),玻璃體TGF-β2含量增加了148.40%(P=0.002),房水中TGF-β2含量比對照組稍有增加,但無統(tǒng)計學意義(P0.05)。玻切高氧組與單純高氧組相比,晶狀體囊膜皮質部TGF-β2含量增加了54.81%(P=0.048),晶狀體核部TGF-β2含量增加了80.87%(P=0.007),玻璃體中TGF-β2含量增加了70.34%(P=0.039),房水部TGF-β2含量有所增加,但無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 6.單純高氧組在給予高氧處理6個月后,晶狀體兩部分和玻璃體中AsA含量與對照組相應部位相比,均發(fā)生了不同程度的降低,但是差別未達到統(tǒng)計學意義(P0.05)。玻切+高氧組與對照組相比,晶狀體囊膜皮質部、核部和玻璃體液中AsA含量均發(fā)生了減少,其中以玻璃體中AsA含量的減少最為明顯,降低了50.6%。而玻切+高氧組與單純高氧組相比,同樣晶狀體兩部分和玻璃體中AsA含量均發(fā)生了減少,其中玻璃體中AsA減少了42.2%。 結論: 高氧可使成年兔晶狀體發(fā)生生物化學改變,包括房水,玻璃體再形成液中細胞因子的變化。而玻璃體切除術,破壞了玻璃體結構的完整性,失去了玻璃體對晶狀體的保護作用,使高氧誘導的晶狀體損傷更加顯著。說明玻璃體凝膠結構的完整性對于維持晶狀體正常的代謝狀態(tài)具有重要的保護作用。 創(chuàng)新點 本研究首次報道通過制備聯(lián)合高氧和玻璃體切除的動物模型,研究玻璃體結構的完整性對晶狀體氧化損傷的保護作用,提出玻璃體屏障的作用對晶狀體及其周圍組織抗氧化損傷的重要性,為闡明玻切術后白內障的發(fā)病機制和防治玻璃體切除術后相關性眼部并發(fā)癥提供新的思路和實驗依據。
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【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R776.4

【共引文獻】

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1 賀春梅;王z牖，

本文編號：2459487