【摘要】：目的:研究miRNA機制相關蛋白在人的正常鼻黏膜、不伴鼻息肉的慢性鼻-鼻竇炎(chronic rhinosinusitis without nasal polyps, CRSsNP)篩竇黏膜、嗜酸粒細胞性伴鼻息肉的慢性鼻-鼻竇炎(eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps, Eos CRSwNP)和非嗜酸粒細胞性伴鼻息肉的慢性鼻-鼻竇炎(non-eosinophilic chronic rhinosinusitis without nasal polyps, Non-Eos CRSwNP)息肉組織中的差異性表達,探討miRNA機制相關蛋白在慢性鼻-鼻竇炎發(fā)病過程中的作用。 方法:采用實時定量RT-PCR的方法檢測miRNA機制相關蛋白成分Drosha、Dicer、PACT、TRBP、EIF2C2、FXR1在人類正常鼻黏膜組織、CRSsNP、EosCRSwNP和Non-EosCRSwNP病變黏膜中的mRNA表達及差異,然后用免疫組織化學連續(xù)切片的方法驗證上述蛋白的表達及定位。 結果:實時定量RT-PCR的結果顯示miRNA機制相關蛋白Drosha、Dicer、PACT、TRBP、EIF2C2、FXR1的mRNA在人類鼻黏膜中均表達,但只有PACT在CRS中存在差異性表達。與正常鼻黏膜相比,PACT mRNA在Eos CRSwNP和Non-Eos CRSwNP息肉組織中的表達顯著升高,并且Eos CRSwNP中PACT mRNA的表達量較CRSsNP顯著升高。免疫組織化學的結果顯示Eos CRSwNP和Non-Eos CRSwNP組織中PACT的蛋白表達量也較正常鼻黏膜顯著升高;Eos CRSwNP和Non-Eos CRSwNP組織中PACT的蛋白表達量較CRSsNP亦顯著升高。應用免疫組化連續(xù)切片技術發(fā)現(xiàn)PACT主要表達于CD138+的漿細胞。CD138+的漿細胞在正常鼻黏膜、CRSsNP、Eos CRSwNP和Non-Eos CRSwNP組織中亦存在差異性表達,且趨勢和PACT一致。PACT和CD138在鼻黏膜的表達成正相關(r = 0.741, P =0.000)。 結論:miRNA機制相關蛋白PACT在Eos CRSwNP和Non-Eos CRSwNP組織中表達上調(diào),提示在CRS中可能存在miRNA的異常表達。PACT在CD138陽性的漿細胞中表達提示miRNA調(diào)控機制可能參與調(diào)節(jié)漿細胞的功能,進而導致了CRSwNP發(fā)病。
[Abstract]:Objective: to study the expression of miRNA related proteins in normal human nasal mucosa, chronic rhinosinusitis without nasal polyps, (chronic rhinosinusitis without nasal polyps, CRSsNP) ethmoid mucosa, eosinophilic granulocyte with nasal polyp and chronic rhinosinusitis (eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,. To investigate the role of miRNA related proteins in the pathogenesis of chronic rhinosinusitis (non-eosinophilic chronic rhinosinusitis without nasal polyps, Non-Eos CRSwNP) in patients with chronic rhinosinusitis (non-eosinophilic chronic rhinosinusitis without nasal polyps, Non-Eos CRSwNP) and chronic rhinosinusitis (non-eosinophilic chronic rhinosinusitis without nasal polyps, Non-Eos CRSwNP) with non-eosinophilic granulocyte. Methods: the expression and difference of mRNA in human normal nasal mucosa, CRSsNP,EosCRSwNP and Non-EosCRSwNP lesions were detected by real-time quantitative RT-PCR. The expression and localization of these proteins were confirmed by immunohistochemical serial sections. Results: the results of real-time quantitative RT-PCR showed that the mRNA of miRNA related protein Drosha,Dicer,PACT,TRBP,EIF2C2,FXR1 was expressed in human nasal mucosa, but only PACT was differentially expressed in CRS. The expression of, PACT mRNA in Eos CRSwNP and Non-Eos CRSwNP polyps was significantly higher than that in normal nasal mucosa, and the expression of PACT mRNA in Eos CRSwNP was significantly higher than that in CRSsNP. The results of immunohistochemistry showed that the expression of PACT protein in Eos CRSwNP and Non-Eos CRSwNP was significantly higher than that in normal nasal mucosa. The expression of PACT in; Eos CRSwNP and Non-Eos CRSwNP was also significantly higher than that in CRSsNP. Immunohistochemical serial sections showed that PACT was mainly expressed in the plasma cells of CD138, and that the plasmacytes of CD138 were expressed differently in normal nasal mucosa, CRSsNP,Eos CRSwNP and Non-Eos CRSwNP. There was a positive correlation between the expression of PACT and CD138 in nasal mucosa (r = 0.741, P = 0.000). Conclusion: the expression of miRNA related protein PACT is up-regulated in Eos CRSwNP and Non-Eos CRSwNP tissues, suggesting that there may be abnormal expression of miRNA in CRS. The expression of PACT in CD138 positive plasma cells suggests that miRNA regulation may be involved in regulating the function of plasma cells. This leads to the onset of CRSwNP.
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R765.41

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