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腺病毒介導(dǎo)的Slit2及Slit2 ShRNA轉(zhuǎn)染缺氧誘導(dǎo)的人RPE細(xì)胞對人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-12-29 11:22
【摘要】:目的:觀察腺病毒介導(dǎo)的Slit2及Slit2 ShRNA轉(zhuǎn)染缺氧誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelial cells,RPE)細(xì)胞對人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(human choroidal microvascular endothelial cell,HCMEC)增殖的影響,探討Slit2在脈絡(luò)膜新生血管中的可能作用,為脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)提供新的治療思路。方法:體外培養(yǎng)并鑒定人RPE細(xì)胞、HCMEC;200μmol/L氯化鈷建立化學(xué)缺氧模型,Transwell小室建立細(xì)胞共培養(yǎng)模型;將缺氧的RPE細(xì)胞隨機(jī)分為Slit2組(加入Slit2)、Slit2 ShRNA組(加入Slit2 ShRNA)、空腺病毒組(加入空腺病毒)、缺氧組,12、24、48 h后采用CCK 8(Cell Counting Kit-8,CCK 8)法檢測HCMEC的增殖。結(jié)果:不同組別存在組間差別,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=98.122,P=0.000),不同時(shí)間點(diǎn)存在差別(F=3388.913,P=0.000),組別與時(shí)間點(diǎn)的交互作用(F=82.863,P=0.000)。Slit2組吸光度(absorbance,A)值在24 h、48 h均高于其他組(與缺氧組P=0.001,其余P=0.000),Slit2 ShRNA組A值在24 h、48 h均低于其他組(48 h與缺氧組P=0.003,與空腺病毒組P=0.008,其余P=0.000)。結(jié)論:Slit2的高表達(dá)可明顯促進(jìn)HCMEC的增殖,沉默RPE細(xì)胞中的Slit2的表達(dá)后,會明顯抑制HCMEC的增殖。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of adenovirus-mediated Slit2 and Slit2 ShRNA transfection on the proliferation of human retinal pigment epithelium (retinal pigment epithelial cells,RPE) cells induced by hypoxia on the proliferation of human choroidal microvascular endothelial cells (human choroidal microvascular endothelial cell,HCMEC). To explore the possible role of Slit2 in choroidal neovascularization (choroidal neovascularization,CNV). Methods: human RPE cells were cultured and identified in vitro, HCMEC;200 渭 mol/L cobalt chloride was used to establish chemical hypoxia model, and Transwell chamber was used to establish cell coculture model. The hypoxic RPE cells were randomly divided into Slit2 group (adding Slit2), Slit2 ShRNA group (adding Slit2 ShRNA), empty adenovirus group), hypoxia group, CCK 8 (Cell Counting Kit-8,CCK 8 method after 48 h. Results: there were significant differences among different groups (F _ (98.122) P ~ (0.000), different time points (F _ (3388.913) P ~ (0.000), interaction between groups and time points (F _ (82.863), P ~ (0.000). The absorbance (absorbance,A) of Slit2 group was significantly higher than that of other groups (P 0. 001, P 0. 000), and the A value of Slit2 ShRNA group was lower than that of other groups (48 h and hypoxia group P 0. 003). Compared with empty adenovirus group (P 0. 008), the rest (P 0. 000). Conclusion: the high expression of Slit2 can obviously promote the proliferation of HCMEC, but after silencing the expression of Slit2 in RPE cells, it can inhibit the proliferation of HCMEC.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院眼科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:81170858)
【分類號】:R773.4

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2394762


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