發(fā)布時(shí)間：2018-11-21 07:09

【摘要】：近視是一種常見的屈光不正,并有引發(fā)病理性改變的風(fēng)險(xiǎn)。包括人在內(nèi)的大多數(shù)動(dòng)物出生時(shí)是處于遠(yuǎn)視狀態(tài)的,在生長(zhǎng)過程中逐漸形成正視。這個(gè)過程是需要依賴視覺的。如果此過程中缺乏早期的視覺經(jīng)歷,則很可能會(huì)導(dǎo)致眼球的發(fā)育異常,最終導(dǎo)致近視的形成。形覺剝奪性近視(form deprivation myopia, FDM)是指用人為的方法比如縫合眼瞼、戴彌散鏡片或半透明眼罩來改變實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的視覺經(jīng)歷,造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屈光度及眼軸長(zhǎng)度發(fā)生改變從而引起近視的一種實(shí)驗(yàn)方法。Wiesel于1977年用縫合恒河猴眼瞼的方法首次成功誘導(dǎo)出形覺剝奪性近視,此后近視動(dòng)物模型建立的方法在不斷的發(fā)展與完善。已有的研究表明,形覺剝奪性近視是一種涉及多種介質(zhì)與因子改變的復(fù)雜的過程。新近的研究將重點(diǎn)越來越聚焦于視網(wǎng)膜上各種神經(jīng)介質(zhì)的功能和變化,這些神經(jīng)介質(zhì)中,褪黑素(melatonin, MLT)逐漸受到人們的關(guān)注。 褪黑素是一種神經(jīng)內(nèi)分泌激素,化學(xué)名為N-乙酰-5-甲氧色胺,由5-羥色胺轉(zhuǎn)化而來。因發(fā)現(xiàn)進(jìn)入蛙黑色素細(xì)胞后會(huì)使蛙全身的肽色變淺而得名。在生理狀況下,人及其它哺乳動(dòng)物、鳥類體內(nèi)褪黑素主要來源于松果體。但有些松果體外組織也能合成少量,例如視網(wǎng)膜、腸、副淚腺等。松果體內(nèi)分泌褪黑素呈24小時(shí)規(guī)律性波動(dòng),表現(xiàn)為夜間分泌增加而白天分泌減少,其分泌節(jié)律由交叉上核團(tuán)(SCN)根據(jù)晝夜節(jié)律來控制。 褪黑素在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮各種生理作用需要通過褪黑素受體的介導(dǎo)來完成。二十世紀(jì)末召開了國(guó)際藥理學(xué)聯(lián)合會(huì)會(huì)議,在此次會(huì)議上MLT受體被分為3種亞型,分別為MT1、MT2、MT3;人眼部視網(wǎng)膜及其外大部分眼部組織中存在MT1、MT2。MLT不僅具有清除氫氧自由基的能力,而且可以抑制體內(nèi)一氧化氮(NO)過度生成,對(duì)損傷和炎癥有保護(hù)作用。c-fos是一種原癌基因,屬于即刻-早期基因類。本實(shí)驗(yàn)在建立豚鼠形覺剝奪性近視模型的同時(shí),給予不同劑量外源性MLT干預(yù)。觀察各組眼屈光度、眼軸長(zhǎng)度、及視網(wǎng)膜MT1、iNOS及c-fos的變化,推測(cè)外源性MLT在FDM形成中的作用。 材料與方法 選用出生后7天的雄性健康花色豚鼠40只,復(fù)方托品酰胺眼液滴眼后檢影驗(yàn)光,排除先天性近視及其它眼疾。用半透明眼罩遮蓋豚鼠右眼,左眼為對(duì)照眼,建立FDM模型。將40只豚鼠隨機(jī)分為4組,每組10只。A組為對(duì)照組,經(jīng)腹腔注射生理鹽水5 ml·kg-1,B、C、D組分別經(jīng)腹腔注射外源性MLT5 mg·kg-1、10 mg-kg-1、20 mg·kg-1,隔日一次,連續(xù)注射8周。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行8周后,用A超測(cè)量豚鼠雙眼眼軸長(zhǎng)度,用檢影驗(yàn)光法檢測(cè)雙眼屈光度數(shù),用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)豚鼠雙眼視網(wǎng)膜上褪黑素受體MT1、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和c-fos的表達(dá)水平。采集相應(yīng)的視網(wǎng)膜切片圖像,用Image-Pro Plus 6.0圖像分析軟件進(jìn)行分析,用平均光密度值來表示以上指標(biāo)的表達(dá)強(qiáng)度。 所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±s表示,數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包,首先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),然后再行單因素方差分析及LSD-t檢驗(yàn),以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 1.A組遮蓋眼屈光度數(shù)、眼軸長(zhǎng)度、視網(wǎng)膜中iNOS、MT1、c-fos平均光密度值表達(dá)分別為：(-7.86±0.26)D、(8.51±0.16)mm、(0.4836±0.0247)、(0.3179±0.0344)、(0.2282±0.0246),與對(duì)照眼相比遮蓋眼近視屈光度增加,眼軸增長(zhǎng),視網(wǎng)膜中iNOS免疫活性增加而MT1、c-fos活性降低(P0.05)。FDM模型建立成功。 2.不同劑量MLT作用于FDM,隨外源性MLT劑量的增加,與A組相比,以上指標(biāo)變化被明顯抑制甚至逆轉(zhuǎn)：C組和D組FDM眼的屈光度數(shù)、眼軸長(zhǎng)度、視網(wǎng)膜中iNOS、MT1、c-fos平均光密度值表達(dá)分別為：(-4.30±0.59)和(-3.41±0.88)D、(8.04±0.24)和(7.43±0.39)mm、(0.3733±0.0427)和(0.3079±0.1261)、(0.3743±0.0447)和(0.4055±0.0919)、(0.3713±0.0786)和(0.4458±0.0974)。C組和D組與A組比較有顯著性差異(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但B組與A組之間的差異無顯著性(P0.05)。 結(jié)論 1.8周后遮蓋眼近視屈光度數(shù)增加,眼軸延長(zhǎng),成功建立FDM模型。 2.豚鼠遮蓋眼視網(wǎng)膜中iNOS表達(dá)明顯增多,MT1、c-fos表達(dá)明顯減少,提示iNOS、MT1及c-fos可能參與了近視的形成。 3.外源性MLT能抑制甚至逆轉(zhuǎn)FDM中屈光度、眼軸長(zhǎng)度、iNOS、MT1、c-fos免疫活性。 4.外源性MLT高劑量組上述檢測(cè)結(jié)果的抑制趨勢(shì)較低劑量組明顯。據(jù)此可推測(cè)外源性MLT對(duì)FDM的形成有抑制作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R778.11

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本文編號(hào)：2346270