【摘要】：目的 建立豚鼠鏡片誘導(dǎo)型近視眼模型(Lens induced myopia, LIM),觀察豚鼠眼球后極部視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜及鞏膜中視黃酸(RA)、視黃酸受體β(RAR-β)和光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白(IRBP)的表達(dá)變化,探討視黃酸信號(hào)傳遞系統(tǒng)在豚鼠離焦型近視發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。 方法 3～4周齡花色豚鼠65只隨機(jī)分成3組,空白對(duì)照組13只(26個(gè)眼,n=26),離焦Ⅰ組和離焦Ⅱ組各26只(n=26)�？瞻讓�(duì)照組雙眼不做任何處理,離焦Ⅰ組和Ⅱ組豚鼠左眼不戴鏡作為自身對(duì)照眼,右眼戴-10.00D凹透鏡,分別戴鏡14d、28d后除去鏡片,測(cè)量豚鼠戴鏡前和戴鏡后雙眼屈光度及眼軸長(zhǎng)度。經(jīng)檢影驗(yàn)光及測(cè)定眼軸長(zhǎng)度后,深度麻醉處死動(dòng)物,摘除眼球,取后極部視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜及鞏膜,光鏡下對(duì)比觀察離焦型近視眼和對(duì)照眼視網(wǎng)膜的形態(tài)學(xué)變化;采用免疫組織化學(xué)法和Western blot技術(shù)檢測(cè)視網(wǎng)膜中光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白(IRBP)和視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜及鞏膜中視黃酸核受體β(RAR-β)的蛋白質(zhì)的表達(dá)變化;用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)視網(wǎng)膜中IRBP及視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜中RAR-β的mRNA表達(dá)變化;應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜中的視黃酸(RA)含量。 結(jié)果 與自身對(duì)照眼及空白對(duì)照組相比較,Ⅰ組和Ⅱ組離焦眼形成明顯的近視眼、眼軸延長(zhǎng)(P0.05),離焦Ⅱ組近視程度重于Ⅰ組(P0.05)。視網(wǎng)膜HE染色及厚度測(cè)量可見(jiàn),Ⅰ組和Ⅱ組離焦眼視網(wǎng)膜有核細(xì)胞數(shù)減少,視網(wǎng)膜變薄(P0.05),但Ⅱ組離焦眼視網(wǎng)膜全層厚度及視網(wǎng)膜各層形態(tài)學(xué)改變與Ⅰ組離焦眼相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與空白對(duì)照組和離焦組左眼相比,Ⅰ組和Ⅱ組右眼視網(wǎng)膜的IRBP蛋白及mRNA表達(dá)明顯降低(P0.05),Ⅱ組IRBP mRNA的表達(dá)量顯著低于Ⅰ組(P0.05)。與空白對(duì)照組和離焦組左眼相比,RAR-β蛋白及mRNA表達(dá)量在Ⅰ組和Ⅱ組右眼視網(wǎng)膜中明顯增高(P0.05),且離焦Ⅱ組比Ⅰ組RAR-β表達(dá)強(qiáng)(P0.05);而在Ⅰ組和Ⅱ組右眼脈絡(luò)膜及鞏膜中明顯下降(P0.05),且Ⅱ組比Ⅰ組表達(dá)少(P0.05)。視黃酸(RA)含量在離焦Ⅰ組和Ⅱ組視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜中均升高(P0.05),Ⅰ組右眼視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜及鞏膜平均RA含量與Ⅱ組相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 1.幼齡豚鼠配戴-10D自制凹透鏡可誘導(dǎo)形成明顯的近視眼,配戴以kt板為鏡框的自制近視鏡可作為一種有效的離焦方法。 2.視黃酸(RA)在豚鼠視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜及鞏膜中均有表達(dá),其中脈絡(luò)膜含量最高。鏡片離焦所致視環(huán)境改變后,視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜及鞏膜中的RA表達(dá)升高,提示RA參與了豚鼠離焦型近視的形成。 3.視黃酸受體β的表達(dá)在離焦型近視眼視網(wǎng)膜中增高,而在脈絡(luò)膜及鞏膜中下降,RAR-β的變化方向與近視程度發(fā)展一致,提示RAR-β可能參與了離焦型近視眼的形成和發(fā)展,RAR-β在離焦型近視眼中的作用機(jī)制與形覺(jué)剝奪型近視眼不同,可能與中樞調(diào)節(jié)有關(guān)。 4.視黃酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白(IRBP)在離焦型近視眼視網(wǎng)膜中的表達(dá)減少,說(shuō)明IRBP可能參與離焦型近視眼的發(fā)生發(fā)展,IRBP可能通過(guò)視覺(jué)中樞途徑參與近視的形成。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R778.11

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本文編號(hào)：2330064