【摘要】：目的:研究聚束蛋白(Fascin1)基因沉默后對人鼻咽癌細(xì)胞CNE-2上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響,以探討Fascin1在鼻咽癌發(fā)展中的作用。方法:構(gòu)建Fascin1-sh RNA干擾載體,包裝成慢病毒以感染CNE-2,構(gòu)建干擾Fascin1表達(dá)的CNE-2細(xì)胞系;定量PCR及Western-blot法檢測Fascin1、E-cadherin Vimentin及Twist1的m RNA及蛋白表達(dá)變化;Transwell小室法及劃痕實驗檢測細(xì)胞運動能力的變化,Matrigel法檢測細(xì)胞侵襲能力的變化。結(jié)果:干擾組(sh RNA-Fascin1)與對照組(sh RNA-ctrl)比較,Fascin1蛋白及m RNA表達(dá)均明顯降低;下調(diào)Fascin1后CNE-2細(xì)胞侵襲能力無明顯變化,但細(xì)胞運動能力明顯降低,且與EMT相關(guān)的上皮型鈣黏附素(E-cadherin)表達(dá)上調(diào)(P0.05),而Vimentin表達(dá)下調(diào)(P=0.006 2),Twist1表達(dá)下調(diào)(P=0.001 9)。結(jié)論:靶向抑制Fascin1基因表達(dá)可降低CNE-2細(xì)胞運動能力,抑制CNE-2細(xì)胞EMT,其機(jī)制可能與下調(diào)Vimentin和Twist1表達(dá)及上調(diào)E-cadherin表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to study the effect of Fascin1 gene silencing on the epithelial-interstitial transformation of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) cells in order to explore the role of Fascin1 in the development of nasopharyngeal carcinoma (NPC). Methods: Fascin1-sh RNA interference vector was constructed and packaged into lentivirus to infect CNE-2, to construct CNE-2 cell line which interfered with Fascin1 expression. The expression of m RNA and protein in Fascin1,E-cadherin Vimentin and Twist1 were detected by quantitative PCR and Western-blot. The changes of cell motility were detected by Transwell chamber assay and scratch test. The changes of cell invasion ability were detected by Matrigel assay. Results: compared with the control group (sh RNA-ctrl), the expression of Fascin1 protein and m RNA in the interference group (sh RNA-Fascin1) were significantly lower than those in the control group (sh RNA-ctrl). After down-regulation of Fascin1, the invasiveness of CNE-2 cells did not change significantly, but the motility of CNE-2 cells decreased significantly, and the expression of EMT related epithelial cadherin (E-cadherin) was up-regulated (P0.05), while the expression of Vimentin was down-regulated (P0. 0062). The expression of Twist1 was down-regulated (Pf0. 001 9). Conclusion: the inhibition of Fascin1 gene expression can decrease the motor ability of CNE-2 cells, and the mechanism of inhibiting EMT, in CNE-2 cells may be related to the down-regulation of Vimentin and Twist1 expression and the up-regulation of E-cadherin expression.
【作者單位】： 廣東醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室;
【基金】：東莞市高等院校科研計劃項目(編號:200910815267) 湛江市科研攻關(guān)項目(編號:2009C3101013)
【分類號】：R739.63

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本文編號：2306888