【摘要】：目的： （1）建立大鼠變應性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）模型； （2）觀察TLR2在大鼠鼻粘膜組織和人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中的表達； （3）觀察TLR2激動劑肽聚糖（Peptidoglycan，PTG）和NF-κB抑制劑 （Pyrrolidinedithiocarbamic acid，PDTC）對IFN-β、IgE、IκB、IRAK-1、MyD88、IL-1、IL-6、NF-κB、TLR2、TNF-β、TRAF-6表達的影響； （4）探討TLR2在TLR2-NF-κB信號通路中的作用； （5）探討雷公藤內(nèi)酯醇（Triptolide，TP）對AR的作用及對TLR2-NF-κB信號通路的干預作用。 方法： （1）采用卵清白蛋白腹腔注射并滴鼻建立大鼠變應性鼻炎模型； （2）體外培養(yǎng)人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC，采用PTG激活TLR2，PDTC抑制NF-κB活性； （3）分別采用免疫組化和免疫細胞化學觀察大鼠鼻粘膜組織和人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中細胞因子IFN-β、IgE、IκB、IRAK-1、MyD88、IL-1、IL-6、NF-κB、TLR2、TNF-β、TRAF-6的表達； （4）采用Real-Time PCR檢測這些細胞因子的mRNA水平； （5）采用Western Blot檢測這些細胞因子的蛋白表達水平； （6）致敏前腹腔注射30mg/kg·d TP，觀察TP對大鼠AR癥狀及TLR2-NF-κB信號通路的影響。 結(jié)果： （1）采用卵清白蛋白腹腔注射并滴鼻成功建立了大鼠變應性鼻炎模型； （2）AR大鼠鼻粘膜組織中TLR2和NF-κB都明顯增高；TLR2激動劑PTG可增強TLR2和NF-κB的表達，而NF-κB抑制劑PDTC可抑制NF-κB的表達，但不能抑制TLR2的表達； （3）模型組、PTG組和PDTC組大鼠鼻粘膜組織中所有上述細胞因子的表達量都高于對照組；除IFN-β以外，PTG組幾乎所有上述細胞因子的表達量都高于模型組和PDTC組；PDTC組MyD88、IRAK-1、TRAF-6、TLR2的表達量與模型組幾乎處于同一水平，二者無明顯差異；PDTC組IgE、IκB、IL-1、NF-κB的表達量幾乎都明顯低于模型組；PDTC對IL-6和TNF-β的表達無明顯的抑制作用； （4）模型組、PTG組和PDTC組大鼠鼻粘膜組織中IFN-β的表達水平都稍高于對照組，但模型組、PTG組和PDTC組大鼠鼻粘膜組織中IFN-β的表達水平無明顯差異； （5）模型組、PTG組和PDTC組人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中所有上述細胞因子的表達量都高于對照組；除IFN-β以外，PTG組幾乎所有上述細胞因子的表達量都高于模型組和PDTC組；PDTC組MyD88、IRAK-1、TRAF-6、TLR2的表達量與模型組幾乎處于同一水平，二者無明顯差異；PDTC組IgE、IκB、IL-1、NF-κB的表達量幾乎都明顯低于模型組；PDTC對IL-6和TNF-β的表達無明顯的抑制作用； （6）模型組、PTG組和PDTC組人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中IFN-β的表達水平都稍高于對照組，但模型組、PTG組和PDTC組人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中IFN-β的表達水平無明顯差異； （7）TP組大鼠AR癥狀得到較有效地改善，上述細胞因子的表達量都明顯低于模型組。 結(jié)論： （1）采用卵清白蛋白腹腔注射并多次滴鼻可成功建立大鼠變應性鼻炎模型； （2）TLR2和NF-κB在AR發(fā)病過程中起著關(guān)鍵作用； （3）推測AR的發(fā)病機制為：鼻粘膜細胞接觸過敏原后，，TLR2被激活，先與MyD88結(jié)合，激活I(lǐng)RAK-1，IRAK-1活化后進而激活NF-κB和IκB，啟動IL-1、IL-6、TNF-β、IgE的表達，從而誘發(fā)變應性鼻炎； （4）TLR2介導的TLR2-NF-κB信號通路是一種MyD88依賴性通路； （5）人和大鼠AR的發(fā)病過程具有相似的機制和TLR2-NF-κB信號通路； （6）PDTC對大鼠鼻粘膜組織和人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中IL-6、TNF-β的表達水平無明顯的抑制作用，但卻明顯抑制IL-1、IgE的表達水平； （7）TP可有效緩解大鼠AR癥狀，原因是通過抑制TLR2-NF-κB信號通路，下調(diào)IL-1、IL-6、TNF-β、IgE等細胞因子的表達來實現(xiàn)的。
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【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R765.21

【參考文獻】

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本文編號：2281473