【摘要】：目的：檢測多能成體祖細胞(MAPC)的培養(yǎng)條件對人脂肪干細胞(hADSCs)生長的影響,旨在獲得更適合治療視網(wǎng)膜變性疾病的供體細胞。 方法：通過細胞形態(tài)觀察、MTT實驗、克隆形成率、PCR檢測、以及成脂、成骨、成軟骨分化潛能檢測等,研究MAPC培養(yǎng)條件下hADSCs的特征,并用MAPC培養(yǎng)處理的hADSCs進行RCS大鼠視網(wǎng)膜下腔移植,通過視網(wǎng)膜電圖(ERG)和TUNEL檢測,判斷細胞移植治療對視功能及視網(wǎng)膜細胞凋亡的影響。 結(jié)果：MAPC培養(yǎng)處理的hADSCs細胞增殖能力及克隆形成率均增強,形成的克隆較大且可穩(wěn)定傳10代以上,且具有成脂、成骨、成軟骨的多向分化潛能,細胞表面標(biāo)記物及細胞因子出現(xiàn)差異表達：CD140b、CD90、CD47、HGF和PEDF顯著上調(diào),CD73、CD105和IL-6顯著下調(diào)。與未治療的RCS視網(wǎng)膜相比,移植MAPC培養(yǎng)條件處理的hADSCs(P4)3周后,RCS大鼠的B波波幅明顯升高,外核層細胞凋亡明顯減少。 結(jié)論：MAPC培養(yǎng)條件處理的hADSCs顯示出更好的視網(wǎng)膜神經(jīng)保護作用,適合用于治療視網(wǎng)膜退行性疾病。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of (MAPC) culture conditions on the growth of human adipose stem cells (hADSCs) in order to obtain more suitable donor cells for the treatment of retinal degeneration. Methods: the characteristics of hADSCs in MAPC culture were studied by means of cell morphology observation, clone formation rate and polymerase chain reaction (PCR), lipogenesis, osteogenesis, cartilage differentiation potential and so on. HADSCs cultured with MAPC was used for subretinal cavity transplantation in RCS rats. The effects of cell transplantation on visual function and retinal cell apoptosis were evaluated by electroretinogram (ERG) and TUNEL detection. Results the proliferation ability and clone formation rate of hADSCs cells treated with WMAPC were enhanced, and the clones formed were large and stable for more than 10 generations, and had the potential of fat-forming, osteogenesis and cartilage differentiation. The expression of cell surface markers and cytokines were significantly up-regulated by the expression of: CD140, CD90, CD47, HGF and PEDF, and the down-regulation of CD73, CD105 and IL-6 were observed. Compared with the untreated RCS retina, the B wave amplitude of hADSCs (P4) treated with MAPC culture condition was significantly increased and the apoptosis of the outer nuclear layer cells was significantly decreased 3 weeks after transplantation. Conclusion the hADSCs treated by WMA PC has better neuroprotective effect on retina and is suitable for the treatment of retinal degenerative diseases.
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R774.1

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8 張s，

本文編號：2210597