【摘要】：目的建立并優(yōu)化整體雞胚原位雜交的實驗方法,降低背景,提高信號強度,為后續(xù)實驗提供良好條件。方法通過對整體雞胚Bmp4(bone morphogenetic protein 4,骨形態(tài)蛋白)基因的原位雜交,摸索實驗過程中起決定作用的影響因素及其最佳工作狀態(tài)。結(jié)果在整體雞胚Bmp4原位雜交均獲得高特異性和高強度的雜交信號,且背景色低。結(jié)論成功建立并優(yōu)化了整體雞胚原位雜交體系。
[Abstract]:Objective to establish and optimize the in situ hybridization (ish) method of whole chicken embryo, to reduce the background, to improve the signal intensity, and to provide good conditions for further experiments. Methods by in situ hybridization of the whole chicken embryo Bmp4 (bone morphogenetic protein 4 (bone morphogenetic protein) gene, the determinant factors and their optimal working conditions were explored. Results High specific and high intensity hybridization signals were obtained in whole chicken embryo Bmp4 in situ hybridization, and the background color was low. Conclusion the in situ hybridization system of whole chicken embryo was successfully established and optimized.
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科解放軍耳鼻咽喉研究所;
【基金】：國家自然基金專項基金項目(31340055,31140047) 解放軍總醫(yī)院專利轉(zhuǎn)化基金項目(42411D19) 解放軍總醫(yī)院苗圃基金項目(07MP24)聯(lián)合資助
【分類號】：R764

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 賈聰聰;張小晶;黃陳平;林林;趙淑江;靳大慶;;斑馬魚胚胎發(fā)育過程中FGF3基因的表達(dá)[J];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報;2012年04期

2 湯麗川;張悅;鄒藝輝;;雞胚Bmp4和Cath1原位雜交RNA探針的制備[J];中華耳科學(xué)雜志;2014年03期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 胡懷強;周永紅;曹秉振;王新陸;;復(fù)健片對腦梗死后大鼠腦組織神經(jīng)生長導(dǎo)向因子的影響[J];中華中醫(yī)藥雜志;2010年04期

2 閔敏,丁新生,田向陽,王楓,鄧曉萱,姚娟;神經(jīng)生長導(dǎo)向因子Slit mRNA在人胚胎脊髓的原位雜交定位[J];江蘇醫(yī)藥;2004年05期

3 王惠;錢沖;郭峰;關(guān)超;蘇長青;白洪志;;實時定量PCR檢測技術(shù)研究進展[J];種子;2013年06期

4 湯麗川;張悅;鄒藝輝;;雞胚Bmp4和Cath1原位雜交RNA探針的制備[J];中華耳科學(xué)雜志;2014年03期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前4條

1 張露;電針百會、印堂穴對顱腦損傷大鼠腦內(nèi)Slit2 mRNA的影響[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

2 閔敏;神經(jīng)生長導(dǎo)向因子Slit及其受體Roundabout在人胚胎脊髓的表達(dá)和意義[D];南京醫(yī)科大學(xué);2004年

3 尹俊鋒;軸突導(dǎo)向因子EphrinA2和Semaphorin3A在癲癇患者顳葉中表達(dá)的變化[D];鄭州大學(xué);2009年

4 徐琛;外源ABA對低溫下冬小麥膜質(zhì)抗寒性的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 都愛蓮,程虹,丁新生,侯熙德;神經(jīng)生長的誘向因子與中樞神經(jīng)再生[J];中華神經(jīng)科雜志;2000年02期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 吳書佳;;流感疫苗生產(chǎn)原料雞胚消毒方法研究[J];中國當(dāng)代醫(yī)藥;2011年16期

2 李勇,孟昭亨,陳星,趙如冰,刀京晶,劉曉慧,李竹;雞胚血中同型半胱氨酸和葉酸相互關(guān)系的初步觀察[J];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2000年04期

3 丁建松;聶繼華;張素萍;童建;汪雪生;徐燕英;;雞胚發(fā)育后期心電圖的無損測定及心率變化[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2009年01期

4 湯球;崔淑芳;蔡麗萍;江鵬亮;;雞胚宮頸癌模型的建立及其生物學(xué)特性[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2010年10期

5 馮平福,王雨若;雞胚腦電波個體發(fā)生的研究[J];河南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1987年03期

6 程上穆;程廷楷;李秀華;;靈芝對雞胚視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞影響[J];江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1998年04期

7 孟列素,譚武紅,蘇敏,田東萍,張舸,翟連榜,王立新,楊占田;硒對雞胚腦發(fā)育的影響[J];中國地方病學(xué)雜志;2005年01期

8 李雪梅,潘達(dá)鑫,徐玉屏,饒金才,余月華,彭澤華;用雞胚研究腫瘤移植與轉(zhuǎn)移的模型[J];中國病理生理雜志;1988年04期

9 尉軍;孔德軍;李健群;;碘、溴離子和三碘甲腺原氨酸對雞胚肝臟攝取~3H—亮氨酸的影響[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);1982年04期

10 唐士元;李國艾;王太華;;非洲鈍緣蜱(Ornithodoros moubata)和豚鼠、雞胚對精河株斑點熱立克次體易感性的比較[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;1982年04期

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1 楊宇;龔萍;雷薇薇;俸艷萍;李世軍;彭秀麗;龔炎長;;雞胚中整體原位雜交技術(shù)的優(yōu)化[A];中國家禽科學(xué)研究進展——第十四次全國家禽科學(xué)學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2009年

2 高建峰;劉孝東;趙麗茹;李家奎;;雞胚肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜內(nèi)科學(xué)分會第七屆代表大會暨學(xué)術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2011年

3 阿依木古麗;蔡勇;魏鎖成;霍生東;李國榮;;靜寧雞胚腦發(fā)育的形態(tài)學(xué)觀察[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

4 王新新;米玉玲;曾衛(wèi)東;張才喬;;茶多酚緩解雞胚生殖細(xì)胞氧化損傷的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

5 唐夢君;高玉時;張小燕;陸俊賢;蒲俊華;顧榮;;雞胚腸上皮細(xì)胞體外分離及原代培養(yǎng)研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家禽學(xué)分會第九次代表會議暨第十六次全國家禽學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2013年

6 劉佳利;陳大為;崔勝;;雌激素促進早期雞胚背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞增殖和凋亡的研究[A];動物生理生化學(xué)分會第八次學(xué)術(shù)會議暨全國反芻動物營養(yǎng)生理生化第三次學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2004年

7 解美娜;張才喬;米玉玲;曾衛(wèi)東;;卵泡刺激素和雌激素對培養(yǎng)的雞胚卵巢生殖細(xì)胞增殖的影響[A];動物生理生化學(xué)分會第八次學(xué)術(shù)會議暨全國反芻動物營養(yǎng)生理生化第三次學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2004年

8 于敏莉;俞萍;米玉玲;張才喬;;維甲酸對雞胚生殖細(xì)胞減數(shù)分裂調(diào)控機理的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會第十七次學(xué)術(shù)研討會論文集（下）[C];2012年

9 阿依木古麗;蔡勇;郭會會;周啟武;孫偉;羅小平;;靜寧雞胚脾臟發(fā)育的形態(tài)學(xué)觀察[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

10 羅冬梅;佘銳萍;胡艷欣;陳麗麗;張艷梅;吳瓊;王建德;;雙酚A對雞胚法氏囊發(fā)育影響的病理形態(tài)學(xué)觀察[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)病理學(xué)分會第十五次、中國病理生理學(xué)會動物病生專業(yè)委員會第十四次學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2007年

相關(guān)重要報紙文章 前7條

1 ;病原分離與鑒定[N];中國畜牧水產(chǎn)報;2000年

2 ;三聯(lián)活疫苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[N];中國畜牧水產(chǎn)報;2000年

3 徐桓;SPF雞群與疫苗生產(chǎn)[N];農(nóng)民日報;2003年

4 ;雞新城疫中等毒力活疫苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[N];中國畜牧水產(chǎn)報;2000年

5 ;雞傳染性喉氣管炎活疫苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[N];中國畜牧水產(chǎn)報;2000年

6 朱志峰 張登友;烏雞新城疫的診治[N];農(nóng)民日報;2003年

7 唐山市豐南區(qū)農(nóng)業(yè)畜牧水產(chǎn)局 李曉杰;鵪鶉死亡 新城疫作崇[N];河北科技報;2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 趙立;飼料中鉛在雞種蛋和胚胎中的沉積及其對雞胚肝、腎毒性機理的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

2 葛楚天;雞胚原始生殖細(xì)胞發(fā)育調(diào)控及其機理的研究[D];浙江大學(xué);2010年

3 劉佳利;雌激素、雄激素對雞胚背根神經(jīng)節(jié)和垂體發(fā)育的作用及相關(guān)機制的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

4 唐新燕;雞胚原始生殖細(xì)胞增殖調(diào)控機制的研究[D];浙江大學(xué);2006年

5 何玉琴;雞胚腺垂體激素特異性細(xì)胞的發(fā)生及蛋白轉(zhuǎn)錄因子Isl-1對其表達(dá)的調(diào)控性研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

6 米玉玲;黃酮類化合物緩解內(nèi)分泌干擾物引起的雄性雞胚生殖毒性機理的研究[D];浙江大學(xué);2006年

7 張暉;四種發(fā)育調(diào)控因子mRNA在早期雞胚中的分布及其在胚胎發(fā)育中的作用研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 張素梅;貝氏隱孢子蟲雞胚氣管組織培養(yǎng)模型建立與初步應(yīng)用[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

9 張世棟;SPF雞生產(chǎn)若干關(guān)鍵技術(shù)的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

10 俸艷萍;雞的性比及性分化早期胚胎性別差異表達(dá)基因研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 陳蕾;錳致體外培養(yǎng)雞胚腦神經(jīng)元凋亡機理的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 李進國;雞胚肥大細(xì)胞的發(fā)育研究[D];貴州大學(xué);2009年

3 張運鋒;T、E對早期雞胚性腺分化及生長發(fā)育的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

4 黃蘭香;雞胚發(fā)育過程中胚液蛋白質(zhì)動態(tài)變化分析[D];西南大學(xué);2005年

5 李文軍;鎘致體外培養(yǎng)雞胚腦神經(jīng)元凋亡機理的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

6 邰大鵬;雞胚不同組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)及永生化[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2011年

7 官X;維甲酸對雞胚原始生殖細(xì)胞增殖和粘附的作用[D];浙江大學(xué);2010年

8 任軍甫;雞胚孵化過程中營養(yǎng)成分變化規(guī)律的研究與膠囊研制[D];河南科技大學(xué);2011年

9 王志方;SPF雞胚與低免雞胚在禽流感滅活疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

10 刁小龍;雞PrP結(jié)構(gòu)特征及在雞胚發(fā)育過程中的表達(dá)規(guī)律[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

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本文編號：2186697