本文選題：喉鱗癌 + 區(qū)域癌化　； 參考：《山西醫(yī)科大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：背景和目的：喉鱗癌組織學(xué)上以鱗狀細(xì)胞癌最為常見。喉鱗癌目前的治療手段仍以外科手術(shù)為主�，F(xiàn)代喉外科學(xué)提倡：喉鱗癌治療應(yīng)在保證生存率的前提下，盡量保留喉的功能。但是如何既保證生存率，又最大限度地保留喉功能是目前提高喉鱗癌手術(shù)療效的瓶頸。外科切緣不僅是保證患者術(shù)后生存率與生存質(zhì)量的核心因素，同時也是實(shí)施喉功能保留手術(shù)時臨床醫(yī)師較難把握的手術(shù)關(guān)鍵之一。切緣過大則喉正常組織被過多地切除，術(shù)后喉功能受損，嚴(yán)重影響患者術(shù)后的生存質(zhì)量；切緣過小則容易導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞殘留，引起患者術(shù)后的復(fù)發(fā)，降低了生存率，因此對于外科切緣量和性的把握是臨床醫(yī)師診療過程中面臨的棘手問題。常規(guī)喉外科切緣是否安全，常以形態(tài)學(xué)及組織病理學(xué)為基礎(chǔ)，但常規(guī)病理學(xué)檢查為陰性時仍有一定局部復(fù)發(fā)率，這反映出病理學(xué)檢查在手術(shù)切緣安全判斷的局限性�！皡^(qū)域癌化”(field cancerization)是指在外界致癌因素影響下，特定器官的一個或一組細(xì)胞積累遺傳學(xué)改變，轉(zhuǎn)化為癌前細(xì)胞，在致癌因素的持續(xù)作用下，癌前細(xì)胞進(jìn)一步累積基因改變而轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂袗盒缘哪[瘤細(xì)胞，而那些發(fā)生了基因改變的癌前細(xì)胞可以存在于切緣組織病理正常的黏膜中。雜合性缺失（loss of heterozygosity，LOH）反映的是腫瘤發(fā)生中特征性的基因改變，是研究腫瘤區(qū)域癌化的一種常用技術(shù)手段，目前針對喉鱗癌“區(qū)域癌化”的研究尚少。本研究擬通過LOH分析，，驗(yàn)證喉鱗癌患者癌化區(qū)域的存在，通過分析比較基因改變情況，探尋在喉鱗癌發(fā)生發(fā)展過程中可能涉及的位點(diǎn)，并對目前的外科切緣的安全性進(jìn)行探討。 方法：調(diào)取35例喉鱗癌患者手術(shù)切除后石蠟包埋組織標(biāo)本，其中5例為術(shù)后復(fù)發(fā)并行二次手術(shù)患者。依據(jù)第7版UICC標(biāo)準(zhǔn)及WHO標(biāo)準(zhǔn)對患者進(jìn)行TNM分期及病理分級。石蠟包埋組織行7μm連續(xù)切片、HE染色，在顯微鏡下區(qū)分腫瘤、癌旁及切緣等不同細(xì)胞分區(qū)并對各分區(qū)進(jìn)行篩查，挑選符合標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)本；使用激光捕獲顯微切割技術(shù)（Laser Capture microdissection，LCM）分別在腫瘤中心(T)，癌旁（F1-F4：癌旁距離5mm； F5：癌旁距離5mm），以及切緣(Ma-Md)位置進(jìn)行顯微切割，提取細(xì)胞；分別檢測各區(qū)域細(xì)胞的LOH情況；結(jié)合病案資料分析對比各分區(qū)的LOH情況。為了檢驗(yàn)喉鱗癌中是否存在區(qū)域癌化，本研究中使用位于9p、3p、17p、18q以及8p染色體上的9個微衛(wèi)星位點(diǎn)（microsatellite）。這些位點(diǎn)選取是來自于潛在或者已知的抑癌基因的連鎖位點(diǎn)，同時根據(jù)文獻(xiàn)報道，選擇在頭頸腫瘤中研究較多的位點(diǎn)。對于在腫瘤中檢測到LOH的患者，根據(jù)LOH的模式差異判斷復(fù)發(fā)喉癌的克隆來源，并使用微衛(wèi)星位點(diǎn)分析癌旁黏膜及手術(shù)切緣的差異。 結(jié)果： 1.喉鱗癌患者中有25例在癌細(xì)胞中心位置(T)檢出一個或多個位點(diǎn)的LOH，檢出率83.3%（25/30）； 2.9個微衛(wèi)星位點(diǎn)在腫瘤中心的檢出率分別為： D3S1284（31.6%）、D3S1300（44.4%）、D3S1234（55%）、D3S1568（47.1%）、D9S171（44.4%）、D9S1870（42.1%）、TP53（58.8%）、D18S1110（33.3%）以及D8S518（35.3%）。 3.在5名復(fù)發(fā)患者中，復(fù)發(fā)腫瘤LOH的模式與原發(fā)腫瘤的LOH一致； 4.抑癌基因TP53在腫瘤中心位置LOH檢出與喉鱗癌患者的年齡、腫瘤發(fā)生的部位、淋巴轉(zhuǎn)移、T分期均無關(guān)（P＞0.05），與病理分級相關(guān)（P=0.0210.05）。其余各指標(biāo)在腫瘤中心位置LOH檢出與喉鱗癌患者的年齡、腫瘤發(fā)生的部位、淋巴轉(zhuǎn)移、病理分級、T分期均無關(guān)（P＞0.05）； 5.微衛(wèi)星位點(diǎn)在癌旁黏膜（F1-F4，F(xiàn)5）有不同程度檢出，各微衛(wèi)星位點(diǎn)檢出率分別是：D3S1284（83.3%）、D3S1300（75%）、D3S1234（72.7%）、D3S1568（75%）、D9S171（87.5%）、D9S1870（75%）、TP53（80%）、D8S518（33.3%）以及D18S1110（33.3%）； 6.微衛(wèi)星位點(diǎn)在切緣（Ma-Md）有不同程度LOH檢出，各微衛(wèi)星位點(diǎn)檢出率分別是：D3S1284（83.3%）、D3S1300（37.5%）、D3S1234（54.5%）、D3S1568（50%）、D9S171（62.5%）、D9S1870（62.5%）、TP53（70%）、D8S518（16.7%）以及D18S1110（16.7%）； 7.18名患者(60%)癌旁黏膜存在至少一個微衛(wèi)星位點(diǎn)的LOH，其中10名患者（編號：1、4、6、9、10、12、14、23、26、27）不同區(qū)域的癌旁黏膜表現(xiàn)為相同的基因改變，6名患者（編號：11、17、19、20、22、25）癌旁黏膜表現(xiàn)為不同的基因位點(diǎn)的丟失。此外還有2名患者只有一個區(qū)域發(fā)生LOH（編號：3、8）； 8. D8S518位點(diǎn)LOH在17、23患者癌旁黏膜檢出，尤其是17號患者，該位點(diǎn)的改變擴(kuò)展到了手術(shù)的切緣。D18S1110在3、20號患者的癌旁黏膜中檢出，其中20號患者在手術(shù)后8個月發(fā)生了喉癌的復(fù)發(fā)（編號33）；; 9.15名患者(50%)切緣檢測到至少1個位點(diǎn)的LOH，其中6名患者（編號：4、8、9、10、12、22）不同區(qū)域的切緣黏膜表現(xiàn)為相同的基因改變，1名患者（編號：3）切緣黏膜表現(xiàn)為不同的基因位點(diǎn)的丟失，其余8名患者（編號：6、11、14、17、19、23、26、27）只有一個區(qū)域的切緣檢測到了LOH； 10.8名患者(編號：1、6、10、11、14、19、26、27)腫瘤中心（T）與癌旁區(qū)域表現(xiàn)為相同的基因改變，10名患者的腫瘤中心（T）較癌旁黏膜有額外的基因改變(編號：3、4、8、9、11、12、17、20、23、25)。此外，有6名患者(編號：3、6、10、11、14、19)腫瘤中心（T）與切緣表現(xiàn)為相同的基因改變，還有10名患者(編號：3、4、8、9、12、17、22、23、26、27)切緣黏膜表現(xiàn)不同于腫瘤中心（T）的基因改變； 11.12名患者（編號：3、4、6、8、9、10、11、12、14、17、19、26）同一標(biāo)本中手術(shù)切緣與癌旁黏膜具有LOH的一致性，這兩個區(qū)域具有共同的基因改變過程。而3號患者切緣（Mb）、22（Mb、Md）、27號患者切緣（Ma）表現(xiàn)出與癌旁黏膜的LOH模式的差異； 12.5名復(fù)發(fā)腫瘤患者的癌旁黏膜都檢測到了微衛(wèi)星的LOH,3名患者(編號：31、32、34)癌旁黏膜與腫瘤LOH模式一致，33和35號患者腫瘤中心（T）較癌旁黏膜有額外的基因改變。4名復(fù)發(fā)患者(編號：32、33、34、35)在切緣檢測到LOH，發(fā)生LOH的位點(diǎn)較腫瘤中心（T）減少。與原發(fā)腫瘤相比復(fù)發(fā)腫瘤的切緣和癌旁黏膜的LOH模式存在差異，31號患者未在切緣檢測到LOH，32、33、34、35號患者癌旁黏膜的LOH模式不同于相對應(yīng)的原發(fā)腫瘤癌旁黏膜，32、33、34、35號患者切緣檢出的LOH模式也與原發(fā)腫瘤存在差異； 13.癌旁黏膜（F1-F4，F(xiàn)5）LOH檢出與喉鱗癌患者的年齡、腫瘤發(fā)生的部位、T分期、病理分級均無關(guān)（P＞0.05），與淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)（P=0.0080.05）； 14.切緣（Ma-Md）LOH檢出與喉鱗癌患者的年齡、腫瘤發(fā)生的部位、T分期、病理分級均無關(guān)（P＞0.05），與淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)（P=0.0030.05）； 15. TP53在癌旁黏膜（F1-F4，F(xiàn)5）檢出與喉鱗癌患者的年齡、腫瘤發(fā)生的部位、病理分級、T分期均無關(guān)（P＞0.05），與淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)（P=0.0490.05）。其余指標(biāo)在癌旁黏膜（F1-F4，F(xiàn)5）檢出與喉鱗癌患者的年齡、腫瘤發(fā)生的部位、淋巴轉(zhuǎn)移、病理分級、T分期均無關(guān)（P＞0.05）。所有分指標(biāo)在切緣（Ma-Md）檢出與喉鱗癌患者的年齡、腫瘤發(fā)生的部位、淋巴轉(zhuǎn)移、病理分級、T分期均無關(guān)（P＞0.05）。 結(jié)論： 1.微衛(wèi)星位點(diǎn)D3S1300、D3S1234、D3S1568、D9S171、D9S1870、TP53在腫瘤中檢測超過40%，說明在喉鱗癌中這6個位點(diǎn)易發(fā)生改變，可考慮作為檢測喉鱗癌LOH的位點(diǎn)； 2.復(fù)發(fā)的喉鱗癌與原發(fā)腫瘤存在克隆相關(guān)性，是屬于喉鱗癌的局部原位復(fù)發(fā)，說明組織學(xué)陰性的切緣作為手術(shù)切除范圍的判定存在一定風(fēng)險； 3.研究中只有TP53的LOH與病理分級相關(guān)(p0.05)，但該結(jié)果仍需進(jìn)一步深入研究。其他指標(biāo)與年齡、性別、腫瘤部位、T分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無相關(guān)性； 4.喉鱗癌是多因素、多階段、多步驟參與的漸進(jìn)的病變過程； 5.本研究中大多數(shù)的喉鱗癌患者癌旁黏膜存在區(qū)域癌化，而且癌化區(qū)域的范圍隨患者不同而發(fā)生變化，有相當(dāng)大的一部分的患者區(qū)域癌化擴(kuò)展到手術(shù)的切緣； 6. D8S518和D18S1110位點(diǎn)在癌前區(qū)域向喉鱗癌發(fā)展的過程中可能起關(guān)鍵作用，目前還需進(jìn)一步的研究； 7.癌旁黏膜的TP53的LOH可以考慮用來評估喉鱗癌是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。
[Abstract]:BACKGROUND & OBJECTIVE : Squamous cell carcinoma ( SCC ) is most common in laryngeal squamous cell carcinoma ( SCC ) .
This study is a common technique in the diagnosis and treatment of laryngeal squamous cell carcinoma . It is a common technique to study the carcinogenesis of laryngeal squamous cell carcinoma .

Methods : Thirty - five patients with laryngeal squamous cell carcinoma underwent surgical resection of paraffin - embedded tissues , 5 of them were patients with postoperative recurrence and parallel secondary operation . According to the UICC standard of 7th edition and WHO standard , TNM staging and pathological grade were performed on the patients .
Laser Capture microdissection ( LCM ) was used at the tumor center ( T ) , adjacent to the cancer ( F1 - F4 : 5 mm ) .
F5 : ( 5 mm proximal to the cancer ) and microdissection at the edge ( Ma - Md ) position to extract the cells ;
and the loss of heterozygosity of each region cell is detected respectively ;
In order to examine the presence or absence of regional cancer in laryngeal squamous cell carcinoma , 9 microsatellite loci were used in the study .

Results :

1 . Of 25 patients with laryngeal squamous cell carcinoma ( SCC ) , there were 25 cases ( 83 . 3 % , 25 / 30 ) in which one or more sites were detected at the center of the cancer cell ( T ) .


The detection rates of 2.9 microsatellite loci in tumor centers were as follows : D3 S1284 ( 31.6 % ) , D3 S1300 ( 44.4 % ) , D3 S1234 ( 55 % ) , D3 S1568 ( 47.1 % ) , D9S171 ( 44.4 % ) , D9S1870 ( 42.1 % ) , TP53 ( 58.8 % ) , D18S1110 ( 33.3 % ) , and D8S518 ( 35.3 % ) .

3 . In 5 patients with recurrent tumor , the pattern of recurrent tumor was consistent with that of primary tumor .


4 . There was no correlation with pathological grade ( P > 0 . 05 ) . All the other indexes were correlated with pathological grade ( P = 0.0210 . 05 ) . All the other indexes were not related to the age , tumor size , lymph node metastasis , pathological grade and T stage of the patients with laryngeal squamous cell carcinoma ( P > 0.05 ) .


5 . The detection rates of microsatellite loci ( F1 - F4 , F5 ) were detected in different degrees . The detection rates of microsatellite loci were as follows : D3 S1284 ( 83.3 % ) , D3 S1300 ( 75 % ) , D3 S1234 ( 72.7 % ) , D3 S1568 ( 75 % ) , D9S171 ( 87.5 % ) , D9S1870 ( 75 % ) , TP53 ( 80 % ) , D8S518 ( 33.3 % ) , and D18S1110 ( 33.3 % ) ;


6 . The microsatellite loci were detected at different degrees in the margin ( Ma - Md ) . The detection rates of microsatellite loci were as follows : D3 S1284 ( 83.3 % ) , D3 S1300 ( 37.5 % ) , D3 S1234 ( 54.5 % ) , D3 S1568 ( 50 % ) , D9S171 ( 62.5 % ) , D9S1870 ( 62.5 % ) , TP53 ( 70 % ) , D8S518 ( 16.7 % ) , and D18S1110 ( 16.7 % ) ;


At least one microsatellite locus was found in 7 . 18 patients ( 60 % ) , in which 10 patients ( No . 1 , 4 , 6 , 9 , 10 , 12 , 14 , 23 , 26 , 27 ) showed the same gene change , and 6 patients ( No . 11 , 17 , 19 , 20 , 22 , 25 ) showed different gene loci .


8 . D18S1110 was found in the adjacent mucosa of patients with No . 3 and 20 . D18S1110 detected the recurrence of laryngeal cancer within 8 months after operation ( No . 33 ) .
( b ) ;

In 9.15 patients ( 50 % ) , at least 1 locus was detected , among which 6 patients ( No . 4 , 8 , 9 , 10 , 12 , 22 ) showed the same gene change . One patient ( No . : 3 ) showed loss of gene locus , while the remaining 8 patients ( No . 6 , 11 , 14 , 17 , 19 , 23 , 26 , 27 ) had only one regional margin to detect the loss of heterozygosity ;


10.8 patients ( No . 1 , 6 , 10 , 11 , 14 , 19 , 26 , 27 ) showed the same gene change in the tumor center ( T ) and adjacent to the cancer , and the tumor center ( T ) of 10 patients had an additional gene change ( No . 3 , 4 , 8 , 9 , 11 , 12 , 17 , 20 , 23 , 25 ) than the adjacent mucosa . In addition , 6 patients ( No . 3 , 6 , 10 , 11 , 14 , 19 ) tumor center ( T ) and margin showed the same gene change , and 10 patients ( No . 3 , 4 , 8 , 9 , 12 , 17 , 22 , 23 , 26 , 27 ) showed different gene changes than tumor center ( T ) ;


11.12 patients ( Nos . 3 , 4 , 6 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 14 , 17 , 19 , 26 ) had a common genetic change in the same specimen .


There was a significant difference between tumor center ( T ) in 3 patients ( No . 31 , 32 , 34 ) and tumor center ( T ) in tumor center ( T ) .


13 . There was no correlation with the age , tumor size , T stage and pathological grade of the tumor adjacent mucosa ( F1 - F4 , F5 ) ( P > 0.05 ) , which was related to lymph node metastasis ( P = 0.0080.05 ) .


14 . There was no correlation with lymph node metastasis ( P > 0 . 05 ) and lymph node metastasis ( P = 0 . 0030 . 05 ) .


The age , tumor size , lymph node metastasis , pathological grade and T stage of the patients with laryngeal squamous cell carcinoma ( P > 0.05 ) were detected by TP53 ( P > 0.05 ) . All the indexes were not related to the age , tumor incidence , lymph node metastasis , pathological grade and T stage of the patients with laryngeal squamous cell carcinoma ( P > 0.05 ) .

Conclusion :

1 . There were more than 40 % of microsatellite loci , D3 S1300 , D3 S1234 , D3 S1568 , D9S171 , D9S1870 , and TP53 in the tumor .


2 . The correlation between recurrent laryngeal squamous cell carcinoma and primary tumor is the local recurrence of laryngeal squamous cell carcinoma .


3 . Only TP53 in the study was correlated with pathological grade ( p < 0.05 ) , but the results still need to be further studied . The other indexes had no correlation with age , sex , tumor location , T stage and lymph node metastasis .


4 . laryngeal squamous cell carcinoma is a progressive disease process involving multiple factors , multi - stage and multi - step participation ;


5 . In most of the patients with laryngeal squamous cell carcinoma , there was a regional cancer in the adjacent mucosa , and the extent of the cancerous region varied with the patient , with a significant portion of the patient ' s regional cancer extending to the margins of the operation ;


6 . The D18S518 and D18S1110 loci play a key role in the development of laryngeal squamous cell carcinoma in the pre - cancerous region .


7 . Loss of heterozygosity of TP53 in the adjacent mucosa may be considered to assess the occurrence of lymph node metastasis in laryngeal squamous cell carcinoma .
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R739.65

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2 張再興;喉鱗癌相關(guān)蛋白質(zhì)組學(xué)研究及腫瘤標(biāo)志物的鑒定[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

3 張海利;MTA1基因表達(dá)與喉鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性及其調(diào)控作用的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

4 徐鷗;喉鱗癌微環(huán)境乏氧的客觀評估及有效改善乏氧對喉鱗癌化療抵抗的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

5 高偉;喉鱗癌中Hsa-miR-145-5p及靶基因FSCN1調(diào)控紊亂的新機(jī)制及臨床意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

6 高光峰;原發(fā)性及復(fù)發(fā)性喉鱗癌、治療后改變的CTP及伴發(fā)頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的DWI研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

7 牛燕燕;miR-9、miR-125b在喉鱗癌中的生物學(xué)功能研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

8 張世文;EGFRmAb功能化修飾金納米棒光熱誘導(dǎo)喉鱗癌細(xì)胞凋亡分子機(jī)制研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2012年

9 殷德濤;喉鱗癌中FHIT基因純合性缺失、甲基化、表達(dá)及其微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究[D];鄭州大學(xué);2003年

10 馬麗娟;利用激光捕獲顯微切割及基因芯片技術(shù)構(gòu)建喉鱗狀細(xì)胞癌基因組差異表達(dá)譜[D];中南大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 梁灼萍;尼美舒利對喉鱗癌Hep-2細(xì)胞裸鼠成瘤的影響及機(jī)制研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2010年

2 任凱;Annexin1在喉鱗癌及癌旁組織的表達(dá)及臨床意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

3 何玲;miR-21在喉鱗癌中的表達(dá)及其與PDCD4的相關(guān)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

4 王旭峰;RECK和MMP-9在喉鱗癌中的表達(dá)及相關(guān)性研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

5 王瑞;FASCIN-1和MMP-1在喉鱗癌中的表達(dá)及其臨床意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

6 胡守森;趨化因子CXCL12及受體CXCR4在喉鱗癌中的表達(dá)及意義[D];鄭州大學(xué);2010年

7 黃海翠;c-jun與brg1在喉鱗癌中的表達(dá)及臨床意義[D];吉林大學(xué);2011年

8 付前聰;抗人IgM抗體對喉鱗癌Hep-2細(xì)胞增殖、凋亡和細(xì)胞周期的影響[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2011年

9 劉蓓;抗人IgM抗體對喉鱗癌Hep-2細(xì)胞裸鼠成瘤的影響及機(jī)制研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2011年

10 房寧;Snail和E-cadherin在喉鱗癌中的表達(dá)與臨床意義[D];吉林大學(xué);2010年

本文編號：2117522