本文選題：生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43 + 晶狀體損傷　； 參考：《鄭州大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：視神經(jīng)損傷(optic nerve injury)是眼科常見(jiàn)的一種臨床眼外傷類(lèi)型及致盲原因,常見(jiàn)于各種面部、顱腦及眼眶外傷,如壓迫、牽拉、切斷等原因均能導(dǎo)致視神經(jīng)嚴(yán)重受損,可能造成患者視功能不可逆性的喪失。視神經(jīng)損傷后大量視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cells, RGCs)的壞死或凋亡,是視力喪失的主要原因。減緩或抑制RGCs的死亡及促進(jìn)其軸突的再生,是有效治療視神經(jīng)損傷和促進(jìn)視功能恢復(fù)的基礎(chǔ)。因此視神經(jīng)損傷再生已成為當(dāng)前國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。 傳統(tǒng)認(rèn)為成年哺乳動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后不能再生,損傷后的神經(jīng)元難以形成新的突觸連接。20世紀(jì)80年代,Hall等人用一段自體坐骨神經(jīng)移植到視神經(jīng)損傷區(qū),并成功地誘導(dǎo)激發(fā)了視神經(jīng)損傷后軸突的再生,中樞神經(jīng)損傷后不能再生的觀念發(fā)生了改變。近年來(lái)Leon和Fischer等研究發(fā)現(xiàn),單純晶狀體損傷能大大增加RGCs的存活率,并能促進(jìn)視神經(jīng)損傷后的軸突再生。因而晶狀體損傷促進(jìn)視神經(jīng)損傷再生的機(jī)制研究,受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。研究認(rèn)為激活的巨噬細(xì)胞在外周神經(jīng)損傷后,具有吞噬、合成和分泌多種活性因子等作用,形成有利于神經(jīng)再生的內(nèi)環(huán)境,從而促進(jìn)外周神經(jīng)的再生,但巨噬細(xì)胞在中樞神經(jīng)損傷再生中是否也有這種作用,晶狀體損傷能否激活巨噬細(xì)胞在視神經(jīng)損傷再生中發(fā)揮作用研究很少。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠在體實(shí)驗(yàn)研究的方法進(jìn)行進(jìn)一步探討和研究。 目的 研究晶狀體損傷促進(jìn)視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞軸突再生的作用,并探討活化的巨噬細(xì)胞所起作用,為視神經(jīng)損傷后治療方面提供新的思路。 方法 選用普通級(jí)成年健康Wistar大鼠50只作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組5只不做任何處理；單純視神經(jīng)橫斷傷(NC)組15只；聯(lián)合晶狀體損傷(NC+LP)組15只；聯(lián)合玻璃體腔注射酵母多糖(NC+ZI)組15只。分別在術(shù)后1周、2周、3周后處死大鼠5只,通過(guò)免疫組化方法應(yīng)用ED-1單克隆抗體,標(biāo)記視網(wǎng)膜內(nèi)激活的巨噬細(xì)胞,及免疫熒光方法標(biāo)記視網(wǎng)膜生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(growth associated protein 43, GAP-43)的表達(dá),觀察并記錄不同時(shí)間點(diǎn)陽(yáng)性熒光著色面積。 結(jié)果 正常對(duì)照組及NC組,在視網(wǎng)膜的各層中未見(jiàn)ED-1陽(yáng)性的巨噬細(xì)胞,NC+LP組及NC+ZI組,在視網(wǎng)膜的各層中可見(jiàn)ED-1陽(yáng)性巨噬細(xì)胞。 視網(wǎng)膜中GAP-43表達(dá)：正常對(duì)照組僅見(jiàn)少量GAP-43熒光素著色,主要集中在內(nèi)叢狀層,視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層未見(jiàn)著色。NC組術(shù)后1周時(shí)視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層可見(jiàn)少量GAP-43熒光素染色,隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸減少,在2周時(shí)基本消失。NC+LP組及NC+ZI組術(shù)后視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層可見(jiàn)大量GAP-43熒光素著色,術(shù)后前2周GAP-43著色面積較明顯,至3周時(shí)仍有著色。 NC組與正常組視網(wǎng)膜GAP-43陽(yáng)性細(xì)胞著色面積相比,在1周時(shí)有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)；在2、3周時(shí)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 NC組分別與NC+LP組及NC+ZI組在不同時(shí)間點(diǎn)視網(wǎng)膜GAP-43陽(yáng)性著色面積均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)；均在傷后早期GAP-43表達(dá)最多,以后其表達(dá)量逐漸下降。 NC+LP組與正常組相比,視網(wǎng)膜GAP-43陽(yáng)性細(xì)胞著色面積均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)；與NC+ZI組相比,1周時(shí)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),2、3周時(shí)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 NC+ZI組與正常組視網(wǎng)膜GAP-43陽(yáng)性細(xì)胞著色面積不同時(shí)間點(diǎn)均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)： NC+LP組(及NC+ZI組)在各時(shí)間點(diǎn)間相比較視網(wǎng)膜GAP-43陽(yáng)性細(xì)胞著 色而積均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。 結(jié)論 1.單純視神經(jīng)損傷后,早期僅見(jiàn)少量視網(wǎng)膜反應(yīng)性GAP-43的表達(dá)增多。 2.晶狀體損傷和玻璃體內(nèi)注射酵母多糖可以激活巨噬細(xì)胞,使視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜中GAP-43的表達(dá)明顯增多,對(duì)視神經(jīng)的軸突再生具有促進(jìn)作用,在損傷后前兩周時(shí)作用較明顯,可持續(xù)至第3周。
[Abstract]:optic nerve injury ( optic nerve injury ) is a common type and cause of blindness in ophthalmology . It is common in various facial , head and orbital trauma , such as compression , traction , cutting , etc .

In recent years , it has been found that the activation of macrophages can significantly increase the survival rate of RGCs and promote axonal regeneration after optic nerve injury . In recent years , it has been found that the activation of macrophages can significantly increase the survival rate of optic nerve and promote axonal regeneration after optic nerve injury .

Purpose

To study the effect of lens injury on retinal ganglion cell axonal regeneration after optic nerve injury , and to explore the role of activated macrophages in the treatment of optic nerve injury .

method

50 adult healthy Wistar rats were randomly divided into four groups : normal control group and normal control group .
15 cases of simple optic nerve transection injury ( NC ) group ;
15 patients with combined lens injury ( NC + LP ) ;
Fifteen rats were sacrificed at 1 week , 2 weeks and 3 weeks after surgery . The expression of the retinal growth related protein 43 ( GAP - 43 ) was marked by immunohistochemical method , and the stained area of positive fluorescence was observed and recorded .

Results

In normal control group and NC group , ED - 1 positive macrophages , NC + LP group and NC + ZI group were not seen in each layer of retina , and ED - 1 positive macrophages were seen in each layer of retina .

GAP - 43 expression in the retina was observed : only a small amount of GAP - 43 fluorescein staining was observed in the normal control group . The staining of GAP - 43 fluorescein was observed in the retinal ganglion cell layer at 1 week after operation .

Compared with the stained area of GAP - 43 positive cells in NC group , there was significant difference between NC group and normal group retinal GAP - 43 positive cells ( P0.01 ) .
There was no statistical difference between 2 and 3 weeks ( P0.05 ) .

There was significant difference between NC group and NC + LP group and NC + ZI group at different time points ( P0.01 ) .
The expression of GAP - 43 at the early stage of injury was the most , and the expression of GAP - 43 decreased gradually in the future .

Compared with the normal group , the staining area of GAP - 43 positive cells was significantly different between NC + LP group and normal group ( P0.01 ) .
There was no statistical difference ( P0.05 ) at 1 week compared with NC + ZI group ( P0.05 ) .

The staining area of GAP - 43 positive cells in NC + ZI group was significantly different from that in normal group ( P0.01 ) .

The GAP - 43 positive cells were positive in NC + LP group ( NC + ZI group ) at each time point .

There was significant difference between color and color ( P0.01 ) .

Conclusion

1 . After optic nerve injury , only a small amount of retinal reactive GAP - 43 was seen in the early stage .

2 . Lens damage and intravitreous injection of yeast polysaccharide can activate macrophages , and the expression of GAP - 43 in the retina after optic nerve injury is obviously increased , and the axonal regeneration of optic nerve can be promoted , and the effect is obvious two weeks after injury , which can last until the third week .
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R779.1

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本文編號(hào)：2103809