本文選題：EBV潛伏膜蛋白(EBV-LMP) + c�。� 參考：《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2015年06期

【摘要】：潛伏膜蛋白1(LMP1)是由EB病毒編碼的致瘤蛋白,眾多研究表明LMP1蛋白可通過NF-κB、p38 MAPK、c-JNK等多條重要信號通路引起鼻咽癌細(xì)胞的生物學(xué)行為改變。我們從EB病毒陽性的B95-8狨猴淋巴瘤細(xì)胞中克隆EB病毒LMP1 c DNA,構(gòu)建攜帶綠色熒光基因的真核表達質(zhì)粒p IRES2-Zs-Green1-LMP1,通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法將質(zhì)粒導(dǎo)入鼻咽癌細(xì)胞株CNE1、CNE2中,利用質(zhì)粒所攜帶的綠色熒光蛋白表達粗略計算轉(zhuǎn)染的效率,通過免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)、RT-PCR、Western-Blot檢測該質(zhì)粒的表達。本實驗室所構(gòu)建的p IRES2-Zs-Green1-LMP1表達質(zhì)粒能在鼻咽癌細(xì)胞內(nèi)表達LMP1蛋白,為后續(xù)的實驗研究奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Latent membrane protein 1 (LMP1) is a tumorigenic protein encoded by Epstein-Barr virus (EBV). Many studies have shown that LMP1 protein can cause biological behavior changes in nasopharyngeal carcinoma cells through several important signal pathways, such as NF- 魏 Bmp38 MAPKCnc-JNK. Epstein-Barr virus LMP1 c DNA was cloned from EBV-positive B95-8 marmoset lymphoma cells, and the eukaryotic expression plasmid pIRES2-Zs-Green1-LMP1 was constructed. The plasmid was transfected into nasopharyngeal carcinoma cell line CNE _ 1 and CNE _ 2 by liposome transfection. The efficiency of transfection was roughly calculated by using the expression of green fluorescent protein carried by the plasmid. The expression of the plasmid was detected by immunocytochemistry (ICC) RT-PCRN Western-Blot. The expression plasmid of pIRES2-Zs-Green1-LMP1 can express LMP1 protein in nasopharyngeal carcinoma cells.
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)科學(xué)實驗中心;廣西醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.81260405) 廣西自然科學(xué)基金(No.2011GXNSFA018233) 廣西區(qū)域性高發(fā)腫瘤早期防治研究重點實驗室基金項目(GK2013-A-02-02)共同資助
【分類號】：R739.63

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3 左埒蓮;朱美娟;都樹娟;盧建紅;李桂源;;EB病毒侵入宿主細(xì)胞機制的研究進展[J];病毒學(xué)報;2014年04期

4 張志偉;賀智敏;周敏;丁渭;余艷輝;陳主初;;EBV-LMP1促CNE2細(xì)胞遷移的作用機制[J];中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年04期

5 李曉勇;何愛軍;;鼻咽癌CNE1細(xì)胞株中EB病毒LMP1 cNDA的克隆及LMP1胞外段穩(wěn)定性研究[J];軍醫(yī)進修學(xué)院學(xué)報;2007年06期

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3 郭曉萍;陳時錦;張笠;蔣欽楊;蘭干球;郭亞芬;;廣西巴馬小型豬α-1,3-半乳糖轉(zhuǎn)移酶基因RNAi載體構(gòu)建與檢測[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2015年06期

4 張薇薇;戴德;;EB病毒潛伏膜蛋白1與鼻咽癌關(guān)系的研究進展[J];海南醫(yī)學(xué);2010年10期

5 張志偉;張瓊;余艷輝;歐陽詠梅;賀智敏;;LMP1羧基末端第三活性區(qū)對鼻咽上皮細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[J];南華大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2009年06期

6 柯霞;楊玉成;洪蘇玲;;脫氧核酶抑制鼻咽癌細(xì)胞EBV-LMP1的表達[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2010年12期

7 陶丹丹;徐潔潔;陳仁杰;毛圓;劉根焰;喬明哲;陳曦;陸美萍;丁競競;;鼻咽癌患者EB病毒潛伏膜蛋白1抗體血清學(xué)檢測及臨床意義[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2011年09期

8 李旭青;陳康;潘明金;蔡曉峰;鐘竹;;髓源性抑制細(xì)胞通過誘導(dǎo)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進鼻咽癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移[J];免疫學(xué)雜志;2014年12期

9 陳志;何韶華;蔣帥;劉鵬;白月璐;馮振卿;朱進;陳仁杰;;EB病毒潛伏膜蛋白LMP2A對人鼻咽癌細(xì)胞增殖與遷移特性的影響[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2015年04期

10 全勝;莊英幟;張志偉;劉重元;姜浩;趙強;朱建思;董琳;;LMP1-CTAR3對鼻咽癌干細(xì)胞SP18生長的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年45期

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3 張瓊;EB病毒潛伏性膜蛋白1轉(zhuǎn)化鼻咽上皮細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];中南大學(xué);2007年

4 劉敏娟;EBV體外轉(zhuǎn)染人B淋巴細(xì)胞方法的優(yōu)化及B淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞系的體外建立[D];蘇州大學(xué);2009年

5 朱文良;EB病毒Rta蛋白抗體IgG在鼻咽癌診斷中的應(yīng)用[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2009年

6 唐微;LMP1-CTAR3在鼻咽癌干細(xì)胞遷移侵襲中的作用及機制[D];南華大學(xué);2012年

7 羅碧強;鼻咽癌患者唾液中EB病毒特異性抗體檢測[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

8 沈華;基因芯片分析EB病毒LMP1誘導(dǎo)鼻咽癌干細(xì)胞增殖的機制[D];南華大學(xué);2011年

9 全勝;LMP1第三個功能活性區(qū)對鼻咽癌干細(xì)胞SP18生長的影響及機制[D];南華大學(xué);2011年

10 盧虹伊;RNA干擾人肝素酶表達對鼻咽癌細(xì)胞CNE-2生物學(xué)行為的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

【二級參考文獻】

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2 鐘碧玲;宗永生;林素暇;張敏;梁英杰;;鼻咽癌前期病變中的EB病毒感染(英文)[J];癌癥;2006年02期

3 滕智平，曾毅;應(yīng)用生物素標(biāo)記探針進行細(xì)胞原位雜交檢測人鼻咽癌細(xì)胞株中的EB病毒LMP基因[J];病毒學(xué)報;1994年02期

4 蘇玲，滕智平，，趙全壁，曾毅;高分化及低分化鼻咽癌細(xì)胞株中Epstein－Barr病毒潛伏感染膜蛋白（LMP1）基因的原位雜交與克隆及序列分析[J];病毒學(xué)報;1995年02期

5 南楠;張維元;;c-myc、P21~(WAF1)和LMP-1在鼻咽癌中表達的意義及其與Ki67的關(guān)系[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2006年01期

6 張帥;肖健云;謝常寧;劉勇;王承龍;田勇泉;;Survivin基因沉默對鼻咽癌CNE-2細(xì)胞株惡性表型的影響[J];暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2011年06期

7 蔡明;王國斌;陶凱雄;蔡昌學(xué);;Livin基因和Survivin基因聯(lián)合靶向siRNA抑制大腸癌細(xì)胞增殖的作用[J];藥學(xué)學(xué)報;2009年07期

8 江培洲,沈新明,呂麗春,黃華,姚開泰;細(xì)胞間接觸是EB病毒自發(fā)感染人類上皮細(xì)胞的有效途徑[J];中國病毒學(xué);2004年01期

9 唐瑤云;趙素萍;徐婧;鐘宇;肖健云;;FCU／5-氟胞嘧啶自殺基因前體藥物系統(tǒng)聯(lián)合放射治療鼻咽癌的實驗研究[J];中華病理學(xué)雜志;2006年08期

10 李志強;夏云飛;柳青;劉秀芳;韓非;易煒;羅偉;盧泰祥;;鼻咽癌放射治療分型的臨床研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2006年46期

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9 唐發(fā)清，田道法;黃連及其復(fù)方對鼻咽癌細(xì)胞裸鼠復(fù)種移植瘤的抑制作用[J];癌癥;1995年06期

10 江寧,曹利,張詢,姚開泰,李桂源;維甲酸對鼻咽癌細(xì)胞生長、表型和瘤基因表達的作用[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;1998年04期

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4 李步洪;林慧韞;謝樹森;;鼻咽癌細(xì)胞的熒光光譜特性[A];大珩先生九十華誕文集暨中國光學(xué)學(xué)會2004年學(xué)術(shù)大會論文集[C];2004年

5 姚輝璐;王桂文;彭立新;黎永青;;單個鼻咽癌細(xì)胞的拉曼光譜分析的研究[A];中國光學(xué)學(xué)會2006年學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2006年

6 王瓊;伍鋼;;血管緊張素Ⅱ及其受體阻滯劑與放療聯(lián)合對鼻咽癌細(xì)胞的作用及其機制的研究[A];2007第六屆全國放射腫瘤學(xué)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2007年

7 高健赫;蔡紅星;張喜和;;鼻咽癌細(xì)胞分泌物的拉曼光譜研究[A];第十六屆全國光散射學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2011年

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10 張配;趙素容;宋樂樂;浦龍健;蔣志文;劉浩;蔣琛琛;;低分子量肝素聯(lián)合紫杉醇對鼻咽癌細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響[A];促進科技經(jīng)濟結(jié)合，服務(wù)創(chuàng)新驅(qū)動發(fā)展——蚌埠市科協(xié)2012年度學(xué)術(shù)年會論文集[C];2012年

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本文編號：2096272