本文選題：人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤 + 黃荊子　； 參考：《南華大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的 研究黃荊子乙酸乙酯提取物(EVn-50)抑制體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞(RB細(xì)胞)生長作用以及誘導(dǎo)RB細(xì)胞凋亡作用,為開發(fā)和研制臨床治療人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤候選藥物提供實驗和理論依據(jù)。 方法 體外培養(yǎng)RB細(xì)胞;MTT比色法測定EVn-50對RB細(xì)胞增殖活性的影響;細(xì)胞計數(shù)法檢測RB細(xì)胞存活率,繪制生長曲線;軟瓊脂集落形成法測定EVn-50抑制體外培養(yǎng)RB細(xì)胞的錨定非依賴性生長作用;PI染色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)定量分析EVn-50誘導(dǎo)RB細(xì)胞凋亡程度;AO/EB染色熒光顯微鏡觀察EVn-50誘導(dǎo)RB細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變;DNA瓊脂糖凝膠電泳確證EVn-50誘導(dǎo)RB細(xì)胞凋亡作用。 結(jié)果 MTT比色法測定結(jié)果顯示:EVn-50可作為黃荊子抗RB的有效提取物。EVn-50對RB細(xì)胞增殖活性抑制作用強,并呈濃度依賴性,其IC50為9.60μg/ml;細(xì)胞計數(shù)結(jié)果表明:0.3、3.0、30.0μg/ml的EVn-50均具有抑制RB細(xì)胞生長作用,呈濃度和時間依賴性;軟瓊脂集落形成法的結(jié)果表明:EVn-50對RB細(xì)胞錨定非依賴性生長具有明顯的抑制作用,并呈濃度依賴性。PI染色流式細(xì)胞術(shù)分析的量效實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn):0.3、3.0、30.0μg/ml的EVn-50作用于RB細(xì)胞48小時后的細(xì)胞凋亡率分別是(2.4±0.1)%、(17.4±0.6)%、(40.7±0.7)%;而時效實驗中30.0μg/ml的EVn-50作用于RB細(xì)胞24、48、72小時后的細(xì)胞凋亡率分別是(20.8±0.4)%、(40.7±0.7)%、(63.1±0.8)%;遠(yuǎn)高于空白對照組的凋亡率(0.8±0.3)%。表明:EVn-50誘導(dǎo)RB細(xì)胞凋亡,并呈濃度和時間依賴性。AO/EB染色熒光顯微鏡觀察EVn-50處理后,部分RB細(xì)胞呈現(xiàn)胞質(zhì)和胞核呈紅色,核固縮或碎裂的典型凋亡細(xì)胞形態(tài)特征。EVn-50 0.3μg/ml、3.0μg/ml、30.0μg/ml分別處理RB細(xì)胞48小時,以及EVn-50 30.0μg/ml分別作用RB細(xì)胞0、24、48和72h瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)典型“梯形”DNA條帶。 結(jié)論 1. EVn-50抑制體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞RB細(xì)胞生長,呈濃度和時間依賴性;EVn-50是黃荊子抗人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤作用的有效提取物。 2. EVn-50有效誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤RB細(xì)胞凋亡,呈濃度和時間依賴性。
[Abstract]:Objective to study the inhibitory effect of ethyl acetate extract (EVn-50) on the growth and apoptosis of human retinoblastoma cells (RB cells) in vitro. To provide experimental and theoretical basis for the development and development of clinical drug candidates for the treatment of human retinoblastoma. Methods the effect of EVn-50 on the proliferation of RB cells was determined by MTT colorimetry in vitro, the survival rate of RB cells was measured by cell count method, and the growth curve was drawn. Inhibitory effect of EVn-50 on Anchorage Independent growth of RB cells in Vitro by soft Agar Colony Colony formation quantitative Analysis of apoptosis degree induced by EVn-50 by flow Cytometry (FCM) and fluorescence microscope of EVn-50 induced RB cells Morphological changes of apoptosis in RB cells induced by EVn-50 were confirmed by DNA agarose gel electrophoresis. Results the results of MTT colorimetric assay showed that WEVn-50 could inhibit the proliferation of RB cells in a concentration-dependent manner as an effective extract of Vitex chinensis L. against RB, and EVn-50 could inhibit the proliferation of RB cells in a dose-dependent manner. The IC50 of EVn-50 was 9.60 渭 g / ml, and the results of cell count showed that the EVn-50 of 30 渭 g/ml at 30 渭 g/ml could inhibit the growth of RB cells in a concentration-and time-dependent manner, and the results of soft Agar colony forming method showed that the growth of RB cells anchoring independent of EVn-50 was inhibited obviously by the method of soft Agar colony forming. The dose-effect analysis of flow cytometry in a concentration dependent manner with Pi staining showed that the apoptosis rates of RB cells treated with EVn-50 of 30.0 渭 g/ml at 30 渭 g/ml for 48 hours were (2.4 鹵0.1), (17.4 鹵0.6), (40.7 鹵0.7), respectively, while in the aging experiment, the effects of EVn-50 of 30.0 渭 g/ml on the fine cells of RB cells after 2448 hours were (2.4 鹵0.1), (17.4 鹵0.6), (40.7 鹵0.7), respectively. The apoptotic rate was (20.8 鹵0.4), (40.7 鹵0.7), (63.1 鹵0.8) and much higher than that in the control group (0.8 鹵0.3). The results showed that the apoptosis of RB cells was induced by w / EVn-50, and some RB cells showed red cytoplasm and nucleus after treated with EVn-50 in a concentration-and time-dependent manner. Morphological characteristics of typical apoptotic cells with nuclear pyknosis or fragmentation. EVn-50 0.3 渭 g 路ml ~ (-1) 路ml ~ (3) 渭 g / ml ~ (30) 渭 g/ml was used to treat RB cells for 48 hours, and EVn-50 ~ (30.0) 渭 g/ml was used to treat RB cells for 48 hours and 72 h after agarose gel electrophoresis, typical "trapezoid" DNA bands appeared. Conclusion 1. EVn-50 inhibits the growth of human retinoblastoma RB cells in a dose-and time-dependent manner. EVn-50 is an effective extract of Vitex chinensis against human retinoblastoma. 2. Human retinoblastoma RB cells were induced to apoptosis by EVn-50 in a concentration and time dependent manner.
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R739.7

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 梁慶樂;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的螺旋CT診斷[J];中外醫(yī)療;2011年24期

2 張德翻;鄭文龍;吳愛琴;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的CT與MRI診斷[J];醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志;2011年05期

3 劉燕;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤基因治療進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)理論與實踐;2011年14期

4 聶躍華;尹文君;賀秋冬;楊立;;欖香烯抑制視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤HXO-RB44細(xì)胞COX-2和VEGF的表達(dá)[J];中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志;2011年04期

5 崔泰震;張賀鳴;海廣范;牛秉軒;劉巨源;白素平;;藍(lán)萼香茶菜乙素對Rb細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響[J];眼科新進(jìn)展;2011年08期

6 王一卓;黃東生;史季桐;張偉令;趙軍陽;李松峰;葛心;張誼;朱霞;李萍;洪亮;周燕;梁昱;;CTV化療方案治療視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的不良反應(yīng)及其防治[J];臨床兒科雜志;2011年09期

7 任櫻;;不宜生育的遺傳病[J];農(nóng)家之友;2011年07期

8 汪靈燕;;兒童眼球摘除術(shù)的圍手術(shù)期護(hù)理[J];江蘇醫(yī)藥;2011年15期

9 徐錦堂;吳靜;;脈絡(luò)膜結(jié)核瘤的診斷與鑒別診斷[J];中國眼耳鼻喉科雜志;2011年02期

10 于文春;王曉蕾;;小兒眼科檢查前巧服水合氯醛的方法[J];局解手術(shù)學(xué)雜志;2011年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 于文春;王曉蕾;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤圍手術(shù)期的護(hù)理進(jìn)展[A];全國眼耳鼻喉科護(hù)理學(xué)術(shù)交流會議論文匯編[C];2011年

2 石思李;李勝;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的CT診斷分析[A];2010中華醫(yī)學(xué)會影像技術(shù)分會第十八次全國學(xué)術(shù)大會論文集[C];2010年

3 常青林;鮮軍舫;王振常;胡凌;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤眼球容積CT測量[A];中華醫(yī)學(xué)會第十八次全國放射學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

4 強軍;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的超聲圖像分析[A];中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第七屆全國眼科超聲診斷學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2009年

5 許建鋒;國媛媛;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的超聲診斷分析[A];中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第七屆全國眼科超聲診斷學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2009年

6 楊一濤;唐羅生;曾祥云;唐愛東;;褪黑素對視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤HXO—RB_(44)細(xì)胞周期異常及細(xì)胞凋亡的影響[A];江西省第九次中西醫(yī)結(jié)合眼科、中醫(yī)眼科學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2008年

7 張偉令;張誼;黃東生;王一卓;洪亮;朱霞;張品偉;李蘋;周燕;;血清NSE對兒童視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的臨床意義[A];第八屆全國兒童腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

8 趙軍陽;黃東生;史季桐;葛心;張偉令;王一卓;;眼科手術(shù)或聯(lián)合系統(tǒng)化療治療視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的短期觀察[A];第八屆全國兒童腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

9 趙軍陽;孫憲麗;黃東生;房留琴;陳俊;;微波局部治療視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的實驗研究[A];第八屆全國兒童腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

10 馬瑋哲;張心菊;關(guān)明;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤和葡萄膜黑色素瘤中DLC-1啟動子甲基化狀態(tài)的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第九次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 中國中醫(yī)科學(xué)院眼科醫(yī)院 張相祖;“貓眼”幼兒被摘除眼球[N];健康時報;2009年

2 本報記者 李穎;讓孩子長“貓眼”的腫瘤[N];科技日報;2009年

3 馮衛(wèi)東;過度生長細(xì)胞可產(chǎn)生癌癥干細(xì)胞[N];科技日報;2009年

4 劉軍;化療對哪些腫瘤有效[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2009年

5 容小翔;“貓眼”要早治[N];上海中醫(yī)藥報;2001年

6 本報記者 譚嘉;楊培增 此生“只追一只羊”[N];健康報;2009年

7 任曉君;化療對哪些腫瘤有效[N];保健時報;2004年

8 ;英國的“無癌嬰兒”試驗[N];大眾衛(wèi)生報;2000年

9 記者許菊芬;ＰＧＤ與試管嬰兒優(yōu)生[N];解放日報;2002年

10 海飛魚;探索肺癌突變基因[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 容維寧;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中Legumain的表達(dá)及其對臨床病理和預(yù)后的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

2 張麗娜;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤血管生成擬態(tài)的初步研究[D];青島大學(xué);2010年

3 江偉;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤家系的基因突變檢測和遺傳咨詢[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

4 吳荒;Survivin-siRNA抑制視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤生長的實驗研究[D];吉林大學(xué);2008年

5 王國軍;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中Survivin和c-Myc的表達(dá)及對凋亡的影響[D];華中科技大學(xué);2007年

6 馬波;人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤腫瘤干細(xì)胞的分離鑒定及相關(guān)表面標(biāo)志的初步研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

7 鄭嵩山;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤臨床分析及眼內(nèi)化療實驗研究[D];中山大學(xué);2006年

8 趙建軍;miRNA在脊髓發(fā)育及腫瘤分類中的作用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

9 魏為;欖香烯對視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤HXO-RB_（44）細(xì)胞Survivin、NF-κB基因表達(dá)和端粒酶活性的影響[D];中南大學(xué);2007年

10 劉霞;Eb病毒相關(guān)胃癌腫瘤相關(guān)基因表觀遺傳學(xué)調(diào)節(jié)機(jī)制的研究[D];青島大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李丹;EVn-50對人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞生長和凋亡作用的影響[D];南華大學(xué);2010年

2 李園;~（125）I放射性粒子近距離治療視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年

3 王樹綱;MMP-2及其抑制劑TIMP-1在人類視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)[D];中國醫(yī)科大學(xué);2003年

4 逯晶;E-鈣粘附蛋白在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的表達(dá)及意義[D];中南大學(xué);2011年

5 王麗萍;超聲微泡介導(dǎo)RB94基因轉(zhuǎn)染鼠視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

6 岳晗;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中HIF-1α的區(qū)域性表達(dá)及其與增殖、凋亡和新生血管生成的關(guān)系[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

7 趙岳峰;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤血管生成因素與預(yù)后指標(biāo)關(guān)系[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

8 韓宜男;新型化療藥物對視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的體外藥效實驗[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

9 張積;樹突狀細(xì)胞治療視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的實驗研究[D];蘇州大學(xué);2002年

10 沈英宇;STAT3蛋白及hTERT蛋白在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的臨床意義研究[D];延邊大學(xué);2011年

，

本文編號：2056460