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谷氨酸損傷體外培養(yǎng)大鼠螺旋神經(jīng)元中凋亡誘導(dǎo)因子的表達與分布

發(fā)布時間:2018-06-09 12:05

  本文選題:螺旋神經(jīng)元 + 谷氨酸; 參考:《聽力學(xué)及言語疾病雜志》2014年06期


【摘要】:目的觀察不同濃度谷氨酸(Glu)損傷螺旋神經(jīng)元中凋亡誘導(dǎo)因子(apoptosis inducing factor,AIF)的表達與分布變化,探討利用谷氨酸損傷體外培養(yǎng)螺旋神經(jīng)元是否與AIF凋亡途徑相關(guān)。方法取40只出生后0~3天SD仔鼠螺旋神經(jīng)元行體外培養(yǎng),所得培養(yǎng)細胞平均分為正常組和10mM、20mM、40mM Glu組,正常組僅給予正常SGNs培養(yǎng)液培養(yǎng),其余三組分別加入相應(yīng)濃度谷氨酸和SGNs培養(yǎng)液,培養(yǎng)48h后,應(yīng)用光學(xué)顯微鏡、免疫熒光染色及實時熒光定量PCR方法觀察四組中SGN細胞形態(tài)、SGN中AIF的分布及AIF、鈣蛋白酶(calpain)、半胱氨酸天冬氨酸3(caspase 3)的表達變化;用TUNEL法觀察細胞凋亡。結(jié)果 20mM和40mM Glu組SGNs細胞形態(tài)改變和細胞凋亡明顯,并伴有AIF核轉(zhuǎn)位;不同濃度Glu組AIF和calpain基因表達明顯高于正常組(P0.05),但caspase 3表達無明顯升高(P0.05)。結(jié)論谷氨酸損傷體外培養(yǎng)的螺旋神經(jīng)元過程中,AIF凋亡途徑參與了細胞凋亡,calpain的高表達也促進了興奮性神經(jīng)遞質(zhì)對SGNs的損傷,但caspase3途徑無明顯作用。
[Abstract]:Objective to investigate the expression and distribution of apoptosis inducing factor-AIF-induced apoptosis in spiral neurons injured by glutamate at different concentrations, and to explore whether it is related to the apoptosis pathway of spiral neurons cultured with glutamate injury in vitro. Methods the spiral neurons of 40 Sprague-Dawley rats were cultured in vitro. The cultured cells were divided into normal group (n = 10) and control group (n = 10). The normal group was treated with SGNs culture medium only. The other three groups were incubated with glutamic acid and SGNs respectively for 48 hours. Immunofluorescence staining and real-time fluorescence quantitative PCR were used to observe the distribution of AIF and the expression of AIF, calpainin and caspic acid 3(caspase 3 in SGN cells in four groups, and apoptosis was observed by Tunel method. Results the morphological changes and apoptosis of SGNs cells in 20mm and 40mm Glu groups were obvious, and the expression of AIF and calpain genes were significantly higher in 20 mm and 40 mm Glu groups than in the normal control group, but the expression of caspase 3 was not significantly increased. Conclusion the high expression of calpain and the injury of excitatory neurotransmitters to SGNs may be involved in the apoptosis of spiral neurons injured by glutamate in vitro, but the caspase3 pathway has no obvious effect.
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81120108008,30930098,81271069) 國家“973”項目課題(2011CB504505)聯(lián)合資助
【分類號】:R764

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號:1999666


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