本文選題：干眼 + 動物模型��； 參考：《眼科新進(jìn)展》2014年05期

【摘要】：目的通過皮下注射氫溴酸東莨菪堿建立大鼠干眼模型,并對其眼表病理及角膜神經(jīng)改變進(jìn)行觀察分析。方法 6周齡Wistar健康雌性大鼠32只,隨機(jī)分為高(H)、中(M)、低(L)劑量組和對照(C)組,每組各8只,H、M、L組皮下注射東莨菪堿,劑量分別為6 mg·mL-1、4 mg·mL-1、2 mg·mL-1,C組皮下注射生理鹽水。用藥后0 d、7 d、14 d、21 d、28 d對各組大鼠行淚液分泌試驗(Schirmer I test,SIt)、淚膜破裂時間(break-up time,BUT)、角膜上皮熒光素鈉染色及淚液蕨類試驗分析。用藥后28 d時,處死大鼠取整個眼球,石蠟切片后行HE及PAS染色;其余眼取角膜行Real-time PCR及神經(jīng)氯化金染色。結(jié)果 H組大鼠在用藥后7 d即出現(xiàn)BUT縮短為(6.800±1.033)s,與C組(9.111±1.269)s比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),H組較L組縮短(P0.05)。14 d時,H、M、L組的BUT分別為(5.200±0.632)s、(7.200±0.789)s和(9.000±0.816)s,短于C組(10.222±1.302)s,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05);H、L、M組兩兩比較,差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05)。隨著時間延長,H、M、L組的BUT進(jìn)一步縮短。用藥后21 d、28 d,除21 d時L組與C組、H組與M組差異無統(tǒng)計意義(均為P0.05)外,余組間差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.01)。用藥后7 d,H組、M組出現(xiàn)少量角膜上皮細(xì)點狀熒光素鈉著色,并隨實驗進(jìn)程角膜上皮染色分級逐漸加重。用藥后14 d,H組、M組的淚液分泌開始減少,分別為(5.200±0.978)mm、(6.350±1.528)mm,分別與C組(7.944±1.130)mm比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05);21 d,各組的淚液分泌量略有增加;用藥后28 d,H組、M組的淚液分泌量分別為(4.900±1.075)mm、(5.650±0.747)mm,較C組(7.600±1.600)mm顯著減少(均為P0.01)。而L組的淚液分泌量在各時點均較C組無明顯減少(均為P0.05)。淚液蕨類試驗顯示,H、M、L組淚液蕨類物結(jié)晶數(shù)量減少,分支減少,形態(tài)不完整,其中H組改變最明顯。HE染色顯示,H、M、L組角膜上皮增生,層數(shù)增加,角膜表面凹凸不平,基底細(xì)胞水腫、排列紊亂。其中,H組病變最明顯,且可見空泡樣變。用藥后28 d,結(jié)膜杯狀細(xì)胞除L組與C組差異無統(tǒng)計學(xué)意義外,余組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05)。角膜神經(jīng)氯化金染色及Real-time PCR結(jié)果顯示,各組的角膜神經(jīng)纖維密度和走形及神經(jīng)生長因子的表達(dá)水平均無顯著變化。結(jié)論皮下注射氫溴酸東莨菪堿可顯著抑制大鼠淚液分泌,降低淚膜穩(wěn)定性,引起眼表損傷,成功建立淚液缺乏為主的干眼模型,且干眼的進(jìn)展呈時間和劑量依賴性,為進(jìn)行干眼發(fā)病機(jī)制研究和干預(yù)治療探索提供依據(jù)。
[Abstract]:Objective to establish the dry eye model of rats by subcutaneous injection of scopolamine hydrobromide, and to observe and analyze the ocular surface pathology and corneal nerve changes. Methods Thirty-two 6-week-old Wistar healthy female rats were randomly divided into three groups: the control group (n = 8) and the control group (n = 8). Each group (n = 8) was subcutaneously injected with scopolamine at a dose of 6 mg / ml ~ (4) mg / ml ~ (-1) and 2 mg / ml 路L ~ (-1) C, respectively, and normal saline was injected subcutaneously into the control group (n = 8). The tear secretion test (Schirmer I test), lacrimal film rupture time (DST), corneal epithelium fluorescein sodium staining and tear ferns test were performed at 0 d, 7 d, 14 d, 21 d and 28 d after administration. On the 28th day after administration, the rats were sacrificed to take out the whole eyeball, paraffin sections were stained with HE and pas, and the corneas were taken for real-time PCR and nerve gold chloride staining. Results on the 7th day after treatment, but in group H was reduced to 6.800 鹵1.033 s, which was significantly lower than that in group C (9.111 鹵1.269), and the BUT of group H was 5.200 鹵0.632s (7.200 鹵0.789) and 9.000 鹵0.816 s, respectively, which was significantly shorter than that of group C (10.222 鹵1.302s). (all P 0.05) and the comparison between two groups (P 0.05, P ~ (0.05) and (P ~ (0.05) (P ~ (0.05). The difference was statistically significant (P 0.05). With the time prolonging, the but was further shortened. After 21 days, there was no statistical difference between group L and group C (P 0.05), but there was significant difference between group C and group C (P 0.01). At 7 days after treatment, a small amount of sodium fluorescein staining of corneal epithelium was observed in group M, and the staining grading of corneal epithelium increased gradually with the process of the experiment. On the 14th day after treatment, the tear secretion began to decrease in group M (5.200 鹵0.978mm), 6.350 鹵1.528mm, respectively, which was significantly higher than that in group C (7.944 鹵1.130)mm) (all P0.05 + 21 days), and the amount of tear secretion in each group was slightly increased. After 28 days of treatment, the tear secretion of group M was 4.900 鹵1.075mm, 5.650 鹵0.747mm, which was significantly lower than that of group C (7.600 鹵1.600)mm) (P 0.01). The tear secretion in group L was not significantly decreased compared with that in group C at all time points (P 0.05). The tear fern test showed that the number of crystals, branches and morphology of tear ferns were decreased, and the most obvious changes were observed in the H group. He staining showed that the corneal epithelium proliferated, the number of layers increased, the corneal surface was uneven, and the basal cells were edema. The arrangement is disordered. In group H, the lesions were the most obvious and vacuolar changes were observed. On the 28th day after treatment, the conjunctival goblet cells showed significant differences (all P 0.05) except that there was no significant difference between L group and C group. The results of gold chloride staining and Real-time PCR showed that there were no significant changes in the density of corneal nerve fibers, the morphology of corneal nerve fibers and the expression level of nerve growth factor (NGF) in all groups. Conclusion Intradermal injection of scopolamine hydrobromide can significantly inhibit lacrimal secretion, decrease the stability of lacrimal film, cause ocular surface damage, and successfully establish dry eye model with lacrimal deficiency, and the progress of dry eye is in a time-and dose-dependent manner. To provide the basis for the study of the pathogenesis of dry eye and the exploration of intervention therapy.
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)眼科醫(yī)院;
【基金】：天津醫(yī)科大學(xué)眼科醫(yī)院院內(nèi)基金(編號:20120404)~~
【分類號】：R777.34

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本文編號：1997208