視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中HIF-1α的區(qū)域性表達(dá)及其與增殖、凋亡和新生血管生成的關(guān)系
本文選題:視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤 + 免疫組織化學(xué) ; 參考:《復(fù)旦大學(xué)》2011年碩士論文
【摘要】:背景:視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma, Rb)是嬰幼兒中最常見(jiàn)的眼內(nèi)惡性腫瘤,雖然目前化學(xué)縮瘤輔助局部治療(經(jīng)瞳孔溫?zé)岑煼═TT、冷凍治療,結(jié)膜下注射卡鉑SCC,表層鞏膜敷貼放療等)的綜合治療方法不僅可以挽救患兒生命,甚至能保留一部分有用視力。但是,仍然存在部分患者接受治療后出現(xiàn)復(fù)發(fā),甚至轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象。一方面,化療耐藥現(xiàn)象仍是困擾眼科醫(yī)生的棘手課題:研究提示Rb內(nèi)部的缺氧現(xiàn)象可能是Rb化療耐藥的原因之一,這些缺氧區(qū)中的腫瘤細(xì)胞由于主要通過(guò)糖酵解途徑獲取能量,使它們對(duì)普通的化療藥物不敏感,成為化療耐藥和復(fù)發(fā)的潛在原因。另一方面,由于Rb各種治療方法均具有自身的特性,使瘤體不同部位在接受治療的方式和程度上有所不同,故可能出現(xiàn)容易被忽略的治療盲點(diǎn),最終導(dǎo)致復(fù)發(fā)和耐藥現(xiàn)象。因此,通過(guò)對(duì)腫瘤內(nèi)不同區(qū)域缺氧現(xiàn)象研究,不僅有利于研究Rb耐藥的可能機(jī)制,也有助于揭示綜合治療后局部復(fù)發(fā)的原因,進(jìn)而探索一種綜合治療的最佳模式,達(dá)到優(yōu)化互補(bǔ)、取長(zhǎng)補(bǔ)短的目的,并最終提高療效,改善患兒預(yù)后。 第一部分HIF-1α在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的區(qū)域性表達(dá)及其與VEGF、Bax、Ki-67的關(guān)系 目的通過(guò)研究缺氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)在Rb的表達(dá)及分布,以及其與VEGF、Ki-67、Bax的關(guān)系,從而探討Rb中的缺氧現(xiàn)象及特點(diǎn),并嘗試尋找局部治療后仍導(dǎo)致復(fù)發(fā)的潛在原因,為最終指導(dǎo)臨床治療提供理論依據(jù)。 方法采用免疫組織化學(xué)EnVision法檢測(cè)HIF-1α、VEGF、Bax、Ki-67在39例(39只眼)Rb石蠟標(biāo)本中的表達(dá)。按照腫瘤區(qū)域分為表面區(qū)、中央?yún)^(qū)、基地部、脈絡(luò)膜區(qū)及子瘤五個(gè)區(qū)域,分析以上指標(biāo)的表達(dá)及分布差異。 結(jié)果39例Rb標(biāo)本中,HIF-1α陽(yáng)性者29例,占74.4%,其中,按整體表達(dá)強(qiáng)度計(jì)算,表達(dá)(-)有10例(25.6%),(+)有17例(43.6%),(++)有12例(30.8%);按區(qū)域計(jì)算,表面區(qū)、中央?yún)^(qū)、基地部、脈絡(luò)膜區(qū)及子瘤區(qū)染色陽(yáng)性者分別占71.0%,36.8%,84.2%,45.4%,82.1%,其分布具有明顯差異(P0.001),在表面區(qū)、基底部及子瘤區(qū)HIF-1α表達(dá)陽(yáng)性率較高。VEGF、Bax和Ki-67表達(dá)陽(yáng)性者分別占53.8%,66.7%,59.0%,其中,VEGF和Bax在不同區(qū)域內(nèi)表達(dá)有差異(均為P0.001),Ki-67的陽(yáng)性率無(wú)明顯分布差異(P=0.976)。 整體上,HTF-1α的表達(dá)與VEGF和Bax的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.51,P=0.001和rs=0.32,P=0.046),而與Ki-67的表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)(P=0.441)。在不同區(qū)域,VEGF和Bax的表達(dá)均與HIF-1α有較好的一致性,而Ki-67與HIF-1α的表達(dá)在不同區(qū)域分布無(wú)明顯一致性。 結(jié)論缺氧現(xiàn)象多分布在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤瘤體的邊緣地帶,這可能與腫瘤形成過(guò)程中邊緣相對(duì)缺乏血管分布有關(guān),這提示化療藥物應(yīng)當(dāng)有足夠的穿透力或者更具靶向性才能徹底殺滅這些細(xì)胞:另一方面,缺氧可能通過(guò)誘導(dǎo)凋亡增加,新生血管生成增加,進(jìn)一步耐受缺氧環(huán)境,達(dá)到逃脫化療藥物殺傷的目的,這將對(duì)理解并解決視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的耐藥現(xiàn)象有重要的指導(dǎo)意義。 第二部分刀切實(shí)驗(yàn)排除邊緣效應(yīng) 目的通過(guò)刀切實(shí)驗(yàn),排除邊緣效應(yīng)及其他人為因素造成的結(jié)果偏差。 方法根據(jù)第一部分結(jié)果,選取HIF-1α染色陽(yáng)性的標(biāo)本5例(表面區(qū)染色較中央?yún)^(qū)染色深)各三張,其中一張用尖手術(shù)刀片刮除腫瘤游離緣約0.5mm區(qū)域,稱作刀切組;一張不做刀切處理,稱未刀切實(shí)驗(yàn)組;余下一張作空白對(duì)照。在相同條件下重復(fù)HIF-1α染色,觀察結(jié)果 結(jié)果通過(guò)刀切實(shí)驗(yàn),刀切組新的表面區(qū)與未處理組的腫瘤表面區(qū)相比,HIF-1α的染色在后者明顯比前者更深,且刀切組新的表面區(qū)與二者腫瘤中央?yún)^(qū)的HIF-1α染色結(jié)果基本一致。 結(jié)論通過(guò)刀切實(shí)驗(yàn)、操作中鋪平抗體液、防止干片、隨機(jī)閱片等操作,避免了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中邊緣效應(yīng)及其他人為因素造成的結(jié)果偏差,因此該課題結(jié)果的可靠性得到驗(yàn)證:即在Rb中缺氧現(xiàn)象的分布特征不是實(shí)驗(yàn)和人為因素造成的,而是由瘤體自身特點(diǎn)決定的。
[Abstract]:Background: retinoblastoma (Rb) is the most common intraocular malignant tumor in infants and children. Although the combined therapy of chemical contraction assisted local treatment (TTT, cryotherapy, subconjunctival injection of carboplatin SCC, surface scleral compress and radiotherapy) can not only save the life of the children, but can even preserve it. There are some useful eyesight. However, there is still a recurrence and even metastasis of some patients after treatment. On the one hand, the phenomenon of chemotherapeutic resistance is still a difficult problem for ophthalmologists: the study suggests that the hypoxia in Rb may be one of the reasons for the resistance of Rb to chemotherapy, and the tumor cells in these anoxic areas are mainly passed through Glycolysis, which makes them insensitive to common chemotherapeutic drugs, is a potential cause of chemotherapeutic resistance and relapse. On the other hand, because Rb has its own characteristics, different parts of the tumor are different in the manner and degree of treatment, so it may be easily ignored in the treatment of blind spots. Therefore, the study of hypoxia in different regions of the tumor is not only conducive to the study of the possible mechanism of Rb resistance, but also helps to reveal the causes of local recurrence after comprehensive treatment, and then explore the best mode of comprehensive treatment to optimize the complementarity, make up for short, and ultimately improve the curative effect. The prognosis of good children.
The first part is the regional expression of HIF-1 alpha in retinoblastoma and its relationship with VEGF, Bax and Ki-67.
Objective to study the expression and distribution of hypoxia inducible factor -1 alpha (hypoxia inducible factor-1 a (HIF-1 a), HIF-1 alpha) in Rb, as well as its relationship with VEGF, Ki-67, Bax, and to explore the phenomenon and characteristics of hypoxia in Rb, and try to find the potential cause of recurrence after local treatment, and provide a theoretical basis for guiding clinical treatment.
Methods immunohistochemical EnVision method was used to detect the expression of HIF-1 alpha, VEGF, Bax, Ki-67 in 39 cases (39 eyes) of Rb paraffin specimens. According to the tumor area, the expression and distribution of the above indexes were analyzed in five regions, central region, base, choroidal area and subtumor.
Results of the 39 Rb specimens, 29 cases were positive for HIF-1 alpha, accounting for 74.4%. Among them, 10 cases (25.6%) were expressed (25.6%), 17 (43.6%) and 12 (30.8%) were expressed (+) in the total expression intensity (+ +). According to the region, the positive staining in the surface area, central area, base, choroidal area and subtumor area accounted for 71%, 36.8%, 84.2%, 45.4%, 82.1%, respectively. The positive rate of HIF-1 alpha expression in the surface area, the basal part and the subtumor region was higher than that of.VEGF, and the positive rates of Bax and Ki-67 were 53.8%, 66.7%, 59% respectively in the surface area, and the positive rates of VEGF and Bax were different in different regions (P0.001), and the positive rate of Ki-67 was not significantly different (P=0.976).
On the whole, the expression of HTF-1 alpha was positively correlated with the expression of VEGF and Bax (rs=0.51, P=0.001 and rs=0.32, P=0.046), but there was no significant correlation with Ki-67 expression (P=0.441). In different regions, the expression of VEGF and Bax was in good agreement with HIF-1 alpha, but there was no obvious consistency in the distribution of the tables in different regions.
Conclusions hypoxia is mostly distributed in the marginal zone of the retinoblastoma, which may be related to the relative lack of blood vessel distribution during the formation of the tumor. This suggests that the chemotherapeutic drugs should have sufficient penetration or more targeted to kill these cells. On the other hand, hypoxia may increase apoptosis by inducing apoptosis. It is important to understand and solve the drug resistance of retinoblastoma by increasing the angiogenesis and further tolerance to the anoxic environment.
The second part cutting experiment excludes the edge effect
Objective to eliminate the margin of effect and other factors caused by other factors through knife cut experiments.
Methods according to the results of the first part, 5 specimens of positive HIF-1 alpha staining were selected (the surface area staining was compared with the deep staining of the central region) in three pieces, one of which was used to scrape the tumor free margin about 0.5mm area, called the knife cutting group, and the other was called the non knife test group, and the remaining one was a blank control. Under the same condition, the rest was weighed under the same condition. Complex HIF-1 alpha staining, observation results
Results compared with the tumor surface area in the untreated group, the new surface area of the knife cut group was much deeper than the former in the tumor surface area of the untreated group. The new surface area of the knife cut group was basically the same as the results of the HIF-1 alpha staining in the two central region of the tumor.
Conclusion through the knife cutting experiment, the antibody liquid was paved in the operation to prevent the dry slice and the random reading of the film. The results were proved to be reliable, that is, the distribution characteristics of the anoxia phenomenon in Rb were not caused by the experiment and human factors, but by the tumor. The character of the body is determined by its own characteristics.
【學(xué)位授予單位】:復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號(hào)】:R739.7
【相似文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 趙中珩,管立學(xué),唐煥暖,趙建強(qiáng),唐寶懿,趙素貞,于秀英,施鐵夫;房水和血清乳酸脫氫酶及其同工酶測(cè)定的臨床應(yīng)用價(jià)值[J];臨床檢驗(yàn)雜志;1989年02期
2 梁勇;梁興武;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的假性前房積膿13例[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1992年04期
3 楊敬林,汪湘琳,陶永賢;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤術(shù)后存活20年以上的隨訪觀察[J];中國(guó)實(shí)用眼科雜志;1997年05期
4 田喜林;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤誤診1例[J];中國(guó)醫(yī)師雜志;1998年10期
5 莊承海;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤:235例分析[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).臨床放射學(xué)分冊(cè);1979年02期
6 趙志凜;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤80例分析[J];山東醫(yī)藥;1980年11期
7 Matsunaga E ,戴德林 ,吳書(shū)楷;Wilms腫瘤的遺傳[J];國(guó)際遺傳學(xué)雜志;1982年02期
8 張幗蓉;;一例自行消退的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤[J];國(guó)際眼科縱覽;1982年01期
9 粟國(guó)范;趙平遠(yuǎn);;22例真假視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤診斷的經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)[J];現(xiàn)代醫(yī)學(xué);1983年02期
10 王延華;許瀛海;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤誤診問(wèn)題[J];天津醫(yī)藥;1983年11期
相關(guān)會(huì)議論文 前10條
1 于文春;王曉蕾;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤圍手術(shù)期的護(hù)理進(jìn)展[A];全國(guó)眼耳鼻喉科護(hù)理學(xué)術(shù)交流會(huì)議論文匯編[C];2011年
2 石思李;李勝;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的CT診斷分析[A];2010中華醫(yī)學(xué)會(huì)影像技術(shù)分會(huì)第十八次全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2010年
3 常青林;鮮軍舫;王振常;胡凌;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤眼球容積CT測(cè)量[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國(guó)放射學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年
4 強(qiáng)軍;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的超聲圖像分析[A];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第七屆全國(guó)眼科超聲診斷學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年
5 許建鋒;國(guó)媛媛;;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的超聲診斷分析[A];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第七屆全國(guó)眼科超聲診斷學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年
6 楊一濤;唐羅生;曾祥云;唐愛(ài)東;;褪黑素對(duì)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤HXO—RB_(44)細(xì)胞周期異常及細(xì)胞凋亡的影響[A];江西省第九次中西醫(yī)結(jié)合眼科、中醫(yī)眼科學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2008年
7 王圣巍;;胃癌組織HIF-1α表達(dá)及其臨床意義[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)代表大會(huì)及學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2010年
8 陳頻;;復(fù)方丹參滴丸對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟組織HIF-1α及VEGF表達(dá)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年
9 賴志文;石良艷;田勇;楊書(shū)紅;丁婷;沈薇;盧運(yùn)萍;王世宣;;小鼠不同周齡階段中各級(jí)卵泡HIF-1α蛋白的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第三次全國(guó)絕經(jīng)學(xué)術(shù)會(huì)議暨絕經(jīng)相關(guān)問(wèn)題學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2011年
10 李賀;崔蘇萍;鄧君;;腎缺血再灌注損傷后缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)的動(dòng)態(tài)表達(dá)[A];華東六省一市泌尿外科學(xué)術(shù)年會(huì)暨2011年浙江省泌尿外科、男科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年
相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條
1 本報(bào)記者 李穎;讓孩子長(zhǎng)“貓眼”的腫瘤[N];科技日?qǐng)?bào);2009年
2 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院眼科醫(yī)院 張相祖;“貓眼”幼兒被摘除眼球[N];健康時(shí)報(bào);2009年
3 馮衛(wèi)東;過(guò)度生長(zhǎng)細(xì)胞可產(chǎn)生癌癥干細(xì)胞[N];科技日?qǐng)?bào);2009年
4 劉軍;化療對(duì)哪些腫瘤有效[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2009年
5 容小翔;“貓眼”要早治[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2001年
6 本報(bào)記者 譚嘉;楊培增 此生“只追一只羊”[N];健康報(bào);2009年
7 任曉君;化療對(duì)哪些腫瘤有效[N];保健時(shí)報(bào);2004年
8 記者許菊芬;PGD與試管嬰兒優(yōu)生[N];解放日?qǐng)?bào);2002年
9 海飛魚(yú);探索肺癌突變基因[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年
10 健康時(shí)報(bào)特約記者 李運(yùn)紅 胡顏;兒童腫瘤好發(fā)3歲前[N];健康時(shí)報(bào);2009年
相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條
1 容維寧;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中Legumain的表達(dá)及其對(duì)臨床病理和預(yù)后的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年
2 張麗娜;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤血管生成擬態(tài)的初步研究[D];青島大學(xué);2010年
3 韓雪梅;大鼠局灶性腦缺血HIF-1與相關(guān)靶基因表達(dá)及缺氧預(yù)處理保護(hù)作用研究[D];吉林大學(xué);2004年
4 毛杉杉;低氧、訓(xùn)練對(duì)大鼠骨骼肌毛細(xì)血管新生的影響及HIF-1和VEGF在其中的作用機(jī)制研究[D];北京體育大學(xué);2004年
5 周青;高糖低氧條件對(duì)HIF-1α轉(zhuǎn)錄活性影響的機(jī)制及藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年
6 黃黎黎;雷公藤紅素通過(guò)HIF-1α-Sema4D信號(hào)通路對(duì)乏氧誘導(dǎo)血管新生的抑制作用的研究[D];華中科技大學(xué);2011年
7 黃黎黎;雷公藤紅素通過(guò)HIF-1α-Sema4D信號(hào)通路對(duì)乏氧誘導(dǎo)血管新生的抑制作用的研究[D];華中科技大學(xué);2011年
8 徐世偉;HIF-1與線粒體呼吸鏈的關(guān)系及對(duì)細(xì)胞糖代謝的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年
9 魏愛(ài)宣;慢性腦缺血致認(rèn)知功能障礙大鼠HIF-1α及其靶基因表達(dá)與西洛他唑保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2010年
10 朱世凱;缺氧微環(huán)境中HIF-1α誘導(dǎo)MT2-MMP表達(dá)及對(duì)胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移作用的機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2010年
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條
1 岳晗;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中HIF-1α的區(qū)域性表達(dá)及其與增殖、凋亡和新生血管生成的關(guān)系[D];復(fù)旦大學(xué);2011年
2 夏添;HIF-1α在缺血性腦卒中腦組織中表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年
3 薛興;戊乙奎醚對(duì)肢體缺血再灌注后腎臟HIF-1α的影響[D];蘭州大學(xué);2011年
4 陳億;~(125)I粒子對(duì)低分化大腸腺癌HIF-1α的表達(dá)影響及細(xì)胞增殖和凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年
5 韓靜;活血化瘀方劑對(duì)急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α表達(dá)的影響[D];青島大學(xué);2010年
6 鄭旭東;缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)在病理性瘢痕形成中的作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年
7 張超;腦缺血再灌注損傷后HIF-1α對(duì)脈絡(luò)叢細(xì)胞的修復(fù)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年
8 劉希;柴樸湯對(duì)哮喘大鼠HIF-1α和TGF-β1的動(dòng)態(tài)表達(dá)影響[D];南華大學(xué);2011年
9 潘雪;HIF-1α與MMP-2在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及意義[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年
10 申鈞;HIF-1α和p53在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的相關(guān)性研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2010年
,本文編號(hào):1949857
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/yank/1949857.html