發(fā)布時(shí)間：2018-05-25 10:32

  本文選題：探針制備 + 原位雜交　； 參考：《中華耳科學(xué)雜志》2014年03期

【摘要】：目的介紹一種雞胚原位雜交探針制備方法。方法攜帶Bmp4和Cath1基因特異片段的質(zhì)粒載體,通過質(zhì)粒小提試劑盒擴(kuò)增,限制性內(nèi)切酶線性化,酚氯仿抽提純化,T3 RNA聚合酶體外轉(zhuǎn)錄,合成地高辛標(biāo)記的反義探針,通過電泳及雞胚原位雜交檢測探針的質(zhì)量.結(jié)果獲得了效果良好的Bmp4和Cath1的RNA探針.結(jié)論用質(zhì)粒小提試劑盒對質(zhì)粒載體擴(kuò)增,進(jìn)而通過線性化、純化、轉(zhuǎn)錄等步驟來制備原位雜交探針的方法,具有時(shí)間短、費(fèi)用低、質(zhì)量高、雜交效果好等優(yōu)點(diǎn)。
[Abstract]:Objective to introduce a method for preparation of chicken embryo in situ hybridization probe. Methods the plasmid vector carrying the specific fragments of Bmp4 and Cath1 gene was amplified by plasmid small extraction kit. The restriction endonuclease was linearized, the phenol chloroform was extracted and purified to transcribe the T 3 RNA polymerase in vitro, and the antisense probe labeled with digoxin was synthesized. The quality of the probe was detected by electrophoresis and in situ hybridization of chicken embryo. Results the RNA probes of Bmp4 and Cath1 were obtained. Conclusion the method of amplification of plasmid vector by plasmid small extraction kit and then preparation of in situ hybridization probe by linearization, purification and transcription has the advantages of short time, low cost, high quality, good hybridization effect and so on.
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科解放軍耳鼻咽喉研究所;
【基金】：國家自然基金專項(xiàng)基金項(xiàng)目(31140047)(31340055) 解放軍總醫(yī)院專利轉(zhuǎn)化基金項(xiàng)目(42411D19) 解放軍總醫(yī)院苗圃基金項(xiàng)目(07MP24)聯(lián)合資助
【分類號(hào)】：R764

【共引文獻(xiàn)】

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7 劉勇;楊海玉;;原位雜交的技術(shù)關(guān)鍵及其應(yīng)用[J];江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn);2006年06期

8 馬云;張連國;張輝;周翠玲;劉穎;;固定時(shí)間對原位雜交的影響[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年05期

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10 向傳喜，夏學(xué)鋒，許念桂，彭隆祥，，施啟邁;散發(fā)性病毒性腦炎免疫組化和原位雜交研究[J];湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1995年06期

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本文編號(hào)：1933111