本文選題：喉腫瘤 + SOX　； 參考：《臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志》2014年16期

【摘要】：目的:研究SOX2表達(dá)對人喉癌上皮細(xì)胞Hep-2化療敏感性的影響。方法:設(shè)計(jì)合成RNAi-SOX2序列,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染Hep-2細(xì)胞,Western blot法篩選沉默效率最好的RNAi-SOX2構(gòu)建pGCsi-H1-SOX2質(zhì)粒,并構(gòu)建其對照質(zhì)粒pGCsi-H1-NC,分別轉(zhuǎn)染Hep-2細(xì)胞建立穩(wěn)定沉默SOX2表達(dá)細(xì)胞株psiSOX2-Hep-2及其對照細(xì)胞株psiNC-Hep-2。CCK-8法檢測SOX2表達(dá)沉默對Hep-2細(xì)胞對化療藥物敏感性的影響;Hoechst染色法檢測SOX2表達(dá)沉默對化療藥物誘導(dǎo)Hep-2細(xì)胞凋亡的影響;Western blot法檢測SOX2表達(dá)沉默對凋亡相關(guān)基因Survivin、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3表達(dá)的影響。結(jié)果:成功獲取SOX2表達(dá)沉默細(xì)胞株psiSOX2-Hep-2及其對照psiNC-Hep-2細(xì)胞株,與psiNC-Hep-2細(xì)胞相比,psiSOX2-Hep-2中SOX2表達(dá)下降78%。SOX2表達(dá)沉默后,psiSOX2-Hep-2細(xì)胞對5-FU和紫杉醇的敏感性均增強(qiáng),psiSOX2-Hep-2細(xì)胞48h的IC50值分別下降到8.12μg/ml和5.16μg/ml;同時(shí),psiSOX2-Hep-2細(xì)胞凋亡數(shù)增多;抗凋亡基因Survivin、Bcl-2表達(dá)下降明顯,凋亡基因Bax、cleaved caspase-3表達(dá)顯著上升。結(jié)論:RNAi沉默SOX2表達(dá)將顯著增強(qiáng)人喉癌上皮細(xì)胞Hep-2對5-FU和紫杉醇的敏感性。
[Abstract]:Objective: to study the effect of SOX2 expression on the chemosensitivity of human laryngeal carcinoma epithelial cells to Hep-2. Methods: the RNAi-SOX2 sequence was designed and synthesized, and the pGCsi-H1-SOX2 plasmid was constructed by transient transfection of Hep-2 cells by Western blot method, which had the best silencing efficiency. The control plasmid pGCsi-H1-NCwas constructed and transfected into Hep-2 cells to establish a stable and silenced SOX2 expression cell line psiSOX2-Hep-2 and a control cell line psiNC-Hep-2.CCK-8 to detect the effect of SOX2 expression silencing on the sensitivity of Hep-2 cells to chemotherapeutic drugs. Hoechst staining method was used to detect the expression of SOX2 in Hep-2 cells. The effect of SOX2 silencing on apoptosis of Hep-2 cells induced by chemotherapeutic drugs. The effect of SOX2 silencing on the expression of survivin Bcl-2Baxax-cleaved caspase-3 was detected by Western blot. Results: SOX2 expressing silencing cell line psiSOX2-Hep-2 and its control psiNC-Hep-2 cell line were successfully obtained. The decrease of SOX2 expression in psiSOX2-Hep-2 cells compared with that in psiNC-Hep-2 cells. The sensitivity of psiSOX2-Hep-2 cells to 5-FU and paclitaxel increased to 8.12 渭 g/ml and 5.16 渭 g / ml, respectively, and the number of apoptosis of psiSOX2-Hep-2 cells increased, and the expression of anti-apoptotic gene survivin decreased significantly. The expression of apoptotic gene Baxia cleaved caspase-3 increased significantly. Conclusion silencing the expression of SOX2 in human laryngeal carcinoma cells by SOX2 silencing can significantly enhance the sensitivity of Hep-2 to 5-FU and paclitaxel.
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科;
【基金】：遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No:201202287)
【分類號】：R739.65

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本文編號：1913693