本文選題：氧誘導缺血性視網(wǎng)膜病變 + 色素上皮衍生因子��； 參考：《眼科新進展》2014年06期

【摘要】：目的探討色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)對氧誘導缺血性視網(wǎng)膜病變(oxygen-induced ischemic retinopathy,OIR)小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(retinal ganglion cell,RGC)凋亡的抑制作用及其可能的機制。方法選擇7 d齡C57BL/6J小鼠140只,隨機分為正常對照組、OIR模型組、PBS治療對照組和PEDF藥物治療組。選擇右眼為實驗眼,將除正常對照組外的所有小鼠建立OIR模型。PEDF藥物治療組分別于小鼠12 d齡和14 d齡給予兩次玻璃體內(nèi)注射PEDF(2μg·μL-1)各1μL,PBS治療對照組玻璃體內(nèi)注射等量的PBS(10 mmol·L-1,pH 7.4)。于17 d齡處死小鼠,各組隨機抽取5只,摘除右眼球,采用TUNEL法檢測視網(wǎng)膜細胞凋亡情況以及免疫熒光染色法檢測Bcl-2蛋白在小鼠視網(wǎng)膜中的表達情況;其余小鼠過量麻醉處死后取出視網(wǎng)膜,采用Western blot檢測Bcl-2蛋白以及Real-time RT-PCR檢測bcl-2 mRNA的表達。結(jié)果視網(wǎng)膜細胞的凋亡主要在RGC層,OIR模型組小鼠RGC層細胞凋亡率為(55.044±14.538)%,明顯高于正常對照組的(3.317±1.657)%,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);PBS治療對照組細胞凋亡率為(55.852±4.490)%,明顯高于PEDF藥物治療組的(5.897±2.079)%,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);正常對照組與PEDF藥物治療組細胞凋亡率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。免疫熒光顯示,OIR模型組與PBS治療對照組Bcl-2蛋白陽性染色較正常對照組明顯減少,PEDF藥物治療組陽性染色較PBS治療對照組增多。Western blot以及RT-PCR結(jié)果顯示,OIR模型組Bcl-2蛋白和mRNA的表達量顯著下降,分別為0.386 9±0.071 3和0.694 2±0.235 2,與正常對照組的0.778 7±0.097 4和1.000 0比較,差異均有統(tǒng)計學意義(均為P0.05);PEDF藥物治療組Bcl-2蛋白和mRNA的表達量分別為0.610 1±0.109 5和0.818 3±0.308 0,與PBS治療對照組的0.284 8±0.153 6和0.481 0±0.100 8比較,差異均有統(tǒng)計學意義(均為P0.05);PEDF藥物治療組Bcl-2蛋白和mRNA的表達量較正常對照組低,但差異均無統(tǒng)計學意義(均為P0.05)。結(jié)論 OIR可引起視網(wǎng)膜細胞凋亡,尤其RGC的凋亡;PEDF可抑制凋亡并誘導視網(wǎng)膜Bcl-2表達上調(diào),提示Bcl-2表達水平上調(diào)可能是PEDF發(fā)揮神經(jīng)保護作用的機制之一。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect of pigment epithelium-derived factor (PEDF) on oxygen-induced ischemic retinopathy (OIR) apoptosis in retinal ganglion cells (RGCs) of oxygen-induced ischemic retinopathy (OIR) mice and its possible mechanism. Methods one hundred and forty 7 day old C57BL/6J mice were randomly divided into two groups: the normal control group and the PEDF drug treatment group. All the mice except normal control group were treated with intravitreous injection of PEDF(2 渭 g 渭 L -1 at 12 d and 14 d, respectively. The control group was treated with intravitreous injection of PBS(10 mmol L 1 and pH 7.4. The mice were killed at the age of 17 days. Five mice were randomly selected from each group and the right eye ball was removed. The apoptosis of retinal cells was detected by TUNEL and the expression of Bcl-2 protein in the retina of mice was detected by immunofluorescence staining. The other mice were killed under excessive anesthesia. The Bcl-2 protein was detected by Western blot and the expression of bcl-2 mRNA was detected by Real-time RT-PCR. Results the apoptosis rate of retinal cells in the RGC layer OIR group was 55.044 鹵14.538, which was significantly higher than that in the normal control group (3.317 鹵1.657), and the difference was statistically significant (55.852 鹵4.490,55.852 鹵4.490,55.852 鹵4.490,55.852 鹵4.490,55.852 鹵4.490,55.852 鹵4.490,55.852 鹵4.490) respectively. The difference was statistically significant in the treatment group (5.897 鹵2.079g), and the apoptotic rate in the normal control group and the PEDF drug treatment group was higher than that in the control group. The difference was not statistically significant (P 0.05). The positive staining of Bcl-2 protein in the OIR model group and the PBS treatment control group was significantly lower than that in the normal control group. Western blot and RT-PCR showed that the Bcl-2 protein and protein in the PBS model group were significantly lower than those in the PBS control group. The expression of mRNA decreased significantly. They were 0.386 9 鹵0.071 3 and 0.694 2 鹵0.235 2, respectively, compared with 0.778 7 鹵0.097 4 and 1.000 0 in normal control group. The expression of Bcl-2 protein and mRNA were 0.610 1 鹵0.109 5 and 0.818 3 鹵0.308 0 in the drug treatment group, respectively, compared with 0.284 8 鹵0.153 6 and 0.481 0 鹵0.100 8 in the PBS control group. The expression of Bcl-2 protein and mRNA in P0.05PEDF treatment group was lower than that in normal control group, but there was no significant difference (P0.05P 0.05). Conclusion OIR can induce retinal cell apoptosis, especially the apoptosis of RGC can inhibit apoptosis and induce the up-regulation of Bcl-2 expression in retina, suggesting that the up-regulation of Bcl-2 expression may be one of the neuroprotective mechanisms of PEDF.
【作者單位】： 上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院眼科;
【基金】：國家自然科學基金資助(編號:81170860) 上海市科委自然基金(編號:112R1422000)~~
【分類號】：R774.1

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 司俊康;郭俊國;王興榮;;氧化應激誘導視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡的研究進展[J];國際眼科雜志;2013年12期

2 姚慧萍;丁慰祖;;細胞因子對視網(wǎng)膜變性疾病防治作用的研究進展[J];臨床眼科雜志;2013年04期

3 劉恬;項道滿;江福能;;PEDF對人晶狀體上皮細胞生長調(diào)控的體內(nèi)外研究[J];南京醫(yī)科大學學報(自然科學版);2013年10期

4 劉程程;葉紅;;色素上皮衍生因子與宮頸癌的研究進展[J];海南醫(yī)學;2014年01期

5 樊秋菊;楊春華;哈若水;高永斌;吳金花;;DTI技術(shù)多參數(shù)值對原發(fā)性開角型青光眼視路損傷程度的診斷價值[J];寧夏醫(yī)學雜志;2014年03期

6 安鑫;王艷玲;;眼缺血綜合征治療進展[J];臨床和實驗醫(yī)學雜志;2014年01期

7 楊巍;李長福;陳永勝;左永超;;三氧化二砷聯(lián)合抗壞血酸抑制人腎癌786-0細胞增殖及相關(guān)蛋白表達的研究[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學;2014年03期

8 熊淑毓;馬明明;顧青;許迅;;堿性成纖維細胞生長因子對N-甲基-D-天冬氨酸誘導大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層損傷的保護作用[J];上海醫(yī)學;2014年03期

9 劉曉坤;張曉宇;王峗;趙平;;米諾環(huán)素對大鼠視神經(jīng)挫傷后視網(wǎng)膜Caspase-3表達的影響[J];眼科新進展;2013年12期

10 鄒紅;黎蕾;繆晚虹;;光動力療法建立大鼠視網(wǎng)膜靜脈阻塞模型[J];中國激光醫(yī)學雜志;2013年06期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 李旭;ROS依賴的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激—自噬反應在醉茄素A誘導人胰腺癌細胞凋亡中的作用研究[D];華中科技大學;2013年

2 劉培輝;視網(wǎng)膜新生血管化相關(guān)因子基因多態(tài)性與ROP的關(guān)聯(lián)研究[D];南方醫(yī)科大學;2013年

3 梁娜;IUD出血副反應臨床中醫(yī)證候調(diào)查及宮寧顆粒調(diào)控模型大鼠子宮VSMC凋亡相關(guān)機制的研究[D];山東中醫(yī)藥大學;2013年

4 郭紅宇;女性陰道炎患者陰道內(nèi)環(huán)境中氧化應激狀況及其致細胞凋亡的機制研究[D];蘭州大學;2012年

5 王紅陽;間歇低氧對大鼠認知功能和p38MAPK/神經(jīng)細胞凋亡通路影響[D];天津醫(yī)科大學;2011年

6 馮雪丹;自噬在實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）小鼠神經(jīng)元退行性變中的作用及機制探討[D];河北醫(yī)科大學;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 程沛林;OCT聯(lián)合DTI在青光眼早期診斷中應用的研究[D];河北醫(yī)科大學;2013年

2 曾曉波;糖尿病視網(wǎng)膜病變血清和玻璃體液VEGF及PEDF的定量分析[D];大連醫(yī)科大學;2012年

3 趙穎;缺血導致大鼠視網(wǎng)膜形態(tài)、電生理及視覺行為變化的研究[D];暨南大學;2013年

4 白倩;醛糖還原酶在視神經(jīng)損傷后的表達和作用[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

5 金麗珠;不同鉬水平對山羊瘤胃內(nèi)環(huán)境及組織凋亡相關(guān)基因mRNA表達的影響[D];江西農(nóng)業(yè)大學;2013年

6 杜安杰;氨基胍對ROP視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞凋亡及iNOS表達的影響[D];石河子大學;2013年

7 樊秋菊;3.0T MRI-DTI技術(shù)多參數(shù)值評價原性開角型青光眼視路損害的研究[D];寧夏醫(yī)科大學;2013年

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9 張子燕;糖尿病腎病與糖尿病視網(wǎng)膜病變的相關(guān)性及危險因素分析[D];大連醫(yī)科大學;2013年

10 黃興華;Nogo基因及其信號通路蛋白在小鼠耳蝸表達的初步研究[D];中南大學;2013年

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1 季迅達;色素上皮源性因子在眼部的作用研究[J];國外醫(yī)學.眼科學分冊;2003年04期

2 黃敏麗;PEDF與眼科疾病[J];廣西醫(yī)學;2004年06期

3 金姬,關(guān)明;色素上皮細胞衍生因子:一種高效的新生血管抑制因子[J];眼科新進展;2002年01期

4 劉慶淮,謝平;色素上皮衍生因子與視網(wǎng)膜疾病的研究進展[J];中華眼底病雜志;2003年01期

5 張雷,王康孫;色素上皮衍生因子與眼部新生血管性疾病[J];眼科新進展;2004年06期

6 史雪輝,何守志,趙世紅;色素上皮衍生因子在大鼠脈絡膜新生血管中的表達及意義[J];中華眼科雜志;2004年06期

7 趙曉娟,李彬;色素上皮細胞衍生因子在眼內(nèi)抗血管生成作用的研究進展[J];國外醫(yī)學.眼科學分冊;2004年03期

8 張雷,王康孫,王玲,陳榮家;PEDF和VEGF mRNA在實驗性脈絡膜新生血管組織中的表達[J];眼科新進展;2004年02期

9 金姬,關(guān)明,馬建興,劉祖國;PEDF和VEGF在翼狀胬肉組織中的不平衡表達[J];眼科研究;2004年05期

10 司馬晶,James Fant,劉祖國;翼狀胬肉與正常角膜和結(jié)膜的PEDF和VEGF水平[J];中國實用眼科雜志;2004年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 宋晗;;葛根素對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜PEDF表達的影響[A];第十屆全國中西醫(yī)結(jié)合眼科學術(shù)會議暨第五屆海峽眼科學術(shù)交流會論文匯編[C];2011年

2 曹明芳;劉安;金威爾;;VEGF、bFGF、PEDF在視瞻昏渺發(fā)病機理的實驗研究中的表達[A];全國第九次中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合眼科學術(shù)年會論文匯編[C];2010年

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1 童平;Hox基因在高糖誘導人視網(wǎng)膜色素上皮細胞增殖分化中的作用研究[D];中南大學;2010年

2 戴儀;重組人色素上皮衍生因子的制備及生物學活性研究[D];復旦大學;2010年

3 侯慧媛;骨髓來源細胞在脈絡膜新生血管發(fā)生發(fā)展中的作用及其治療潛能[D];第四軍醫(yī)大學;2010年

4 史雪輝;PEDF、TGF-β1在BN大鼠CNV中的表達及rhPEDF對CNV抑制作用的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2004年

5 劉姝;色素上皮源性因子基因轉(zhuǎn)染抑制巨噬細胞誘發(fā)PVR的實驗研究[D];吉林大學;2007年

6 馬麗娜;色素上皮衍生因子聯(lián)合巨噬細胞條件培養(yǎng)液或晶狀體損傷對視神經(jīng)損傷的修復作用[D];第四軍醫(yī)大學;2010年

7 高玉;microRNA在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中表達差異譜的研究[D];第二軍醫(yī)大學;2010年

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1 張小燕;PEDF基因多態(tài)性與滲出性年齡相關(guān)性黃斑變性危險性的研究[D];山東大學;2011年

2 夏偉;色素上皮衍生因子與炎癥的相關(guān)性研究[D];重慶醫(yī)科大學;2012年

3 曾曉波;糖尿病視網(wǎng)膜病變血清和玻璃體液VEGF及PEDF的定量分析[D];大連醫(yī)科大學;2012年

4 姚明言;α-硫辛酸對高糖培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜色素上皮細胞氧化應激以及分泌VEGF與PEDF的影響[D];河北醫(yī)科大學;2013年

5 孫時磊;新生血管性青光眼患者血清及房水中PEDF、VEGF水平及其病因相關(guān)性研究[D];大連醫(yī)科大學;2012年

6 江新利;色素上皮源性因子治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的機理研究[D];河北醫(yī)科大學;2011年

7 李小璐;不同病程糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病理改變及其VEGF、PEDF的動態(tài)表達[D];寧夏醫(yī)科大學;2013年

8 付月;色素上皮衍生因子抑制堿燒傷角膜新生血管的機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2013年

9 劉寧寧;糖尿病視網(wǎng)膜病變大鼠模型中VEGF和PEDFmRNA的動態(tài)變化及意義[D];中國醫(yī)科大學;2003年

10 黨維華;糖尿病視網(wǎng)膜血管形態(tài)學變化與VEGF、PEDF表達相關(guān)性研究[D];吉林大學;2008年

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本文編號：1909268