本文選題：真菌性角膜炎 + 乳膠微粒��； 參考：《福建醫(yī)科大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：目的通過預(yù)先Balb/c小鼠中央角膜基質(zhì)層內(nèi)注射乳膠微�；罨奘杉�(xì)胞,觀察真菌性角膜炎的發(fā)生發(fā)展及其細(xì)胞因子在小鼠角膜中的表達(dá)水平,探討機(jī)體免疫對(duì)小鼠真菌性角膜炎發(fā)生發(fā)展的影響。 方法50只Balb/c小鼠隨機(jī)分成兩組,每組25只。其中1組為實(shí)驗(yàn)組,小鼠右眼感染真菌前7天于角膜淺基質(zhì)層內(nèi)注入乳膠微粒,然后應(yīng)用角膜表層鏡法建立Balb/c小鼠茄病鐮刀菌性角膜炎模型;另1組為對(duì)照組,小鼠右眼感染真菌前7天于角膜淺基質(zhì)層內(nèi)注入PBS。在感染后第1、3、5、7天,裂隙燈顯微鏡觀察角膜炎特點(diǎn);HE染色觀察角膜病理變化;Real Time PCR和ELISA檢測(cè)角膜中Thl細(xì)胞因子(IL-12)及Th2細(xì)胞因子(IL-4)基因mRNA和蛋白的表達(dá)。 結(jié)果1.實(shí)驗(yàn)組,早期角膜浸潤(rùn)混濁且進(jìn)行性加重,主要表現(xiàn)在角膜中央;第5天后新生血管大量生長(zhǎng)、角膜穿孔率增高。對(duì)照組,早期角膜浸潤(rùn)混濁主要表現(xiàn)為彌漫性病變,第5天后新生血管生長(zhǎng)、角膜穿孔,穿孔率較低; 2.HE染色及免疫組化實(shí)驗(yàn)組可見早期角膜中央炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),第5天后大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),角膜基質(zhì)中纖維細(xì)胞減少,角膜后彈力層膨出。對(duì)照組可見早期在角膜緣、角膜基質(zhì)及前房中有大量的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),第5天后炎癥細(xì)胞減少,角膜基質(zhì)中纖維細(xì)胞逐漸增多;免疫組化示實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組角膜中更多量巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)。 3.Real time-PCR與ELISA檢測(cè)結(jié)果表明,Thl細(xì)胞因子(IL-12)和Th2細(xì)胞因子(IL-4)基因mRNA及蛋白在角膜接種菌液后實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組均出現(xiàn)表達(dá),且IL-12的表達(dá)顯著強(qiáng)于IL-4(P0.05),但是實(shí)驗(yàn)組中Thl細(xì)胞因子(IL-12)的表達(dá)顯著強(qiáng)于對(duì)照組。 結(jié)論在真菌性角膜炎中,Thl/Th2型免疫應(yīng)答共同參與調(diào)節(jié)機(jī)體的抗真菌免疫,但以Th1型應(yīng)答為主;角膜感染真菌后第5天機(jī)體的免疫力達(dá)最強(qiáng);巨噬細(xì)胞在真菌性角膜炎中起重要作用,活化巨噬細(xì)胞可能上調(diào)免疫反應(yīng)而加劇真菌性角膜炎炎癥反應(yīng)。
[Abstract]:Objective to observe the occurrence and development of fungal keratitis and the expression of cytokines in the cornea of Balb/c mice by injecting latex particles into the central stromal layer to activate macrophages. To investigate the effect of immune system on the occurrence and development of fungal keratitis in mice. Methods 50 Balb/c mice were randomly divided into two groups with 25 mice in each group. The first group was the experimental group, 7 days before the fungal infection in the right eye, latex particles were injected into the superficial stromal layer of the cornea, then the Balb/c mouse model of Fusarium solani keratitis was established by corneal surface microscopy, the other group was used as the control group. PBSs were injected into the superficial stromal layer of cornea 7 days before fungal infection in the right eye of mice. On the 7th day after infection, keratitis was observed by slit lamp microscope. The expression of Thl cytokine IL-12) and Th2 cytokine IL-4 gene mRNA and protein were detected by real Time PCR and ELISA. Result 1. In the experimental group, the early corneal infiltration was turbid and gradually aggravated, mainly in the central cornea, and the rate of corneal perforation was increased after 5 days of neovascularization. In the control group, early corneal infiltration and opacity mainly showed diffuse lesions, and the rate of corneal perforation was low after 5 days of neovascularization. 2.HE staining and immunohistochemical staining showed early infiltration of central corneal inflammatory cells. After 5 days, a large number of inflammatory cells were infiltrated, fibroblasts in corneal stroma decreased, and the posterior elastic layer of cornea expanded. In the control group, a large number of inflammatory cells were infiltrated in the limbus cornea, corneal stroma and anterior chamber at the early stage. After 5 days, the inflammatory cells decreased and the fibroblasts in the corneal stroma increased gradually. Immunohistochemistry showed that more macrophages infiltrated the cornea in the experimental group than in the control group. The results of 3.Real time-PCR and ELISA showed that the mRNA and protein of THL cytokine IL-12 and Th2 cytokine IL-4 were expressed in both experimental group and control group after corneal inoculation. The expression of IL-12 was significantly higher than that of IL-4 P 0.05, but the expression of Thl cytokine IL-12 was significantly higher in the experimental group than that in the control group. Conclusion Thl / Th2 type immune response in fungal keratitis is involved in the regulation of antifungal immunity, but mainly in Th1 type, and the immunity of the body is strongest on the 5th day after fungal infection. Macrophages play an important role in fungal keratitis. Activated macrophages may up-regulate the immune response and aggravate the inflammatory response of fungal keratitis.
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R772.21

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本文編號(hào)：1863282