LMPs特異性T淋巴細(xì)胞對鼻咽癌細(xì)胞的殺傷作用
本文選題:EB病毒 + 潛伏膜蛋白 ; 參考:《南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2014年06期
【摘要】:目的:研究樹突狀細(xì)胞負(fù)載EB病毒潛伏膜蛋白(latent membrane proteins,LMPs)介導(dǎo)生成的LMPs特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)LMPs-CTL的生物學(xué)特性,觀察其對LMPs陽性鼻咽癌細(xì)胞SUNE的殺傷作用。方法:用淋巴細(xì)胞分離液分離人外周血單核細(xì)胞,采用貼壁分離及白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-4、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)等細(xì)胞因子誘導(dǎo)成熟樹突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC),通過DC細(xì)胞負(fù)載LMPs多肽抗原并遞呈給同源T淋巴細(xì)胞,制備LMPs-CTL。CCK8法檢測LMPs-CTL對SUNE細(xì)胞的殺傷作用;ELISA和羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂(carboxy fluoroscein succinimidyl ester,CFSE)染色法檢測LMPs-CTL分泌IFN-γ及其增殖。結(jié)果:LMPsCTL對SUNE細(xì)胞的殺傷率在12 h和24 h分別為(43.47±1.93)%和(77.15±3.18)%,顯著高于對照組的(11.45±3.06)%和(24.27±13.20)%(P0.05)。SUNE細(xì)胞刺激后,LMPs-CTL增殖能力較對照組有明顯增強(qiáng),IFN-γ分泌量達(dá)到(613.40±121.77)pg/ml,顯著高于對照組(86.90±3.70)pg/ml(P0.05)。結(jié)論:通過DC細(xì)胞負(fù)載LMPs混合多肽可誘導(dǎo)生成LMPsCTL,對LMPs陽性鼻咽癌細(xì)胞有較強(qiáng)的殺傷作用。
[Abstract]:Aim: to study the biological characteristics of cytotoxic T lymphocytes (LMPs) mediated by EBV latent membrane protein (LMPs) mediated by dendritic cells loaded with EB virus latent membrane protein (EBV), and to observe its killing effect on LMPs positive nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line SUNE. Methods: human peripheral blood mononuclear cells were isolated from human peripheral blood by lymphocyte isolation. Mature dendritic cells were induced by adherent isolation, interleukin-IL-4, granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) and other cytokines. The dendritic cells were loaded with LMPs polypeptide antigen and presented to homologous T lymphocytes through DC cells. The cytotoxic effect of LMPs-CTL on SUNE cells was detected by LMPs-CTL.CCK8 method. LMPs-CTL secreted IFN- 緯 and its proliferation were detected by Elisa and carboxy fluoroscein succinimidyl ester-CFSE staining of hydroxy fluorescein diacetate succinimide. Results the killing rate of SUNE cells at 12 h and 24 h were 43.47 鹵1.93% and 77.15 鹵3.18%, respectively, which were significantly higher than those of the control group (11.45 鹵3.06g% and 24.27 鹵13.20)%(P0.05).SUNE cells), and the proliferative capacity of LMPs-CTL was 613.40 鹵121.77 ng / ml, which was significantly higher than that of the control group (86.90 鹵3.70g / ml). Conclusion: DC cells loaded with LMPs mixed polypeptides can induce the formation of LMPsCTL, which has a strong killing effect on LMPs positive nasopharyngeal carcinoma cells.
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科;南京醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;南京軍區(qū)軍事醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】:江蘇省臨床醫(yī)學(xué)科技專項(xiàng)(BL2013038) 江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃(CXZZ12_0563)
【分類號】:R739.63
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號:1830071
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