本文選題：鼻咽腫瘤　切入點(diǎn)：感受態(tài)細(xì)胞　出處：《重慶醫(yī)學(xué)》2015年26期

【摘要】：目的篩選攜帶抗鼻咽癌質(zhì)粒pFY的穩(wěn)定高產(chǎn)菌株。方法以CaCl2法制備大腸桿菌JM109感受態(tài),將抗鼻咽癌質(zhì)粒pFY轉(zhuǎn)化JM109感受態(tài),對瓊脂平板上獲得的菌落進(jìn)行篩選,選出符合標(biāo)準(zhǔn)的單菌落為菌種,進(jìn)行菌種穩(wěn)定性實驗。用質(zhì)粒提取試劑盒檢測質(zhì)粒含量。將抗鼻咽癌質(zhì)粒pFY轉(zhuǎn)染到細(xì)胞CNE-2中,四氮唑藍(lán)(MTT)比色法觀察轉(zhuǎn)染試劑及質(zhì)粒載體對細(xì)胞生長增殖的影響。結(jié)果篩選得到菌株的培養(yǎng)液中質(zhì)粒DNA含量為30mg/mL,超螺旋DNA比例為92%。經(jīng)電泳和酶切鑒定,該菌株的50子代所攜帶質(zhì)粒與原代一致。質(zhì)粒pFY對CNE-2細(xì)胞株生長有明顯的抑制作用。結(jié)論成功篩選出攜帶抗鼻咽癌質(zhì)粒pFY的穩(wěn)定高產(chǎn)菌株,為大批量制備臨床應(yīng)用級質(zhì)粒奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to screen stable and high-yielding strains carrying anti-nasopharyngeal carcinoma (NPC) plasmid pFY. Methods Escherichia coli JM109 was prepared by CaCl2 method, and the plasmid pFY was transformed into JM109 receptive state to screen the colony on Agar plate. A single colony that meets the standard was selected as the strain, and the stability experiment was carried out. The plasmid content was detected by plasmid extraction kit. The anti-nasopharyngeal carcinoma plasmid pFY was transfected into the cell CNE-2. The effect of transfection reagent and plasmid vector on cell growth and proliferation was observed by MTT colorimetry. Results the plasmid DNA content and superhelix DNA ratio were 30 mg / mL and 92% respectively. The plasmids carried in 50 progenies of this strain were consistent with the original ones. Plasmid pFY could inhibit the growth of CNE-2 cell line obviously. Conclusion A stable and high yield strain carrying plasmid pFY against nasopharyngeal carcinoma was successfully screened. It lays a foundation for large batch preparation of clinical application grade plasmids.
【作者單位】： 佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗系;
【基金】：廣東省醫(yī)學(xué)科研基金資助項目(A2013687) 廣東省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(1184713046)
【分類號】：R739.63

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 王園園;蔡仕英;姚志建;;幾種制備感受態(tài)細(xì)胞及質(zhì)粒轉(zhuǎn)化方法的比較[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;1991年02期

2 王世偉;李旭業(yè);張偉偉;;優(yōu)化感受態(tài)細(xì)胞制備方法提高轉(zhuǎn)化效率的研究[J];齊齊哈爾大學(xué)學(xué)報;2009年02期

3 賈衛(wèi)華,曾益新;鼻咽癌易感基因的研究[J];實用腫瘤雜志;2004年04期

4 孟玲，譚德勇，王煥校;CaCl_2法質(zhì)粒轉(zhuǎn)化最佳條件的探討[J];云南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);1996年02期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李晶;;提高重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化E. coli DH5α方法的研究[J];安徽農(nóng)學(xué)通報(上半月刊);2012年09期

2 楊坤;鞏振輝;李大偉;;大腸桿菌高效感受態(tài)細(xì)胞的制備及快捷轉(zhuǎn)化體系的建立[J];北方園藝;2010年14期

3 謝永芳,梁亦龍,王光利;小鼠胚胎發(fā)育中期肝細(xì)胞增殖與凋亡[J];重慶郵電學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版);2003年01期

4 牛福星;于晶晶;湯宏赤;劉金平;滕昆;韋宇拓;;枯草芽孢桿菌突變株IA857高效轉(zhuǎn)化方法的研究[J];廣西科學(xué);2014年02期

5 Jeff P.Bruce;Fei-Fei Liu;;MicroRNAs in nasopharyngeal carcinoma[J];Chinese Journal of Cancer;2014年11期

6 成楊;趙洋;楊培迪;楊陽;劉振;;茶樹Bt和Cpti雙價抗蟲基因轉(zhuǎn)化研究(簡報)[J];茶葉通訊;2014年04期

7 李偉星;張力;王揚(yáng);張君勝;楊曉志;張鐸;;不同條件對大腸桿菌K12轉(zhuǎn)化質(zhì)粒pKD46效率研究[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年08期

8 梁亦龍,謝永芳,聶永萍,舒坤賢;小鼠胚胎發(fā)育中期心臟細(xì)胞增殖與凋亡的研究[J];海南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2003年04期

9 李鸝,黃衡宇;p53基因在小鼠胚胎發(fā)育過程中的表達(dá)[J];吉首大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2000年04期

10 李鸝,黃衡宇,謝永芳;P16基因在小鼠胚胎發(fā)育過程中的表達(dá)[J];吉首大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 陳學(xué)東;氣虛體質(zhì)狀態(tài)與二亞硝基哌嗪相互作用致鼻咽癌前病變機(jī)制研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2005年

2 楊海;人抗凝血酶Ⅲ的cDNA克隆、表達(dá)、純化及其重組蛋白對DIC大鼠模型的療效研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2009年

3 安吉翠;柑橘硼運(yùn)輸基因CiNIP5和CiNIP6的克隆和功能鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

4 余祖華;Meq基因簇microRNAs調(diào)控馬立克氏病病毒致病表型的研究[D];吉林大學(xué);2014年

5 任艷鑫;病毒IL-10通過“MHC-I類分子抗原加工提呈操縱子”致鼻咽癌免疫逃逸的機(jī)制研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

6 劉眈;SIX1促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移[D];華中科技大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前7條

1 彭勇;葉酸代謝酶基因多態(tài)性與鼻咽癌的遺傳易感性研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2007年

2 沈愛梅;鴨腸炎病毒UL45基因去跨膜區(qū)原核表達(dá)、抗體制備、轉(zhuǎn)錄時相及編碼蛋白特性研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 劉晉佳;雞MIF蛋白原核表達(dá)、純化及生物信息初步分析[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

4 趙麗玲;慢病毒載體精子介導(dǎo)法生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因雞研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

5 邢程;錦鯉皰疹病毒(KHV)ORF68部分基因原核表達(dá)及免疫原性的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

6 趙澤華;雞巨噬細(xì)胞移動抑制因子原核表達(dá)與多克隆抗體的制備[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

7 吳明;過量表達(dá)原人參二醇合成酶基因（D12H）對人參皂苷含量的影響[D];吉林大學(xué);2015年

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王友如;;CaCl_2濃度對感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化效率的影響[J];湖北師范學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版);2006年03期

2 謝志雄,陳向東,沈萍,劉義,屈松生;大腸桿菌HB101感受態(tài)的熱化學(xué)研究[J];化學(xué)學(xué)報;2000年02期

3 劉志洪,李文化,沈萍,蔡汝秀;Fura-2熒光探針研究Ca~(2+)對大腸桿菌細(xì)胞的跨膜作用[J];化學(xué)學(xué)報;2004年04期

4 柯濤,張勇法,潘園園,馬向東;溫度對大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的影響[J];河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2003年01期

5 羅嬋,湯剛彬,謝體三,石德順;感受態(tài)細(xì)胞制備與保存方法的比較研究[J];生物技術(shù);2005年01期

6 游雷鳴;翁海波;韓紹印;席宇;孫春花;;大腸桿菌JM109感受態(tài)形成因素分析[J];生物技術(shù);2007年02期

7 王立良,王淼,陳連鳳,宋國興;冷凍復(fù)蘇法高效轉(zhuǎn)化大腸桿菌[J];生物技術(shù)通訊;2002年03期

8 令利軍,朱艷,王紅梅,張艷萍,楊隨莊,王敏,張正英;保存時間及溫度對大腸桿菌感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率的影響[J];生物技術(shù)通訊;2004年01期

9 寇曉霞;吳清平;王大鵬;郭偉鵬;鄧梅清;;多重RT-PCR用于臨床檢測三種胃腸炎病毒的研究[J];微生物學(xué)通報;2007年03期

10 張嵐嵐,徐春燕,徐昌杰;大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力的影響因素[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2004年04期

，

本文編號：1673844