本文關(guān)鍵詞：不同病程糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病理改變及其VEGF、PEDF的動(dòng)態(tài)表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《寧夏醫(yī)科大學(xué)》 2013年

不同病程糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病理改變及其VEGF、PEDF的動(dòng)態(tài)表達(dá)

李小璐  

【摘要】：目的：觀察不同病程糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的病理改變并對(duì)其VEGF、PEDF的動(dòng)態(tài)表達(dá)進(jìn)行研究，以探討糖尿病發(fā)展過(guò)程中視網(wǎng)膜發(fā)生的病理改變及其VEGF、PEDF在糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)展中的意義。 方法：雄性SD大鼠123只，隨機(jī)分為正常對(duì)照1個(gè)月組（CON1組）、正常對(duì)照3個(gè)月組（CON2組）、正常對(duì)照5個(gè)月組（CON3組），每組各20只，糖尿病1個(gè)月組（DM1組）、糖尿病3個(gè)月組（DM2組）和糖尿病5個(gè)月組（DM3組），每組各21只。DM1組、DM2組及DM3組大鼠通過(guò)一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）制作糖尿病模型。于成模后1個(gè)月、3個(gè)月、5個(gè)月分別隨機(jī)抽取相應(yīng)糖尿病組及正常對(duì)照組大鼠，通過(guò)透射電鏡切片技術(shù)、視網(wǎng)膜HE染色、EB染色視網(wǎng)膜鋪片、視網(wǎng)膜EB含量測(cè)定來(lái)觀察不同病程糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的病理改變。同時(shí)，用免疫組織化學(xué)染色、實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western-blot技術(shù)檢測(cè)大鼠視網(wǎng)膜VEGF、PEDF的動(dòng)態(tài)表達(dá)。 結(jié)果：糖尿病1個(gè)月組大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)已出現(xiàn)改變，且隨病程延長(zhǎng)，糖尿病大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞病變逐漸加重。視網(wǎng)膜HE染色示隨病程延長(zhǎng)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜各層細(xì)胞病理改變加重。EB染色視網(wǎng)膜鋪片顯示正常對(duì)照組視網(wǎng)膜血管形態(tài)正常；DM1組大鼠視網(wǎng)膜血管走行較規(guī)則；DM2組大鼠視網(wǎng)膜血管走行出現(xiàn)迂曲，部分血管形態(tài)出現(xiàn)改變，伴少量熒光滲漏；DM3組大鼠視網(wǎng)膜血管迂曲明顯，走行紊亂，管徑粗細(xì)不均，出現(xiàn)大量熒光滲漏。各糖尿病組大鼠視網(wǎng)膜EB含量均大于正常對(duì)照組， DM1組、DM2組、DM3組視網(wǎng)膜EB含量分別為15.786±1.848（ng/mg）、21.596±1.922（ng/mg）、26.310±2.179（ng/mg），即隨時(shí)間延長(zhǎng)，視網(wǎng)膜EB含量增大，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。視網(wǎng)膜免疫組化顯示視網(wǎng)膜VEGF陽(yáng)性染色隨病程進(jìn)展而增強(qiáng)，，且MOD值也不斷增大，CON1組、CON2組、CON3組、DM1組、DM2組、DM3組視網(wǎng)膜MOD值分別為0.215±0.019、0.225±0.024、0.215±0.021、0.302±0.031、0.523±0.047、0.748±0.078，且各比較組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；PEDF陽(yáng)性染色隨病程進(jìn)展而減弱，且MOD值也不斷減小，CON1組、CON2組、CON3組、DM1組、DM2組、DM3組視網(wǎng)膜MOD值分別為0.908±0.073、0.915±0.031、0.898±0.029、0.735±0.087、0.607±0.055、0.187±0.039，且各比較組間P0.05。qPCR示隨病程延長(zhǎng)，糖尿病組大鼠視網(wǎng)膜VEGF mRNA表達(dá)量與正常對(duì)照組相比不斷增多，CON1組、CON2組、CON3組、DM1組、DM2組、DM3組VEGF表達(dá)量分別為0.105±0.014、0.099±0.129、0.106±0.012、0.372±0.037、1.031±0.095、2.364±0.198，且各比較組間P0.05；糖尿病組大鼠視網(wǎng)膜PEDF mRNA表達(dá)量與正常對(duì)照組相比不斷減少，CON1組、CON2組、CON3組、DM1組、DM2組、DM3組視網(wǎng)膜PEDF表達(dá)量分別為2.643±0.188、2.589±0.136、2.533±0.1521.528±0.093、0.905.±0.111、0.254±0.077，且各組間P0.05。Western-blot示隨病程進(jìn)展，糖尿病組大鼠視網(wǎng)膜VEGF蛋白含量增加，PEDF蛋白含量減少。CON1組、CON2組、CON3組、DM1組、DM2組、DM3組VEGF蛋白表達(dá)量分別為0.328±0.028、0.317±0.048、0.331±0.035、0.436±0.034、0.651±0.028、0.793±0.026，各比較組間P0.05；PEDF表達(dá)量分別為0.796±0.063、0.802±0.034、0.799±0.041、0.605±0.086、0.424±0.065、0.263±0.067，且各比較組間P0.05。 結(jié)論：1.糖尿病大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)病理改變是最早能觀察到的視網(wǎng)膜組織病變，且其病變程度隨病程進(jìn)展而加重；2.糖尿病大鼠視網(wǎng)膜血管形態(tài)結(jié)構(gòu)在糖尿病病程中、后期開(kāi)始發(fā)生病變，且隨病程進(jìn)展而加重；3.糖尿病大鼠血-視網(wǎng)膜屏障功能在病程初期已出現(xiàn)損害，且其嚴(yán)重程度隨病程進(jìn)展而加重；4.視網(wǎng)膜VEGF、PEDF表達(dá)失衡在糖尿病初期就已存在，隨病程進(jìn)展，VEGF表達(dá)不斷增多，PEDF表達(dá)不斷減少，即二者的失衡存在于糖尿病發(fā)展全程。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R774.1;R587.2
【目錄】：

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