本文選題：緩釋劑　切入點(diǎn)：橫紋肌肉瘤細(xì)胞　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的： 將根據(jù)控釋給藥理論研制的5-氟尿嘧啶(5-Fu)和順鉑兩種緩釋劑進(jìn)行體外釋放實(shí)驗(yàn)及體外抑瘤實(shí)驗(yàn),觀察藥物在體外的釋放情況及對(duì)人橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞的抑制作用及其對(duì)細(xì)胞周期的影響,為緩釋劑對(duì)眼眶橫紋肌肉瘤作用的研究奠定基礎(chǔ)。 方法： 1.5-Fu和順鉑緩釋劑的體外釋放實(shí)驗(yàn)：取含5mg 5-Fu的緩釋劑置于10ml刻度試管中,加入5ml 0.1mol/LPBS,37℃恒溫下浸泡,按浸泡后第1d,3d，，5d,8d留取浸出液標(biāo)本,用高效液相色譜儀測(cè)定藥物濃度,計(jì)算藥物的釋放量。順鉑緩釋劑體外緩釋方法同5-Fu(由于方法相同及經(jīng)費(fèi)考慮,順鉑緩釋劑僅體外緩釋留取浸出液標(biāo)本,不再測(cè)定藥物濃度)。 2.橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞的復(fù)蘇及培養(yǎng),觀察細(xì)胞形態(tài),了解生長(zhǎng)情況和特性,并觀察其與眼眶原發(fā)橫紋肌肉瘤在形態(tài)學(xué)上的異同。 3.5-Fu和順鉑緩釋劑的體外抑瘤實(shí)驗(yàn)：將5-Fu緩釋劑浸泡后第1d,3d,5d,8d的浸出液標(biāo)本,分別作用于橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞,并在作用24小時(shí)后觀察橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞的形態(tài)變化,應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)各浸出液標(biāo)本對(duì)橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞增殖的抑制作用。順鉑緩釋劑方法同5-Fu緩釋劑。 4.應(yīng)用流式細(xì)胞儀,分析不同濃度5-Fu和順鉑浸出液對(duì)橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞細(xì)胞周期的影響。 結(jié)果： 1.5-Fu的體外釋放實(shí)驗(yàn)：第1、3、5、8d 5-Fu緩釋劑在PBS中釋放5-Fu的濃度分別為138.84μg/ml、42.08μg/ml、27.15μg/ml和22.33μg/ml。即第1、3、5、8d釋放量分別為649.20μg、210.40μg、135.75μg、111.65μg,釋放時(shí)間達(dá)8d以上。 2.復(fù)蘇的橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞生長(zhǎng)良好,傳代穩(wěn)定,細(xì)胞多呈梭形或蝌蚪形。與眼眶原發(fā)橫紋肌肉瘤在形態(tài)學(xué)上基本一致。 3.5-Fu和順鉑緩釋劑的體外抑瘤實(shí)驗(yàn)：5-Fu緩釋劑第1、3、5、8d的浸出液對(duì)橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞的抑制率分別為57.6%、49.6%、44.8%、34.5%；順鉑緩釋劑第1、3、5、8d的浸出液對(duì)橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞的抑制率分別為87.8%、46.4%、42.5%、31.1%。,MTT法所測(cè)5-Fu和順鉑緩釋劑的OD值均低于正常對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。空白緩釋劑對(duì)橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞無(wú)明顯抑制作用,與對(duì)照組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 4.流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,兩種緩釋劑作用后的橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞主要表現(xiàn)為G1期阻滯,S,G2期細(xì)胞減少,PI%與對(duì)照組相比差異有顯著性(P0.05)。 結(jié)論： 1.5-Fu和順鉑緩釋劑能在8d內(nèi)在體外先突釋、后緩釋,較穩(wěn)定地持續(xù)釋放,并對(duì)人橫紋肌肉瘤RD細(xì)胞有持續(xù)地抑制作用,干擾了RD細(xì)胞的細(xì)胞周期,產(chǎn)生G1期阻滯,從而抑制細(xì)胞增殖。5-Fu對(duì)RD細(xì)胞的抑制作用具有劑量依賴性。 2.根據(jù)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,推斷5-Fu和順鉑緩釋劑同樣可對(duì)眼眶原發(fā)橫紋肌肉瘤細(xì)胞有持續(xù)地抑制作用,為后續(xù)研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及理論依據(jù)。
[Abstract]:Objective:
According to the theory of development of controlled-release drug delivery 5- fluorouracil and cisplatin (5-Fu) two release agent for in vitro release experiments and in vitro antitumor experiments, observation of drug release in vitro and inhibition of human rhabdomyosarcoma RD cells and its effects on cell cycle, lay the foundation for sustained release agent on effect of orbital rhabdomyosarcoma.
Method錛

本文編號(hào)：1574206