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卡介菌純蛋白衍生物玻璃體腔注射誘導(dǎo)Eales病動物模型的研究

發(fā)布時間:2018-02-20 23:22

  本文關(guān)鍵詞: Eales病 人視網(wǎng)膜可溶性抗原第35段抗原決定簇(HS-AgP35) 卡介菌純蛋白衍生物(BCG-PPD) 雙鏈DNA抗體 動物模型 出處:《遵義醫(yī)學(xué)院》2010年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】: 目的:探討卡介菌純蛋白衍生物玻璃體腔注射建立Eales病動物模型。方法:將成年雄性SD大鼠(N=96)隨機(jī)分成四組分別為:致敏Ⅰ(N'=24)、Ⅱ(N'=24)、Ⅲ(N'=24)及非致敏組(N'=24),其中每組再分四個亞組(n=6)。致敏Ⅰ組:用BCG-PPD 5U+FICA致敏;致敏Ⅱ組:用濃度為1mg/ml的HS-AgP35+FICA佐劑等體積混合置乳缽中研勻乳化后,取0.2ml抗原注入大鼠雙后足墊皮內(nèi)致敏;致敏Ⅲ組:用濃度為1mg/ml的HS-AgP35+FICA等體積置乳缽中研勻乳化后,取0.1ml抗原于大鼠單側(cè)后足墊皮內(nèi)注射,另一側(cè)足墊用BCG-PPD 5U+FICA行皮內(nèi)注射致敏;非致敏組未行任何處理。14d后玻璃體腔注射BCG-PPD 5U、10U、20U及生理鹽水。通過對SD大鼠行熒光素眼底血管造影(fluorescein fundus angiography,FFA)、視網(wǎng)膜鋪片、視網(wǎng)膜病理切片、血清抗HS-AgP35抗體、血清抗dsDNA抗體、MTT等指標(biāo)的檢查及測定并作出相關(guān)性分析。結(jié)果:1、血清中抗HS-AgP35抗體測定:1.1、同一組別不同劑量血清中抗HS-AgP35抗體進(jìn)行比較:致敏Ⅰ組:5U組血清中抗HS-AgP35抗體濃度高于NS組、10U組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.005,95%CI0.0158-0.0732;P=0.002,95%CI0.0211-0.0739)。致敏Ⅱ組:10U組和20U組血清中抗HS-AgP35抗體濃度高于5U組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.022,95%CI0.0661-0.0705;P=0.003,95%CI0.0200-0.0844)。非致敏組與致敏Ⅲ組組內(nèi)比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。1.2、相同劑量不同組別血清中抗HS-AgP35抗體進(jìn)行比較:5U組:致敏Ⅰ組和Ⅲ組血清中抗HS-AgP35抗體濃度高于致敏Ⅱ組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000,95%CI0.0444-0.0783;P=0.045,95%CI0.0017-0.1243)。10U組:致敏Ⅱ組和Ⅲ組血清中抗HS-AgP35抗體濃度高于非致敏、致敏Ⅰ組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.007,95%CI0.0088-0.0482;P=0.017,95%CI0.0048-0.0442;P=0.002,95%CI0.0133-0.0527;P=0.006,95%CI0.0093-0.0487)。2、血清中雙鏈DNA抗體測定:2.1、同一組別不同劑量血清中雙鏈DAN抗體測定:致敏Ⅱ組:10U組血清中抗ds DNA抗體濃度高于NS組、5U組、20U組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.003,95%CI0.0164-0.0680;P=0.009,95%CI0.0097-0.0613;P=0.004,95%CI0.0145-0.0661)。非致敏組、致敏Ⅰ組、Ⅲ組組內(nèi)不同劑量比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.2、同劑量不同組別血清中雙鏈DAN抗體測定:5U組:致敏Ⅰ組血清中抗雙鏈DNA抗體濃度高于非致敏組、致敏Ⅲ組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.021,95%CI0.0057-0.0626;P=0.008,95%CI0.0115-0.0685)。10U組:致敏Ⅲ組血清中抗雙鏈DNA抗體濃度高于非致敏組、致敏Ⅰ組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.016、95%CI0.0152-0.1295;P=0.010,95%CI0.0210-0.1353)。20U組:致敏Ⅲ組血清中抗雙鏈DNA抗體濃度高于非致敏組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.022,95%CI0.0041-0.0475)。NS組:致敏與非致敏組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn):致敏Ⅲ組血清中淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)高于非致敏組和致敏Ⅰ組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=9,X2=9,P=0.016,P=0.028),致敏Ⅱ組血清中淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)高于非致敏組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=7,P=0.015);致敏Ⅰ組與非致敏組、致敏Ⅱ組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);致敏Ⅱ組與Ⅲ組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4、眼底熒光血管造影檢查:非致敏組與致敏Ⅰ組玻璃體腔注射不同劑量BCG-PPD后出現(xiàn)眼前段炎癥表現(xiàn),FFA見視網(wǎng)膜靜脈血管擴(kuò)張、迂曲,靜脈血管管壁著染,未見視網(wǎng)膜出血點(diǎn)及滲出,未見熒光遮蔽。致敏Ⅱ組見視網(wǎng)膜靜脈管壁熒光滲漏,致敏Ⅲ組見視網(wǎng)膜靜脈管壁熒光滲漏及視網(wǎng)膜新生血管影像,四組均未見無灌注區(qū),未見滲出性視網(wǎng)膜脫離。5、視網(wǎng)膜病理切片及FITC-dextran心內(nèi)灌注鋪片:視網(wǎng)膜病理切片見非致敏組及致敏Ⅰ組視網(wǎng)膜增厚,皺褶、結(jié)構(gòu)紊亂,視網(wǎng)膜血管擴(kuò)張、充血,血管旁未見淋巴細(xì)胞浸潤,未見新生血管。致敏Ⅱ組及Ⅲ組除有以上表現(xiàn)外,還在視網(wǎng)膜血管旁發(fā)現(xiàn)少量淋巴細(xì)胞浸潤。視網(wǎng)膜鋪片見非致敏組血管走行紊亂,管壁著染,血管見結(jié)節(jié)樣突起,未見熒光滲漏,致敏Ⅰ組見視網(wǎng)膜血管熒光滲漏;致敏Ⅱ組出現(xiàn)血管狹窄,致敏Ⅲ組見血管閉塞及無灌注區(qū)。結(jié)論:1、用HS-AgP35抗原、HS-AgP35抗原聯(lián)合BCG-PPD大鼠足墊皮內(nèi)致敏后玻璃體腔注射BCG-PPD可產(chǎn)生產(chǎn)生視網(wǎng)膜血管炎癥;2、玻璃體腔注射BCG-PPD,聯(lián)合致敏組較單一致敏及非致敏組易產(chǎn)生視網(wǎng)膜血管炎癥,玻璃體腔注射BCG-PPD濃度不同,所引發(fā)的機(jī)體免疫應(yīng)答和視網(wǎng)膜血管炎癥反應(yīng)的程度有差異;3、推測通過向致敏大鼠玻璃體腔注射BCG-PPD,機(jī)體可能通過致敏T/B淋巴細(xì)胞引發(fā)視網(wǎng)膜血管炎。
[Abstract]:Objective : To investigate the establishment of an animal model of Eales disease by intracoelom injection of pure protein derivatives of BCG . Methods : The levels of anti - HS - AgP35 antibody in sera of adult male SD rats ( N ' = 24 ) , 鈪,

本文編號:1520322

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