內(nèi)毛細(xì)胞損傷動(dòng)物模型的建立及其電生理研究
本文關(guān)鍵詞: 短音 SP-CAP 聲刺激聽(tīng)性腦干反應(yīng) 頻率 谷氨酸 耳蝸灌流 電生理 內(nèi)毛細(xì)胞 外毛細(xì)胞 螺旋神經(jīng)元 凋亡誘導(dǎo)因子 DNQX 耳蝸灌流 電生理 內(nèi)毛細(xì)胞 外毛細(xì)胞 螺旋神經(jīng)元 凋亡誘導(dǎo)因子 谷氨酸 DNQX 耳蝸灌流 電生理 內(nèi)毛細(xì)胞 出處:《華中科技大學(xué)》2010年博士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文
【摘要】: 目的:探討豚鼠頻率特異性SP-CAP及AABR的檢測(cè)方法及特點(diǎn); 方法:健康豚鼠20只,分成A、B 2組,每組10只。A組采用腹側(cè)進(jìn)路的方式開(kāi)放聽(tīng)泡,記錄電極放置在圓窗檢測(cè)SP-CAP。B組記錄電極放置在顱頂檢測(cè)AABR。刺激聲頻率為0.25、0.5、1、2、4、8KHz短音。 結(jié)果:成功記錄到了頻率特異性SP-CAP及AABR。SP波隨頻率的增加幅值絕對(duì)值逐漸減小,并逐漸由負(fù)波轉(zhuǎn)為正波。誘導(dǎo)頻率特異性ABR的刺激聲刺激時(shí)程越長(zhǎng)AABR頻率特異性越好,但波形分化差;刺激聲時(shí)程越短,AABR波形越好,頻率特異性越差。 結(jié)論:各頻率刺激聲能誘導(dǎo)出SP-CAP復(fù)合波;而要誘導(dǎo)出波形好,頻率特異性好的ABR波,需要合理的設(shè)置刺激聲參數(shù)。 目的:探討谷氨酸的耳蝸興奮毒性; 方法:豚鼠分成2組,實(shí)驗(yàn)組(20mmol/l谷氨酸灌注組)10只,對(duì)照組(人工外淋巴液灌注組)10只。采用全耳蝸灌流的方法,在灌流前和灌流后2小時(shí)檢測(cè)SP-CAP、AABR、CM、EABR等電生理指標(biāo)的變化。每組5只動(dòng)物在灌流后觀察內(nèi)外毛細(xì)胞形態(tài)變化。余下動(dòng)物在灌流后8小時(shí)觀察凋亡誘導(dǎo)因子及caspase的表達(dá)變化。 結(jié)果:谷氨酸灌流2小時(shí)后,CAP、AABR、EABR閾值升高,SP波由負(fù)波轉(zhuǎn)為正波,CM幅值變小,非線性變化仍存在。內(nèi)毛細(xì)胞突觸結(jié)構(gòu)破壞,內(nèi)毛細(xì)胞出現(xiàn)空泡樣改變。外毛細(xì)胞形態(tài)無(wú)變化。螺旋神經(jīng)元出現(xiàn)空泡樣變化。凋亡誘導(dǎo)因子在螺旋神經(jīng)元由胞漿進(jìn)入胞核。谷氨酸灌流后在Corti's器及螺旋神經(jīng)節(jié)上都未見(jiàn)caspase表達(dá)。 結(jié)論:谷氨酸對(duì)耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞及螺旋神經(jīng)元有明顯的毒性作用,并可通過(guò)AIF誘導(dǎo)螺旋神經(jīng)元的凋亡。 目的:觀察DNQX對(duì)耳蝸電生理及形態(tài)的影響; 方法:10只豚鼠采用全耳蝸灌流的方法,在灌流前及灌流DNQX2小時(shí)后檢測(cè)SP-CAP、AABR、EABR、CM等的變化。5只豚鼠觀察灌流后內(nèi)、外毛細(xì)胞形態(tài)變化,另外5只在灌流后8小時(shí)觀察capase和凋亡誘導(dǎo)因子的表達(dá)變化。 結(jié)果:CAP、AABR閾值明顯升高,EABR、SP、CM未見(jiàn)明顯變化。內(nèi)、外毛細(xì)胞和螺旋神經(jīng)元形態(tài)未見(jiàn)明顯變化,凋亡誘導(dǎo)因子表達(dá)無(wú)變化,未見(jiàn)caspase表達(dá)。 結(jié)論:DNQX能拮抗谷氨酸的生理作用,而對(duì)耳蝸沒(méi)有明顯的毒性作用。 目的:探討內(nèi)毛細(xì)胞損傷動(dòng)物模型建模的方法; 方法:10只豚鼠采用全耳蝸灌流的方法,灌流20mmol/l谷氨酸和1.98mmol/lDNQX2小時(shí),檢測(cè)灌流前后SP-CAP、AABR、EABR、CM等的變化。5只豚鼠觀察灌流后內(nèi)、外毛細(xì)胞形態(tài)變化,另外5只在灌流后8小時(shí)觀察螺旋神經(jīng)元上凋亡誘導(dǎo)因子的表達(dá)變化。 結(jié)果:CAP、AABR閾值明顯升高,SP波由負(fù)波轉(zhuǎn)為正波,CM非線性變化仍存在,EABR閾值無(wú)明顯變化。內(nèi)毛細(xì)胞有空泡樣變。外毛細(xì)胞、螺旋神經(jīng)元形態(tài)無(wú)改變,凋亡誘導(dǎo)因子表達(dá)無(wú)變化,未見(jiàn)caspase表達(dá)。 結(jié)論:采用灌流谷氨酸、DNQx混合液的方法能建立損傷在內(nèi)毛細(xì)胞的動(dòng)物模型。
[Abstract]:Objective: to study the detection methods and characteristics of frequency specific SP-CAP and AABR in guinea pigs. Methods: twenty healthy guinea pigs were divided into two groups: group A (n = 10) and group A (n = 10). The recording electrode was placed in the round window to detect the SP-CAP.B group. The recording electrode was placed on the top of the skull to detect the AABR. Results: Frequency-specific SP-CAP and AABR.SP waves decreased gradually with the increase of frequency. The longer the duration of ABR stimulation, the better the frequency specificity of AABR, but the worse the waveform differentiation. The shorter the stimulus duration, the better the AABR waveform and the worse the frequency specificity. Conclusion: the SP-CAP complex wave can be induced by the sound energy of each frequency stimulus, and the sound parameters of the stimulation sound should be set reasonably to induce the ABR wave with good waveform and frequency specificity. Objective: to study the excitotoxicity of glutamate in cochlea. Methods: guinea pigs were divided into two groups: experimental group (n = 10) and control group (n = 10). SP-CAP AABRN CM was detected before and 2 hours after perfusion. The changes of electrophysiological indexes such as EABR. The morphological changes of hair cells were observed in 5 animals in each group. The expression of apoptosis-inducible factor and caspase in the remaining animals were observed 8 hours after perfusion. Results: after 2 hours of glutamate perfusion, the threshold value of AABRN EABR increased and the amplitude of SP wave changed from negative wave to positive wave. The nonlinear change still existed, and the synaptic structure of the inner hair cell was destroyed. There were vacuol-like changes in inner hair cells, no changes in morphology of outer hair cells, vacuol-like changes in spiral neurons, apoptosis inducing factors in the nucleus of spiral neurons from cytoplasm, and glutamic acid perfusion in the Corti's organ. No expression of caspase was found in spiral ganglion. Conclusion: glutamate has obvious toxic effects on cochlear hair cells and spiral neurons, and can induce apoptosis of spiral neurons through AIF. Objective: to observe the effect of DNQX on electrophysiology and morphology of cochlea. Methods 10 guinea pigs were perfused with whole cochlea and SP-CAP AABR EABR was detected before and after perfusion for DNQX2 hours. The changes of CM were observed in 5 guinea pigs and the expression of capase and apoptosis-inducing factor were observed in 5 guinea pigs at 8 hours after perfusion. Results there was no significant change in the AABR threshold of AABR, but no significant changes in the morphology of outer hair cells and spiral neurons, and no change in the expression of apoptosis-inducible factors in SPCM. No caspase expression was found. ConclusionDNQX can antagonize the physiological effect of glutamate, but has no obvious toxicity to cochlea. Objective: to explore the method of modeling the animal model of inner hair cell injury. Methods 10 guinea pigs were perfused with 20 mmol / l glutamic acid and 1.98 mmol / L DNQX for 2 hours, and SP-CAP AABR was measured before and after perfusion. The morphological changes of outer hair cells were observed in 5 guinea pigs and the expression of apoptosis-inducible factors in spiral neurons were observed 8 hours after perfusion in 5 guinea pigs. Results the threshold value of AABR increased significantly from negative wave to positive wave (CM). There was no significant change in EABR threshold, but there was no significant change in the threshold of EABR. The expression of apoptosis-inducible factor and caspase were not changed in spiral neurons. Conclusion: the animal model of inner hair cell injury can be established by perfusing the mixture of glutamate and DNQx.
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類(lèi)號(hào)】:R764
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