TSP-1、PDGF-B在早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜上的表達變化及曲安奈德的干預(yù)作用
本文關(guān)鍵詞:TSP-1、PDGF-B在早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜上的表達變化及曲安奈德的干預(yù)作用 出處:《鄭州大學(xué)》2011年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
更多相關(guān)文章: 血小板反應(yīng)蛋白-1 血小板源性生長因子-B 曲安奈德
【摘要】:糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)是糖尿病患者的嚴(yán)重并發(fā)癥之一,是導(dǎo)致失明的重要原因,但DR的發(fā)病機制仍在探討中。從DR的成因血流動態(tài)異?,持續(xù)的高血糖狀態(tài)、異常的血小板聚集和凝集不僅是引起毛細血管閉塞的重要因素,而且是促成視網(wǎng)膜缺血缺氧和眼內(nèi)新生血管形成的主要病理生理基礎(chǔ)。PDGF-B與TSP-1均由血小板釋放,TSP-1已被公認(rèn)為是一種有效的內(nèi)源性血管生成抑制因子,PDGF-B廣泛存在于發(fā)育中的血管,能夠促進微血管周細胞生長,保持微血管的正常功能。近年來,國內(nèi)(外)在DR成因中有關(guān)血流動力學(xué)方面關(guān)于血小板在DR晚期的研究比較多,而對早期的研究相對比較少。相關(guān)的研究表明,TSP-1、PDGF-B與新生血管的形成密切相關(guān)。曲安奈德是一種糖皮質(zhì)激素,近些年來,廣泛應(yīng)用于眼科,但其對早期DR的治療作用研究相對不多。 本實驗擬建立糖尿病眼動物模型,觀察早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜上TSP-1(血小板反應(yīng)蛋白-1)、PDGF-B (血小板源性生長因子-B)的表達變化及其相互關(guān)系,并探討曲安奈德玻璃體腔注射在不同時期對其變化的干預(yù)作用。 材料與方法 選7周齡、健康、清潔級Wistar大鼠40只,體重150-160g,排除先天性近視及其它眼疾,隨機分兩組,每組20只,共40只,標(biāo)準(zhǔn)飼料飼養(yǎng)適應(yīng)1周后,STZ誘導(dǎo)建立糖尿病大鼠模型。成模后,每周測血糖1次,將中間死亡大鼠及血糖恢復(fù)鼠棄除。其中Ⅰ組成模飼養(yǎng)4周后,實驗眼玻璃體腔內(nèi)注射曲安奈德液5ul(IA),對側(cè)眼注射生理鹽水5u1作為對照(IB),觀察1周;Ⅱ組成模飼養(yǎng)6周后,實驗眼玻璃體腔內(nèi)注射曲安奈德液5ul (ⅡA),對側(cè)眼注射生理鹽水5ul作為對照(ⅡB),也觀察1周;在此過程中感染眼內(nèi)炎者大鼠均棄除,實驗結(jié)束后,分別處死Ⅰ組和Ⅱ組大鼠,取眼球行視網(wǎng)膜切片HE染色、免疫組織化學(xué)染色,通過與電腦相連的Biosens Digital Imaging system分析系統(tǒng)對圖像中陽性反應(yīng)部位進行陽性平均灰度值分析,用陽性平均灰度值來表示免疫反應(yīng)表達程度。陽性平均灰度值的高低與陽性表達的強弱成反比。 結(jié)果 免疫組化染色 TSP-1在視網(wǎng)膜上的表達:陽性細胞表現(xiàn)為胞漿著色呈棕黃色或黃色,主要位于視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層和內(nèi)核層。陽性平均灰度值比較:ⅡA組與ⅠA組、ⅡA組與ⅡB組相比明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);ⅡB與ⅠB組、ⅠA組與IB組相比無統(tǒng)計學(xué)意義。 PDGF-B在視網(wǎng)膜上的表達:陽性細胞表現(xiàn)為胞漿著色呈棕黃色或黃色,主要位于視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層和內(nèi)核層。PDGF-B陽性平均灰度值比較:ⅠA組與ⅠB組、ⅡA組與ⅡB組相比明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);ⅡA組與ⅠA組、ⅡB與ⅠB組相比無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論 1.STZ誘導(dǎo)成功建立糖尿病大鼠模型; 2.在早期DR階段,曲安奈德應(yīng)用能影響TSP-1在DR上的表達,推測TSP-1在早期即參與影響DR的發(fā)生; 3.在早期階段,曲安奈德治療能促進TSP-1和PDGF-B在糖尿病視網(wǎng)膜上的表達,推測在早期DR階段,應(yīng)用曲安奈德有助于DR的治療。
[Abstract]:Diabetic retinopathy (DR) is one of the major complications of diabetes, is an important cause of blindness, but the pathogenesis of DR is still under discussion. See from the causes of DR abnormal blood flow, high blood sugar state, abnormal platelet aggregation and aggregation is not only the important factors caused by capillary occlusion, and is the main the pathophysiological basis of.PDGF-B and TSP-1 to retinal ischemia and intraocular neovascularization were released by platelets, TSP-1 has been recognized as a potent endogenous angiogenesis inhibitor, PDGF-B widely exists in the development of blood vessels, can promote the growth of microvascular pericytes, maintain the normal function of the microvascular in recent years. And domestic (foreign) in the DR formation in the relevant hemodynamic study on platelet in the late DR more, but the early research related research is relatively small. It indicates that TSP-1 and PDGF-B are closely related to the formation of neovascularization. Cu Ann Ned is a glucocorticoid. It has been widely applied in ophthalmology in recent years, but its research on early DR is relatively limited.
This experiment intends to establish the animal model of diabetic eye, observe the early diabetic rat retina TSP-1 (thrombospondin -1), PDGF-B (platelet-derived growth factor -B) expression and their relationship, and the effects of intravitreal injection of triamcinolone acetonide on changes in different period.
Materials and methods
7 weeks of age, health, clean Wistar rats 40, weight 150-160g, excluding congenital myopia and other eye diseases, were randomly divided into two groups, 20 rats in each group, a total of 40, the standard diet for 1 week after adaptation, the establishment of STZ induced diabetic rat model. After modeling, blood glucose was measured 1 times a week the death of rats, and rats. The blood glucose recovery discard compositions of die after 4 weeks of feeding, 5ul liquid injection of triamcinolone acetonide in the vitreous cavity (IA), contralateral injection of 5u1 physiologic saline as control (IB), 1 weeks of observation; II composition die after 6 weeks of feeding, 5ul liquid injection of triamcinolone acetonide the vitreous cavity (A II), contralateral injection of 5ul physiologic saline as control (B), and observed for 1 weeks; those rats were abandoned in infected endophthalmitis during this process, after the end of the experiment, respectively. Group I and group II rats, take the eye retinal slices stained with HE, immune histochemical staining with computer The Biosens Digital Imaging system analysis system was used to analyze the positive mean gray value of the positive part in the image, and the positive average gray value was used to indicate the expression level of the immune reaction. The positive mean gray level value was inversely proportional to the strength of the positive expression.
Result
Immunohistochemical staining
The expression of TSP-1 in the retina: the positive cells showed cytoplasmic staining was brown or yellow, mainly located in the retinal ganglion cell layer and the kernel layer. The positive average gray value comparison: A group and A group I, II, II A group decreased significantly compared with B group, the difference was statistically significant (P0.05); II I B and I B group, A group had no statistical significance compared with the IB group.
The expression of PDGF-B in the retina: the positive cells showed cytoplasmic staining was brown or yellow, mainly located in the retinal ganglion cell layer and core layer.PDGF-B positive average gray value comparison: A group and B group I I, II A group decreased significantly compared with B group, the difference was statistically significant (P0.05); II A group and A group 1, there was no significant difference between B and B II group.
conclusion
The diabetic rat model was successfully established by 1.STZ.
2. in the early DR stage, Cu Ann Ned application could affect the expression of TSP-1 on DR, and it was suggested that TSP-1 was involved in the occurrence of DR in the early stage.
3., in the early stage, Cu Ann Ned treatment can promote the expression of TSP-1 and PDGF-B on the diabetic retina. It is speculated that in the early stage of DR, the application of Cu Ann Ned is helpful for the treatment of DR.
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R774.1
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,本文編號:1434825
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