本文關(guān)鍵詞：PET濾膜用于承載耳蝸基底膜培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究　出處：《中華耳科學(xué)雜志》2015年01期 　論文類(lèi)型：期刊論文

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【摘要】：目的探討一種適宜耳蝸組織貼壁培養(yǎng)的方法。方法 PET濾膜預(yù)先置入層粘連蛋白、鳥(niǎo)氨酸、胎牛血清按2:2:1比例混合均勻的液體中在4℃預(yù)孵過(guò)夜,選取出生四天的C57BL/6J小鼠作為研究對(duì)象。剝?nèi)』啄ひ訮ET濾膜作為承載介質(zhì)培養(yǎng)在加入含青霉素的培液中,48小時(shí)后收取樣本,進(jìn)行免疫熒光(一抗goat anti-otoancorin、mouse anti-beta tubu-linⅢ及對(duì)應(yīng)二抗采用cy3 donkey anti goat,647 donkey anti mouse,染核試劑DAPI,phalloidin)觀察不同部位細(xì)胞,掃描電鏡及制備原位超薄切片透射電鏡觀察體外培養(yǎng)新生小鼠基底膜內(nèi)外毛細(xì)胞、螺旋緣內(nèi)細(xì)胞、螺旋神經(jīng)元細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果耳蝸基底膜在PET膜上貼附生長(zhǎng)良好。各種細(xì)胞的微小結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)保持正常狀態(tài)。結(jié)論 PET濾膜能作為一種新穎的承載基底膜培養(yǎng)的介質(zhì)。
[Abstract]:Objective to explore a suitable method for the cultivation of the cochlear tissue. Methods the PET membrane was pre implanted with laminin, ornithine and fetal bovine serum in a uniform mixture of 2:2:1 ratio and incubated at 4 C for the night. C57BL/6J mice, who were born on the four day, were selected as the research subjects. Stripping the basement membrane with PET membrane as the bearer of culture media in culture medium containing penicillin in 48 hours after receiving samples for immunofluorescence (goat anti-otoancorin, mouse anti-beta, anti tubu-lin and anti Cy3 III corresponding to two by donkey anti goat, 647 donkey anti mouse staining reagent DAPI, phalloidin) were observed in different parts cells were prepared by in situ scanning electron microscope and transmission electron microscope mice were cultured in the basement membrane and inner hair cells, spiral limbus cells and spiral ganglion cell changes in the microstructure of in vitro. Results the epiphytic length of the cochlear basement membrane was attached to the PET membrane. The microstructures and ultrastructures of all kinds of cells remained normal. Conclusion PET filter membrane can be used as a novel medium for bearing basement membrane culture.
【作者單位】： 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;
【基金】：江蘇省自然科學(xué)基金資助(項(xiàng)目號(hào)BK2010104)
【分類(lèi)號(hào)】：R764
【正文快照】： 目前耳蝸體外培養(yǎng)常用的方法是組織貼壁培養(yǎng)法,介導(dǎo)貼壁常用的方法有鼠尾膠包被培養(yǎng)皿[1,2]和鼠尾膠凝膠液滴法[3]。兩種培養(yǎng)方法基底膜都能存活良好,但都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中我們發(fā)現(xiàn)了一種新穎的承載基底膜培養(yǎng)的方法,能同時(shí)結(jié)合現(xiàn)有兩種方法的優(yōu)點(diǎn)。用Millicell中

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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