發(fā)布時(shí)間：2017-12-27 07:46

  本文關(guān)鍵詞：MsrB1對(duì)ONOO~-誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細(xì)胞周期的影響　出處：《眼科新進(jìn)展》2015年11期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的探討蛋氨酸亞砜還原酶B1(methionine sulfoxide reductase B1,MsrB1)基因沉默對(duì)過氧亞硝酸根(ONOO-)誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細(xì)胞(human lens epithelial cells,HLEC)細(xì)胞周期的影響和ERK信號(hào)通路在其中的調(diào)節(jié)作用。方法將培養(yǎng)的HLEC分為兩組:正常組和MsrB1基因沉默組,分別用0μmol·L-1、100μmol·L-1、200μmol·L-1和300μmol·L-1 ONOO-處理20 min后,繼續(xù)培養(yǎng)12 h。用RT-PCR法檢測(cè)MsrB1基因表達(dá)水平變化,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期水平變化,Western blot法檢測(cè)MsrB1基因沉默和ONOO-對(duì)pERK表達(dá)水平的影響。結(jié)果 300μmol·L-1 ONOO-處理HLEC會(huì)導(dǎo)致MsrB1表達(dá)水平顯著下降(P0.01),當(dāng)MsrB1基因沉默細(xì)胞經(jīng)300μmol·L-1ONOO-處理后,MsrB1表達(dá)水平進(jìn)一步顯著下調(diào)(P0.05)。經(jīng)200μmol·L-1或300μmol·L-1 ONOO-處理,HLEC細(xì)胞周期分別阻滯在G2/M期和S期,當(dāng)MsrB1基因沉默細(xì)胞經(jīng)200μmol·L-1或300μmol·L-1 ONOO-處理后,更多的細(xì)胞阻滯在G2/M期或S期(P0.05)。pERK檢測(cè)結(jié)果表明,MsrB1基因沉默前后經(jīng)ONOO-處理導(dǎo)致的細(xì)胞周期阻滯和pERK表達(dá)水平顯著下降有關(guān)(P0.01)。結(jié)論 ONOO-可以下調(diào)HLEC MsrB1表達(dá)水平,MsrB1基因沉默細(xì)胞經(jīng)ONOO-處理,pERK表達(dá)水平顯著下降,導(dǎo)致更多細(xì)胞阻滯在G2/M期和S期。
[Abstract]:Objective to investigate the methionine sulfoxide reductase B1 (methionine sulfoxide reductase B1, MsrB1) gene silencing on peroxynitrite (ONOO-) in human lens epithelial cells induced by (human lens epithelial cells, HLEC) on cell cycle and ERK signaling pathway in the regulation of the. Methods the cultured HLEC were divided into two groups: normal group and MsrB1 gene silencing group. They were treated with 0 mol mol L-1, 100 L-1 mol L-1, 200 mol mol L-1 and 300 mol mol L-1 ONOO- 20, respectively. The expression level of MsrB1 gene was detected by RT-PCR method. The cell cycle level was detected by flow cytometry. The effects of MsrB1 gene silencing and ONOO- on pERK expression level were detected by Western blot. Results the expression level of MsrB1 was significantly decreased when treated with 300 HLEC mol L-1 ONOO- (P0.01). When MsrB1 gene silenced cells were treated with 300 mol mol L-1ONOO-, the expression level of MsrB1 was further down regulated (P0.05). After 200, mol, L-1 or 300 mol mol L-1 ONOO- treatment, HLEC cell cycle was blocked at G2/M stage and S stage respectively. When MsrB1 gene silenced cells were treated with 200 mol mol or HLEC or HLEC, more cells were arrested in the "phase" or "phase". The results of pERK detection showed that the cell cycle arrest caused by ONOO- treatment before and after the MsrB1 gene silencing was significantly related to the decrease of pERK expression level (P0.01). Conclusion ONOO- can down regulate the expression level of HLEC MsrB1. MsrB1 gene silencing cells after ONOO- treatment, pERK expression level decreased significantly, resulting in more cell arrest in G2/M and S phase.
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)生物與工程學(xué)院;
【基金】：貴州省科學(xué)技術(shù)基金資助(編號(hào):黔科合J-2014-2028) 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院博士啟動(dòng)基金(編號(hào):YJ2014-8)~~
【分類號(hào)】：R776.1
【正文快照】： 白內(nèi)障已經(jīng)成為大多數(shù)國(guó)家致盲和視力殘疾的主要因素,而且也是我國(guó)老年人群致盲的首要原因[1-4]。研究表明,過氧亞硝酸根(ONOO-)導(dǎo)致的氧化和硝化應(yīng)激介導(dǎo)了白內(nèi)障的病理過程[5-8]。以前的研究發(fā)現(xiàn),蛋氨酸亞砜還原酶B1(methioninesulfoxide reductase B1,MsrB1)在抵抗人晶狀體

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