本文關(guān)鍵詞：基因重組PACAP 27衍生多肽RP2制備及促角膜上皮細(xì)胞增殖研究　出處：《中國(guó)生物工程雜志》2015年03期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：利用基因工程技術(shù)高效制備具有促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞增殖功能的垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP 27)衍生多肽RP2,在細(xì)胞水平初步研究其生物學(xué)作用,為其用于角膜損傷治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。采用基因重組技術(shù)表達(dá)重組肽RP2,經(jīng)Chitin-Beads和HPLC純化、SDS-PAGE和質(zhì)譜鑒定后,研究其對(duì)小鼠角膜上皮細(xì)胞增殖的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:利用基因重組技術(shù)制備的PACAP 27衍生多肽RP2的分子量為3.3 k Da,純度達(dá)96%;分別用重組肽RP2、PACAP 27及PBS作用于小鼠角膜上皮細(xì)胞,處理24 h及48 h時(shí),RP2處理組角膜上皮細(xì)胞增殖率分別為(49.6±3.1)%、(93.0±1.7)%,PACAP 27處理組細(xì)胞增殖率分別為(29.0±2.4)%、(78.8±2.6)%,PBS對(duì)照組細(xì)胞增殖率為(20.2±1.1)%,(40.9±3.3)%。利用建立的重組多肽制備技術(shù)條件,可實(shí)現(xiàn)PACAP衍生多肽RP2高效制備,制備的RP2可有效促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞的增殖,從而有望成為一種新型角膜損傷治療候選藥物。
【作者單位】： 暨南大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)系;暨南大學(xué)生物醫(yī)藥研究院
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81373314) 廣東省自然科學(xué)基金(S2012010008756) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(20124401120012) 廣東省高等學(xué)�？萍紕�(chuàng)新項(xiàng)目(2012KJCX0015) 廣東省教育部產(chǎn)學(xué)研結(jié)合項(xiàng)目(2010B090400544,2013B090500105) 廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011J4300112)資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】：R772.2
【正文快照】： 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(pituitary adenylatecyclase activating polypeptide,PACAP)是促胰液素/胰高血糖素/血管活性肽(VIP)家族中的一員,具有的較強(qiáng)的AC(腺苷酸環(huán)化酶)激活活性。主要以PACAP 38及PACAP 27(PACAP 38氨基末端1~27位aa序列)兩種形式存在,并被證實(shí)來源于一個(gè)共

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1330593