視網(wǎng)膜下腔移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對光損傷視網(wǎng)膜保護(hù)作用的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-12-10 19:12
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【摘要】:目的:研究視網(wǎng)膜光損傷動物模型中,視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)的變化以及視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的情況;移植GFP-BMSCs至視網(wǎng)膜光損傷大鼠的視網(wǎng)膜下腔,觀察移植的細(xì)胞對視網(wǎng)膜的作用。 方法: 1.視網(wǎng)膜光損傷大鼠造模:長時(shí)間循環(huán)光照SD大鼠制成視網(wǎng)膜光損傷模型,于光照后第3d、7d、10d、14d摘除眼球,行HE染色觀察視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)的變化及TUNEL檢測視網(wǎng)膜細(xì)胞的凋亡情況。 2. GFP-BMSCs視網(wǎng)膜下腔移植:將GFP-BMSCs移植入視網(wǎng)膜光損傷大鼠的視網(wǎng)膜下腔,移植7d后,,采用HE染色、TUNEL檢測、免疫熒光、realtime-PCR觀察正常對照組、光損傷造模組、BMSCs注射組、DMEM注射組的視網(wǎng)膜外核層厚度、視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡數(shù)以及神經(jīng)營養(yǎng)因子(bFGF、BDNF)的表達(dá)情況;采用免疫熒光、realtime-PCR觀察BMSCs注射組移植后的第1d、3d、7d、14d、21d,移植細(xì)胞遷移現(xiàn)象以及bFGF、BDNF的表達(dá)情況。 結(jié)果: 1.HE染色觀察到視網(wǎng)膜外核層的厚度隨著光照時(shí)間的增加而變。籘UNEL顯示視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡數(shù)隨著光照時(shí)間的延長而增加。 2. GFP-BMSCs移植后可阻止視網(wǎng)膜外核層厚度變。≒0.05),還使視網(wǎng)膜細(xì)胞的凋亡數(shù)減少(P0.05);免疫熒光顯示四組表達(dá)神經(jīng)營養(yǎng)因子的定位不盡相同,免疫熒光、RT-PCR檢測分別顯示移植后bFGF、BDNF的表達(dá)量及其mRNA的表達(dá)量均增多(P0.05)。免疫熒光、RT-PCR檢測顯示移植后的21d內(nèi)bFGF、BDNF及其mRNA的表達(dá)量均呈現(xiàn)先增高后降低的表現(xiàn),但表達(dá)高峰的時(shí)間點(diǎn)不同;視網(wǎng)膜下腔移植的GFP-BMSCs可以向視網(wǎng)膜內(nèi)層組織遷移。 結(jié)論:視網(wǎng)膜下腔移植GFP-BMSCs具有對光損傷視網(wǎng)膜的神經(jīng)保護(hù)作用,其機(jī)制可能是移植后的BMSCs分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子,以及促進(jìn)視網(wǎng)膜細(xì)胞分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子,從而促進(jìn)光損傷視網(wǎng)膜的修復(fù)。
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R774.1
本文編號:1275565
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