本文關鍵詞：晚期糖基化終產物對C57小鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細胞凋亡及其受體表達的影響

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【摘要】：目的： 研究晚期糖基化終產物(AGEs)對體外培養(yǎng)的小鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細胞（SGCs）凋亡及其受體（RAGE）表達的影響，探討AGEs誘導SGCs凋亡的可能作用途徑，分析老年性聾神經(jīng)型的可能致病機制。 方法： 取出生后3～5天C57BL/6J新生小鼠，利用切割分離+酶消化法分離出SGCs，并進行體外培養(yǎng)。將培養(yǎng)4天的SGCs用4％多聚甲醛室溫固定30min，以小鼠源神經(jīng)微絲蛋白抗體（NF-L+H）為一抗，按照免疫熒光法對所培養(yǎng)細胞進行免疫細胞熒光染色，對SGCs作出鑒定。以RAGE抗體為一抗，按照免疫熒光法及免疫組化法，對SGCs上的RAGE進行鑒定。將培養(yǎng)第4天的細胞加入不同濃度的AGEs，，作用不同的時間，運用原位末端轉移酶標記技術法（TUNEL法），在熒光顯微鏡下觀察不同濃度、不同時間AGEs對培養(yǎng)的SGCs凋亡的影響。并采用采用實時熒光定量逆轉錄PCR（Real time RT-PCR）方法檢測不同濃度、不同時間AGEs作用培養(yǎng)的SGCs后RAGE的mRNA的表達。 結果： SGCs原代培養(yǎng)獲得成功，經(jīng)神經(jīng)微絲蛋白抗體(NF-H)抗體免疫熒光法染色，其胞質及突起均呈陽性反應，染成綠色熒光。SGCs經(jīng)RAGE抗體免疫細胞熒光法及免疫組織化學染色，其胞質及突起均呈陽性反應，分別染成綠色熒光及棕色表現(xiàn)。AGEs加入體外培養(yǎng)的SGCs中，可明顯誘導SGCs凋亡，凋亡率與劑量、時間呈正相關。在發(fā)生凋亡的同時有RAGE mRNA表達的增強。 結論： 新生小鼠SGCs上即存在著RAGE，AGEs對SGCs有誘導凋亡的作用，該作用可能通過RAGE介導。AGEs促使SGCs凋亡可能是老年性聾神經(jīng)型的發(fā)病機制之一。
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R764.431

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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本文編號：1274206