本文關(guān)鍵詞：Notch基因胞內(nèi)活化部分真核表達(dá)載體p3XFLAG-CMV7-NICD1的構(gòu)建與鑒定

  更多相關(guān)文章： Notch信號(hào)通路 NICD 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 后囊膜混濁

【摘要】：目的構(gòu)建Notch1基因胞內(nèi)活化部分真核表達(dá)載體p3XFLAG-CMV7-NICD1,為進(jìn)一步研究和解析Notch1基因在促進(jìn)人晶狀體上皮細(xì)胞間質(zhì)化過程的作用做準(zhǔn)備。方法從SRA01/04細(xì)胞中提取總RNA,RT-PCR法反轉(zhuǎn)錄合成c DNA。特異擴(kuò)增目的基因片段NICD1,與p3XFLAG-CMV7載體連接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,LB平板培養(yǎng)基篩選菌落,抽提質(zhì)粒。并用酶切,測序,轉(zhuǎn)染細(xì)胞后檢測蛋白表達(dá)等方法驗(yàn)證。結(jié)果獲得重組的p3XFLAG-CMV7-NICD1真核表達(dá)載體質(zhì)粒,經(jīng)雙酶切及測序檢測,NICD1基因插入載體部位正確,堿基序列正確。Western blot結(jié)果顯示,在轉(zhuǎn)染p3XFLAG-CMV7-NICD1的細(xì)胞中有NICD1蛋白的表達(dá)。結(jié)論 p3XFLAG-CMV7-NICD1真核表達(dá)載體質(zhì)粒構(gòu)建成功,為進(jìn)一步研究Notch1傳導(dǎo)通路與白內(nèi)障摘除術(shù)后發(fā)生后囊膜混濁的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院眼科;沈陽市第四人民醫(yī)院眼科;
【分類號(hào)】：R776.1
【正文快照】： 晶體后囊膜混濁(posterior capsular opacifica-tion,PCO)是白內(nèi)障摘除術(shù)后最常見的并發(fā)癥,常常導(dǎo)致術(shù)后視力下降。前囊膜上殘留的細(xì)胞遷移到后囊膜并進(jìn)行上皮細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是后囊膜混濁發(fā)生的關(guān)鍵。有研究表明Notch信號(hào)傳導(dǎo)通路且

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3 ;[J];;年期

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2 董瀟;Dll4/Notch信號(hào)通路在脈絡(luò)膜新生血管生成中的作用機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

3 秦秀虹;Notch信號(hào)途徑對(duì)高糖條件下NF-κB和PARP介導(dǎo)的視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：1228534