FSTL1對(duì)鼻咽癌患者樹(shù)突狀細(xì)胞免疫功能影響的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-11-18 08:18
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【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)旨在研究卵泡抑素樣蛋白1(FSTL1)對(duì)鼻咽癌患者成熟樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)的刺激作用,探討FSTL1對(duì)鼻咽癌患者DC免疫功能的影響,探索FSTL1作為腫瘤免疫治療藥物的潛能。 方法:分別收集17例鼻咽癌患者和10例健康志愿者外周血25ml,分離出單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),貼壁法分離單核細(xì)胞與淋巴細(xì)胞。通過(guò)流式細(xì)胞儀篩選出8例NPC患者和6例健康志愿者HLA-A2+的單核細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng),其淋巴細(xì)胞凍存?zhèn)溆。單核?xì)胞經(jīng)rhGM-CSF(1000U/ml)、rhIL-4(500U/ml)和rhTNF-α(1000U/ml)誘導(dǎo)為成熟的DC,并于第3天和第8天檢測(cè)表型CD40、CD86、HLA-DR。收集成熟的DC分成兩組:第一組不做任何處理,即DC組;第二組加入FSTL1刺激,即DC+FSTL1組。兩組DC呈遞抗原肽FLY,與復(fù)蘇的自體淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng),第15天收集細(xì)胞,分別通過(guò)Elispot和Tetramer檢測(cè)DC呈遞抗原刺激產(chǎn)生的特異性淋巴細(xì)胞數(shù)。 結(jié)果: 1、成功誘導(dǎo)出成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞,其形態(tài)不規(guī)則,有許多長(zhǎng)短不一的突起,呈樹(shù)突狀。 2、Elispot結(jié)果: ①鼻咽癌患者組: DC組和DC+FSTL1組分泌IFN-γ的特異性淋巴細(xì)胞數(shù)(即斑點(diǎn)數(shù))中位數(shù)分別為40.00(11.00-93.00)、51.00(31.00-118.00),,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);②正常對(duì)照組:DC組和DC+FSTL1組分泌IFN-γ的特異性淋巴細(xì)胞數(shù)中位數(shù)分別為59.50(34.33-88.67)、72.00(41.00-104.00),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);③鼻咽癌患者和正常對(duì)照的DC+FSTL1組相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3、Tetramer結(jié)果: ①鼻咽癌患者組: DC組和DC+FSTL1組的特異性淋巴細(xì)胞數(shù)(%)中位數(shù)分別為0.86(0.15-2.09)、1.38(0.41-3.82),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);②正常對(duì)照組: DC組和DC+FSTL1組的特異性淋巴細(xì)胞數(shù)(%)中位數(shù)分別為1.75(0.13-2.60)、2.63(0.23-3.75),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);③鼻咽癌患者和正常對(duì)照的DC+FSTL1組相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論:FSTL1可以提高鼻咽癌患者樹(shù)突狀細(xì)胞的免疫功能。
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R739.63
【參考文獻(xiàn)】
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1 肖雪;分泌蛋白FSTL1在鼻咽癌中的抑瘤作用及其機(jī)制的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年
本文編號(hào):1199125
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