本文關(guān)鍵詞：腺病毒介導(dǎo)的slit2 shRNA轉(zhuǎn)染缺氧誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞對(duì)VEGF表達(dá)的影響

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【摘要】：目的： 觀察腺病毒介導(dǎo)的slit2shRNA轉(zhuǎn)染缺氧誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（retinal pigment epithelial cells RPE）對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascularendothelial growth factor VEGF）表達(dá)的影響，探討slit2在脈絡(luò)膜新生血管中的可能作用，為脈絡(luò)膜新生血管（CNV）的治療提供新的思路。 方法： 1.體外培養(yǎng)人RPE細(xì)胞，RT-PCR、免疫組化鑒定slit2及其受體在人RPE上的表達(dá)； 2.200μmol/L氯化鈷建立化學(xué)缺氧模型，未缺氧細(xì)胞作為空白對(duì)照組，Real-TimePCR，western-blot觀察slit2及受體、VEGF在缺氧狀態(tài)下的表達(dá)變化； 3.將缺氧的RPE細(xì)胞隨機(jī)分為Ad-shRNA（加入slit2shRNA），Ad-nμll（加入空腺病毒）、缺氧組。24h后收取細(xì)胞，Real-TimePCR、western-blot分別檢測(cè)各組slit2及其受體、VEGF的mRNA和蛋白水平表達(dá)變化，ELISA檢測(cè)上清中VEGF蛋白的表達(dá)變化。 結(jié)果： 1.在正常人RPE細(xì)胞，即有slit2及其受體Robo1、Robo4的表達(dá)； 2.與空白對(duì)照組相比，，缺氧組中slit2及其受體Robo1、VEGF的mRNA和蛋白水平的表達(dá)均明顯增加(P0.05)；但受體R obo4無(wú)明顯變化； 3.與缺氧組相比，slit2shRNA轉(zhuǎn)染后Ad-shRNA處理組的slit2、Robo1、VEGF的mRNA和蛋白水平表達(dá)均降低（P0.05）； 4.缺氧組與Ad-nμll組之間slit2、Robo1、VEGF的變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05）； 結(jié)論： 研究表明slit2-Robo1信號(hào)通路參與了CNV的形成過(guò)程， slit2shRNA沉默RPE中slit2后，可明顯抑制缺氧誘導(dǎo)的RPE中VEGF的表達(dá)，為臨床CNV的治療提供新的方向。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R774.1

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 陳軍;于東風(fēng);劉弋;楊錦雷;;Slit2/Robo1蛋白在直腸癌中的表達(dá)及與微血管密度的關(guān)系[J];安徽醫(yī)藥;2011年06期

2 季銳;盧雪峰;付金棟;姜旭生;雒燕;楊淑萍;;Slit2和Robo1蛋白表達(dá)與胃癌關(guān)系的臨床研究[J];中國(guó)現(xiàn)代普通外科進(jìn)展;2008年02期

本文編號(hào)：1196083