本文關(guān)鍵詞：去整合素Echistatin對(duì)人晶狀體上皮細(xì)胞增殖、黏附、移行的影響

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【摘要】：背景：隨著白內(nèi)障手術(shù)的日益開(kāi)展,后發(fā)性白內(nèi)障(posterior capsular opacification, PCO)的發(fā)生率逐漸增加,繼而引起了廣大醫(yī)學(xué)界的不斷重視,已有研究證明去整合素類藥物對(duì)PCO有抑制作用,Echistatin (Ecs)為去整合素家族的一員。 目的：研究不同濃度的去整合素Echistatin (Ecs)對(duì)體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞株SRA01/04增殖、黏附及移行的抑制作用,為活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)摸索濃度條件,進(jìn)一步為臨床藥物治療PC0提供依據(jù)。 方法：實(shí)驗(yàn)分為三部分：(1)檢測(cè)Echistatin對(duì)SRA01/04細(xì)胞增殖的影響：將消化收集的懸浮細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板培養(yǎng),細(xì)胞濃度為1×104個(gè)/孔,12h后棄原培養(yǎng)液,換無(wú)血清DMEM/F12培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)24h,使細(xì)胞同步化。棄舊培養(yǎng)液,加入不同濃度(0、2.5、5、7.5、10、15、0mg/L)的Echistatin,37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)24、48、72h后,MTT法測(cè)定各孔吸光度值(A490)。(2)檢測(cè)Echistatin對(duì)SRA01/04細(xì)胞黏附的影響：將消化收集的懸浮細(xì)胞接種于涂有鼠尾膠原的96孔培養(yǎng)板培養(yǎng),細(xì)胞濃度為2.5×104個(gè)/孔,同時(shí)加入不同濃度(0、2.5、5、7.5、10、15、20mg/L)的Echistatin,37℃、5%CO2條件下共同培養(yǎng)90min后,用PBS清洗各孔兩次,棄去未貼壁細(xì)胞,MTT法測(cè)定各孔吸光度值。(3)檢測(cè)Echistatin對(duì)SRA01/04細(xì)胞移行的影響：將懸浮細(xì)胞接種于涂有鼠尾膠原的24孔培養(yǎng)板培養(yǎng),細(xì)胞濃度為5×105個(gè)/孔,37℃、5%CO2箱培養(yǎng)。在細(xì)胞增殖達(dá)95%融合度時(shí)。用1000μ1移液器滴頭劃痕,PBS洗3次,各實(shí)驗(yàn)組分別加入不同濃度(0、2.5、5、7.5、10、15、20mg/L)Echistatin,繼續(xù)培養(yǎng)24、48h后在倒置顯微鏡鏡下記錄劃痕寬度的變化。 結(jié)果： 1.不同濃度去整合素Ecs(2.5、5、7.5、10、15、20mg/L)作用24、48、72h后對(duì)細(xì)胞株SRA01/04的增殖抑制率分別為2.6%、15.4%、21.2%、34.7%、46.1%、58.2%；6.6%、21.9%、38.2%、50.0%、60.7%、76.9%及9.8%、29.0%、46.6%、63.4%、69.1%、92.4%,除2.5mg/L組外,各濃度組吸光度值與0mg/L組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01),且隨Ecs作用時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞的吸光度值逐漸下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。 2.Ecs對(duì)各濃度組細(xì)胞株SRAOI/04的黏附抑制率分別為2.6%、15.0%、26.1%、35.3%、45.2%、54.5%,除2.5mg／L組外,各濃度組吸光度值與0mg/L組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。 3.Ecs作用24、48h后各濃度組細(xì)胞株SRA01/04的移行距離與0mg/L組相比不同程度縮短,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01),且隨Ecs作用時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞移行距離縮短,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。 結(jié)論： 1.Ecs可抑制LECs的增殖、黏附和移行,Ecs對(duì)PCO的防治可能起到積極作用。 2.為進(jìn)一步的活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)摸索濃度條件,并為臨床上藥物治療PCO提供依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R776.1

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 王莉,李鵬;Nd∶YAG激光治療后發(fā)性白內(nèi)障的臨床觀察[J];國(guó)際眼科雜志;2005年04期

2 范志宏,何征宇,馬進(jìn);整合素和TGF-β受體在增生性瘢痕成纖維細(xì)胞中的表達(dá)研究[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2004年01期

3 張鴻侃;譚少健;梁皓;李霞;陳迎迎;;去整合素kistrin對(duì)人晶狀體上皮細(xì)胞株凋亡的影響[J];眼科新進(jìn)展;2009年09期

4 胡鳳婷;譚少健;梁皓;何劍峰;李霞;黃敏麗;陳金卯;陳迎迎;;去整合素kistrin對(duì)兔晶狀體上皮細(xì)胞凋亡及連接蛋白43表達(dá)的影響[J];眼科新進(jìn)展;2010年03期

5 范鵬舉;李珍;黃曉元;;Echistatin對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的作用研究[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)工程;2007年06期

6 于游,賀光照,吳一,黃崇本;整合素α_5β_1在病理性瘢痕中的表達(dá)及意義[J];中華整形外科雜志;2004年04期

7 陳迎迎;梁皓;李霞;譚少健;姬翔;;去整合素Kistrin對(duì)兔眼LECs增殖的抑制[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2011年06期

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本文編號(hào)：1148349