129Sv小鼠實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性鼻炎模型的構(gòu)建及H2-Eb1基因在變應(yīng)性鼻炎小鼠鼻黏膜中表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究
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【摘要】:目的:(1)構(gòu)建129Sv小鼠的實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性鼻炎模型;(2)利用129Sv小鼠變應(yīng)性鼻炎模型研究H2-Eb1基因(人類HLA-DRB1基因的同源基因)在變應(yīng)性鼻炎小鼠鼻黏膜中的表達(dá)并與正常小鼠比較。方法:(1)選取8周雌性129/sv小鼠36只隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組、對照組,每組18只。采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)致敏激發(fā),建立小鼠變應(yīng)性鼻炎模型,最后一次激發(fā)后取鼻腔黏膜固定后染色評估小鼠鼻黏膜嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞浸潤等病理學(xué)變化,酶聯(lián)免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)檢測小鼠血清白細(xì)胞介素4(interleukin, IL-4)和IFN-y細(xì)胞因子水平和OVA特異性IgE抗體濃度評估造模后小鼠相關(guān)血清中生化因子變化;(2)以免疫組化(immunohistochemistry)、免疫熒光(immunofluorescence technic)及蛋白印跡(Western Blot)法檢測小鼠鼻黏膜H2-EB1蛋白表達(dá)情況,提取鼻黏膜中RNA行實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative Real Time PCR)檢測H2-Eb1mRNA表達(dá)情況。結(jié)果:(1)構(gòu)建129Sv實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性鼻炎小鼠模型后,與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組鼻腔黏膜纖毛層部分脫落,黏膜下可見嗜酸性粒細(xì)胞及肥大細(xì)胞浸潤,血清中OVA-SIgE、IL-4濃度顯著增高,IFN-y濃度降低(均P0.05);(2)鼻黏膜組織H2-Eb1mRNA、H2-EB1蛋白表達(dá)水平較對照組均增高。結(jié)論:(1)成功構(gòu)建出穩(wěn)定的129Sv小鼠實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性鼻炎模型,小鼠體內(nèi)出現(xiàn)Th1/Th2細(xì)胞因子失衡;(2)H2-Eb1mRNA及H2-EB1蛋白在變應(yīng)性疾病中表達(dá)增高,提示HLA-DRB1基因在變應(yīng)性鼻炎發(fā)病機(jī)制中的Th1/Th2失衡可能起到重要的調(diào)節(jié)作用。
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R765.21
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,本文編號:1145153
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