發(fā)布時間：2017-11-03 20:40

  本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)RNA干擾抑制CCR3基因表達對小鼠嗜酸性細胞增殖及凋亡的影響

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【摘要】：目的： 運用慢病毒介導(dǎo)RNA干擾抑制CCR3基因在嗜酸性細胞上的表達，觀察其對小鼠嗜酸性細胞增殖和凋亡的影響，為下一步基因治療變應(yīng)性鼻炎體內(nèi)實驗奠定基礎(chǔ)。 方法： 體外分離、原代培養(yǎng)小鼠嗜酸性細胞并轉(zhuǎn)導(dǎo)shRNA-mCCR3慢病毒顆粒，據(jù)預(yù)試驗最優(yōu)轉(zhuǎn)導(dǎo)條件感染嗜酸性細胞，48h后收集細胞進行實驗。采用QPCR和Western blot法檢測轉(zhuǎn)導(dǎo)前后嗜酸性細胞中CCR3mRNA和蛋白表達的變化。采用MTS法和TUNEL法檢測靶向干擾CCR3基因?qū)κ人嵝约毎鲋澈偷蛲龅挠绊憽?結(jié)果： （1）QPCR和Western blot結(jié)果表明，，與空白對照組和陰性對照組相比，感染shRNA-mCCR3慢病毒顆粒的嗜酸性細胞在mRNA水平和蛋白水平CCR3的表達降低，差異都有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 （2）MTS和TUNEL實驗結(jié)果表明，與空白對照組和陰性對照組相比，感染shRNA-mCCR3慢病毒顆粒的嗜酸性細胞增值率下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)，細胞凋亡率增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： （1）成功構(gòu)建了小鼠CCR3基因RNAi慢病毒載體。 （2）RNAi靶向沉默CCR3基因?qū)κ人嵝约毎哂猩L抑制作用并能誘導(dǎo)其凋亡。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R765.21

【參考文獻】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 廖兵;小鼠嗜酸性細胞CCR3基因RNA干擾慢病毒載體的構(gòu)建及鑒定[D];南昌大學(xué);2012年

本文編號：1137828