1,25二羥維生素D3對(duì)穿透性角膜移植小鼠T淋巴細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究
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更多相關(guān)文章: 1 25二羥維生素D3 T淋巴細(xì)胞 穿透性角膜移植
【摘要】:目的 本研究旨在探討1,25二羥維生素D3對(duì)穿透性角膜移植聯(lián)合皮膚移植模型小鼠免疫排斥反應(yīng)的影響,進(jìn)一步探討1,25二羥維生素D3對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)T淋巴細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用。 方法 實(shí)驗(yàn)以C57BL/6小鼠為受體,以Balb/c小鼠為供體,按照完全隨機(jī)分組設(shè)計(jì)將實(shí)驗(yàn)分成對(duì)照組、移植組和干預(yù)組。建立小鼠穿透性角膜移植聯(lián)合皮膚移植的動(dòng)物模型,干預(yù)組小鼠隔日腹腔注射溶解于1,25二羥維生素D3的花生油,,劑量為10ng,移植組和對(duì)照組小鼠隔日腹腔注射同等劑量的生理鹽水。手術(shù)后每天在裂隙燈下觀察角膜植片的情況,肉眼下觀察皮膚植片的情況。 在移植術(shù)后的第13天,取三組小鼠外周血,行流式檢測(cè)外周血中γδT淋巴細(xì)胞和CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞的差異性,探討1,25二羥維生素D3對(duì)這兩種細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用。 移植術(shù)后第13天,稱重后處死三組小鼠,然后取三組小鼠的脾臟,稱重后計(jì)算脾臟/體重百分比,然后用淋巴細(xì)胞分離液獲取脾臟淋巴細(xì)胞,采用Trizol法提取淋巴細(xì)胞總RNA后進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄過程,然后進(jìn)行熒光定量聚合酶鏈反應(yīng),觀察三組小鼠脾臟淋巴細(xì)胞中Th1相關(guān)的細(xì)胞因子IFN-γmRNA和IL-2mRNA,Th2相關(guān)的IL-10mRNA,Th17相關(guān)的IL-17AmRNA的表達(dá)的差異性,推斷1,25二羥維生素D3對(duì)各種細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來表示,應(yīng)用SPSS19.0進(jìn)行方差分析,P>0.05認(rèn)為差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05則認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 1,25二羥維生素D3干預(yù)組小鼠的角膜植片和皮膚植片的生存時(shí)間較移植組要長(zhǎng),移植物小鼠的外周血中γδT細(xì)胞的比例明顯高于對(duì)照組和干預(yù)組,干預(yù)組小鼠γδT細(xì)胞的比例高于對(duì)照組,1,25二羥維生素D3對(duì)小鼠外周血的γδT細(xì)胞具有一定的下調(diào)作用,移植組小鼠外周血中CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞明顯低于對(duì)照組和干預(yù)組,干預(yù)組小鼠外周血中CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的比例高于對(duì)照組,1,25二羥維生素D3對(duì)CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞具有一定的上調(diào)的作用。就脾臟淋巴細(xì)胞而言,移植組Th1相關(guān)的IFN-γmRNA和IL-2mRNA的表達(dá)高于對(duì)照組和干預(yù)組,干預(yù)組高于對(duì)照組,移植組Th17相關(guān)的IL-17AmRNA的表達(dá)高于對(duì)照組和干預(yù)組,干預(yù)組高于對(duì)照組,干預(yù)組Th2相關(guān)的IL-10mRNA的表達(dá)高于移植組和對(duì)照組,干預(yù)組高于移植組,三組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。1,25二羥維生素D3可以下調(diào)脾臟淋巴細(xì)胞中Th1相關(guān)的IFN-γmRNA和IL-2mRNA的表達(dá),下調(diào)Th17相關(guān)的IL-17AmRNA的表達(dá),上調(diào)Th2相關(guān)的IL-10mRNA的表達(dá)。 結(jié)論 這些結(jié)果說明1,25二羥維生素D3可能對(duì)小鼠同種異體角膜移植的免疫排斥反應(yīng)具有抑制作用,通過上調(diào)對(duì)免疫排斥反應(yīng)具有抑制作用的CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的數(shù)量,下調(diào)對(duì)免疫排斥反應(yīng)具有促進(jìn)作用的γδT細(xì)胞的比例。1,25二羥維生素D3對(duì)促進(jìn)炎癥反應(yīng)相關(guān)的細(xì)胞因子IFN-γmRNA、IL-2mRNA和IL-17AmRNA的表達(dá)具有抑制作用,1,25二羥維生素D3對(duì)抑制炎癥反應(yīng)相關(guān)的細(xì)胞因子IL-10mRNA的表達(dá)具有上調(diào)作用。
【學(xué)位授予單位】:暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R779.65
【相似文獻(xiàn)】
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2 李東豪;陳林;聞毅
本文編號(hào):1136718
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