本文關鍵詞：鼻咽癌中STGC3相關蛋白質ANXA3與NNMT的表達及意義

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【摘要】：目的：課題組前期采用蛋白質組學技術，從敲低STGC3基因表達的人鼻咽永生化上皮細胞NP69，篩選鑒定出83個差異表達蛋白質分子，本研究從中挑選高表達蛋白質膜粘蛋白3(annexin A3ANXA3)及低表達蛋白質尼克酰胺轉移酶(nicotinamide N-methyltransferase NNMT)，進行實驗驗證，并分析ANXA3和NNMT蛋白質在鼻咽癌細胞及組織中表達的意義，探討ANXA3和NNMT表達與STGC3基因的關系，為闡明STGC3基因在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展中的作用提供實驗依據。 方法：采用RT-PCR和Western-blot技術，，檢測ANXA3和NNMT在敲低STGC3表達的NP69細胞系、鼻咽癌CNE1和CNE2細胞系及鼻咽癌組織中的表達；免疫組織化學染色，檢測ANXA3和NNMT在鼻咽癌組織中的表達，分析ANXA3和NNMT表達與STGC3的關系及意義。 結果： RT-PCR結果顯示：在STGC3低表達的NP69細胞（PRNAT-U6/shRNA-STGC3-NP69）、鼻咽癌CNE1及CNE2細胞、鼻咽癌組織均存在ANXA3基因mRNA表達水平增高，分別與細胞對照組(NP69細胞)和組織對照組（非鼻咽癌組織）比較，差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)；而NNMT基因的表達降低，與對照組間差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)；灰度掃描，計算相對表達量，ANXA3基因：NP69細胞0.366±0.036、STGC3低表達NP69細胞0.727±0.031、CNE1細胞0.737±0.051、CNE2細胞0.754±0.031、非鼻咽癌組0.358±0.015、鼻咽癌組0.667±0.031；NNMT基因：NP69細胞0.670±0.022、STGC3低表達NP69細胞0.362±0.055、CNE1細胞0.335±0.026、CNE2細胞0.375±0.042、非鼻咽癌組0.783±0.090、鼻咽癌組0.329±0.054。 Western-blot結果與RT-PCR檢測結果一致：低表達STGC3的NP69細胞、鼻咽癌CNE1及CNE2細胞、鼻咽癌組織均存在ANXA3蛋白表達高表達，與對照組間差異具有顯著意義(P0.05)；而各實驗組均顯示NNMT蛋白表達降低，與對照組比較差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；經灰度掃描，計算相對表達量，ANXA3蛋白：NP69細胞0.530±0.050、STGC3低表達NP69細胞0.916±0.025、CNE1細胞0.856±0.038、CNE2細胞0.928±0.043、非鼻咽癌組織0.560±0.006、鼻咽癌組織0.933±0.031，NNMT蛋白：NP69細胞0.994±0.049、STGC3低表達NP69細胞0.696±0.030、CNE1細胞0.759±0.027、CNE2細胞0.742±0.024、非鼻咽癌組織0.868±0.041、和鼻咽癌組織0.582±0.093。 免疫組織化學染色結果顯示：ANXA3蛋白表達定位于細胞漿和細胞膜，NNMT蛋白表達定位于細胞漿和細胞核，以細胞漿為主，鼻咽癌組織和對照組非鼻咽癌組織的陽性表達率分別為：ANXA3蛋白83.3%(鼻咽癌10/12)和23.1%(對照組3/13)，NNMT蛋白41.6%(鼻咽癌5/12)和84.6%(對照組11/13)；鼻咽癌組織中ANXA3蛋白陽性表達率高于組，而NNMT蛋白的陽性表達率則低于對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論： 1. ANXA3在敲低STGC3低表達的人鼻咽上皮NP69細胞中表達增高，而NNMT表達降低。 2.鼻咽癌細胞CNE1， CNE2和組織中ANXA3表達增高，而NNMT表達降低。
【關鍵詞】：鼻咽癌 STGC3 NP69 ANXA3 NNMT
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R739.63
【目錄】：

• 主要英文縮寫一覽表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 技術路線12-13
• 材料與方法13-20
• 結果20-28
• 討論28-31
• 結論31-32
• 參考文獻32-38
• 綜述38-46
• 參考文獻43-46
• 附錄一46-48
• 致謝48

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