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替普瑞酮對(duì)大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷的保護(hù)作用

發(fā)布時(shí)間:2017-10-15 03:02

  本文關(guān)鍵詞:替普瑞酮對(duì)大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷的保護(hù)作用


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【摘要】:目的:通過(guò)玻璃體腔注射NMDA制作大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型,觀察替普瑞酮對(duì)視網(wǎng)膜HSP70表達(dá)的影響,并觀察其對(duì)興奮性損傷視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞有無(wú)保護(hù)作用。 方法:Wistar大鼠50只按隨機(jī)原則分為4組,包括正常組(5只)、空白對(duì)照組(15只)和實(shí)驗(yàn)組(替普瑞酮腹腔注射組,30只),實(shí)驗(yàn)組按照注射藥量不同分為低劑量組(15只)和高劑量組(15只)。正常組大鼠不做任何處理,實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射替普瑞酮(200mg/Kg.800mg/Kg),空白對(duì)照組注射等量溶劑,注射藥物后1h空白對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組大鼠均隨機(jī)取一眼玻璃體腔注射2μl80mmol/1NMDA并做好標(biāo)記。并于造模后3h隨機(jī)處死相同數(shù)量的大鼠(各10只),用于檢測(cè)HSP70的表達(dá),24h處死相同數(shù)量的大鼠(各5只),觀察RGCs的變化。同時(shí)正常對(duì)照組在1h時(shí)全部處死。免疫組織化學(xué)染色方法和實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR分析各組視網(wǎng)膜HSP70的表達(dá),甲苯胺藍(lán)染色計(jì)數(shù)各組視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目 結(jié)果:HE染色顯示正常組大鼠視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)完整,細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,染色清晰?瞻讓(duì)照組與低劑量組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目較正常大鼠明顯減少,細(xì)胞排列不規(guī)則,視網(wǎng)膜內(nèi)層萎縮,視網(wǎng)膜整體變薄。高劑量組大鼠視網(wǎng)膜損傷較空白對(duì)照組明顯減輕。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示,在正常組和空白對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜中只有微量的HSP70表達(dá),低劑量組HSP70mRNA表達(dá)量較正常對(duì)照組稍有增加,高劑量組HSP70mRNA表達(dá)量明顯增加。免疫組織化學(xué)染色顯示替普瑞酮能誘導(dǎo)HSP70在整個(gè)視網(wǎng)膜顯著表達(dá),而正常組及空白對(duì)照組只見(jiàn)微量的HSP70棕黃色顆粒沉積于視網(wǎng)膜外層。免疫組織化學(xué)染色工OD值測(cè)定結(jié)果與熒光定量PCR結(jié)果相吻合。甲苯胺藍(lán)染色顯示正常組視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞排列整齊,尼氏體染色清晰,空白對(duì)照組神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目明顯減少,尼氏體減少甚至消失,低劑量組無(wú)明顯改善,高劑量組神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損傷明顯減輕。 結(jié)論:1.成功建立大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型; 2.腹腔注射高劑量替普瑞酮后,可在較短時(shí)間內(nèi)誘導(dǎo)大鼠興奮性損傷視網(wǎng)膜大量表達(dá)HSP70,并發(fā)揮保護(hù)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞免受興奮性損傷的作用。
【關(guān)鍵詞】:替普瑞酮 熱休克蛋白70 N-甲基-D-天門冬氨酸 青光眼
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R775
【目錄】:
  • 摘要2-4
  • Abstract4-7
  • 引言7-9
  • 第一章 材料與方法9-19
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)材料9-11
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)方法11-18
  • 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18-19
  • 第二章 結(jié)果19-22
  • 2.1 HE染色結(jié)果19
  • 2.2 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果19-20
  • 2.3 甲苯胺藍(lán)染色結(jié)果20
  • 2.4 熒光定量PC R結(jié)果20-22
  • 第三章 討論22-28
  • 結(jié)論28-29
  • 參考文獻(xiàn)29-32
  • 綜述32-44
  • 參考文獻(xiàn)40-44
  • 攻讀學(xué)位期間的研究成果44-45
  • 附錄45-51
  • 致謝51-52

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 劉致力;王英蓉;沙倩;聶慶珠;;替普瑞酮對(duì)大鼠慢性高眼壓視網(wǎng)膜HSP70表達(dá)的影響(英文)[J];國(guó)際眼科雜志;2010年03期

2 杜敏;谷氨酸興奮毒性與青光眼[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2004年02期

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 鮑娟;GGA誘導(dǎo)AD大鼠海馬HSP70表達(dá)及其抗細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究[D];中南大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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6 董麗娟;大鼠視網(wǎng)膜興奮損傷中HSP70與TNF-α表達(dá)的相關(guān)性研究[D];青島大學(xué);2012年

7 高小琴;谷氨酰胺在大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷中對(duì)HSP70的誘導(dǎo)表達(dá)[D];青島大學(xué);2012年

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本文編號(hào):1034688

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