本文關鍵詞：替普瑞酮對大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷的保護作用

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【摘要】：目的：通過玻璃體腔注射NMDA制作大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型,觀察替普瑞酮對視網(wǎng)膜HSP70表達的影響,并觀察其對興奮性損傷視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞有無保護作用。 方法：Wistar大鼠50只按隨機原則分為4組,包括正常組(5只)、空白對照組(15只)和實驗組(替普瑞酮腹腔注射組,30只),實驗組按照注射藥量不同分為低劑量組(15只)和高劑量組(15只)。正常組大鼠不做任何處理,實驗組大鼠腹腔注射替普瑞酮(200mg/Kg.800mg/Kg),空白對照組注射等量溶劑,注射藥物后1h空白對照組和實驗組大鼠均隨機取一眼玻璃體腔注射2μl80mmol/1NMDA并做好標記。并于造模后3h隨機處死相同數(shù)量的大鼠(各10只),用于檢測HSP70的表達,24h處死相同數(shù)量的大鼠(各5只),觀察RGCs的變化。同時正常對照組在1h時全部處死。免疫組織化學染色方法和實時熒光定量RT-PCR分析各組視網(wǎng)膜HSP70的表達,甲苯胺藍染色計數(shù)各組視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)目 結果：HE染色顯示正常組大鼠視網(wǎng)膜組織結構完整,細胞形態(tài)規(guī)則,染色清晰�？瞻讓φ战M與低劑量組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)目較正常大鼠明顯減少,細胞排列不規(guī)則,視網(wǎng)膜內(nèi)層萎縮,視網(wǎng)膜整體變薄。高劑量組大鼠視網(wǎng)膜損傷較空白對照組明顯減輕。實時熒光定量RT-PCR結果顯示,在正常組和空白對照組大鼠視網(wǎng)膜中只有微量的HSP70表達,低劑量組HSP70mRNA表達量較正常對照組稍有增加,高劑量組HSP70mRNA表達量明顯增加。免疫組織化學染色顯示替普瑞酮能誘導HSP70在整個視網(wǎng)膜顯著表達,而正常組及空白對照組只見微量的HSP70棕黃色顆粒沉積于視網(wǎng)膜外層。免疫組織化學染色工OD值測定結果與熒光定量PCR結果相吻合。甲苯胺藍染色顯示正常組視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞排列整齊,尼氏體染色清晰,空白對照組神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)目明顯減少,尼氏體減少甚至消失,低劑量組無明顯改善,高劑量組神經(jīng)節(jié)細胞損傷明顯減輕。 結論：1.成功建立大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型； 2.腹腔注射高劑量替普瑞酮后,可在較短時間內(nèi)誘導大鼠興奮性損傷視網(wǎng)膜大量表達HSP70,并發(fā)揮保護神經(jīng)節(jié)細胞免受興奮性損傷的作用。
【關鍵詞】：替普瑞酮 熱休克蛋白70 N-甲基-D-天門冬氨酸 青光眼
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R775
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-7
• 引言7-9
• 第一章 材料與方法9-19
• 1.1 實驗材料9-11
• 1.2 實驗方法11-18
• 1.3 統(tǒng)計學分析18-19
• 第二章 結果19-22
• 2.1 HE染色結果19
• 2.2 免疫組織化學染色結果19-20
• 2.3 甲苯胺藍染色結果20
• 2.4 熒光定量PC R結果20-22
• 第三章 討論22-28
• 結論28-29
• 參考文獻29-32
• 綜述32-44
• 參考文獻40-44
• 攻讀學位期間的研究成果44-45
• 附錄45-51
• 致謝51-52

【參考文獻】

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本文編號：1034688