本文關(guān)鍵詞：不同濃度胎牛血清培養(yǎng)下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)為心肌樣細(xì)胞的比較

  更多相關(guān)文章： 胎牛血清 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 類心肌樣細(xì)胞 5氮雜胞苷 血管緊張素II

【摘要】：目的:研究不同濃度胎牛血清培養(yǎng)下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的一般特性如形態(tài)、核型、增殖動力學(xué)、表型特點(diǎn)和分化成心肌樣細(xì)胞潛能等生物學(xué)性狀,并在低血清濃度下培養(yǎng)誘導(dǎo)后的心肌樣細(xì)胞,并觀察心肌樣細(xì)胞增殖和特異性蛋白的表達(dá)情況。方法:采用全骨髓貼壁的培養(yǎng)方法獲取大鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)。在細(xì)胞傳到第2代時(shí),分為5個(gè)組,加入含有不同濃度胎牛血清(FBS)的L-DMEM培養(yǎng)基,FBS濃度分別為0%,2.5%,5%,7.5%,10%,并以濃度系數(shù)標(biāo)記各組。取第4代BMSCs,利用MTT法在(1、3、5、7、9d)檢測細(xì)胞的增殖。分別取各組傳代到第4代BMCS,加入Ang II和5-Aza(Ang II 0.1μmol/l和5-Aza 10μmol/l)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo),24h后吸棄含有誘導(dǎo)劑的培養(yǎng)液,跟換新培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。取誘導(dǎo)后各組的第1代(y P1)細(xì)胞,使用MTT法檢測類心肌細(xì)胞在(1、3、5、7d)的生長活力,細(xì)胞免疫熒光化學(xué)染色法檢測誘導(dǎo)后培養(yǎng)至第4周時(shí)各組中c Tn I,Cx-43兩類心肌相關(guān)蛋白的表達(dá)情況,并計(jì)算其表達(dá)率。結(jié)果:1.在5種不同濃度FBS下的L-DMEM培養(yǎng)液均可獲得第4代BMSCs;MTT檢測細(xì)胞活力(1、3、5、7、9d)結(jié)果顯示,5組不同體積分?jǐn)?shù)的FBS培養(yǎng)液均可以促進(jìn)BMSCs的生長,10%組2.5%,5%,7.5%組0%組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),2.5%,5%,7.5%組組間比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。2.各組BMSCs在AngⅡ和5-Aza(AngⅡ0.1μmol/L、5-Aza 10μmol/L)聯(lián)合作用誘導(dǎo)時(shí),能分化為類心肌樣細(xì)胞。誘導(dǎo)后的細(xì)胞MTT檢測細(xì)胞活力顯示10%組7.5%5%,2.5%組0%組(p0.05),而5%,2.5%組比較未見明顯差異(p0.05)。各組心肌樣細(xì)胞的蛋白的表達(dá)顯示10%組7.5%5%,2.5%組0%組差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),而5%,2.5%組比較未見明顯差異,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論:胎牛血清的濃度對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的擴(kuò)增有正向作用,胎牛血清的濃度為2.5%時(shí)可以滿足BMSCs的分離和擴(kuò)增,且細(xì)胞活力好,要想在短期內(nèi)較快獲得較純的BMSCs,可以用提高FBS濃度的辦法。BMSCs經(jīng)誘導(dǎo)后的細(xì)胞,胎牛血清濃度對其活力有正向作用,這些細(xì)胞可以產(chǎn)生心肌細(xì)胞所表達(dá)的c Tn I、Cx-43兩組蛋白。
【關(guān)鍵詞】：胎牛血清 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 類心肌樣細(xì)胞 5氮雜胞苷 血管緊張素II
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R54
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用縮寫詞中英文對照表9-10
• 前言10-11
• 1 材料和方法11-17
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物、試劑及儀器11-12
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法12-16
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析16-17
• 2 結(jié)果17-21
• 2.1 不同濃度胎牛血清（FBS）下細(xì)胞生長情況和形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察17
• 2.2 不同濃度FBS培養(yǎng)下的BMCSS的生長曲線17-18
• 2.3 ANGⅡ和 5-AZA誘導(dǎo)后細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征18-19
• 2.4 ANGⅡ和 5-AZA誘導(dǎo)不同濃度FBS培養(yǎng)下的類心肌樣細(xì)胞的生長曲線19-20
• 2.5 細(xì)胞免疫熒光染色誘導(dǎo)后CTNI、CX-43 蛋白表達(dá)情況和組間陽性率比較..1020-21
• 3 討論21-25
• 3.1 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、純化21-22
• 3.2 不同濃度胎牛血清培養(yǎng)下的BMCS的生長曲線22-23
• 3.3 ANGⅡ和 5-AZA誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分化、培養(yǎng)23-24
• 3.4 不同濃度FBS培養(yǎng)下的類心肌樣細(xì)胞的生長情況24
• 3.5 細(xì)胞免疫熒光染色鑒定誘導(dǎo)后細(xì)胞CTNI、CX-43 蛋白的表達(dá)陽性率24-25
• 4 結(jié)論25-26
• 參考文獻(xiàn)26-29
• 綜述29-37
• 參考文獻(xiàn)35-37
• 附錄37-43
• 致謝43-44
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果44-45
• 個(gè)人簡歷45

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 董亮;連鋒;楊文鋼;汪永義;薛松;;丁酸鈉誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化[J];中國組織工程研究;2012年19期

2 苑媛;呂安林;陳丹;刁繁榮;李軍杰;胡小菁;易甫;;血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞[J];心臟雜志;2006年03期

，

本文編號：793956