本文關(guān)鍵詞：冠心病人血清外泌體miRNA表達(dá)譜分析

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【摘要】：目的：外泌體(exosome)是由細(xì)胞分泌的一種囊泡樣物質(zhì),直徑在20-200nm,可通過在細(xì)胞、組織間傳遞蛋白及各種遺傳物質(zhì)參與血管生長(zhǎng)、細(xì)胞增殖、腫瘤細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移、免疫應(yīng)答、抗原提呈等多種生理或病理反應(yīng),研究發(fā)現(xiàn)exosome包含有微小RNA(miRNA),由于exosome所提供的良好保護(hù)性,使得外泌體miRNA (exosomal miRNA)在人體液中有很好的穩(wěn)定性。本研究嘗試分析冠心病患者血清中的exosomal miRNA的表達(dá)情況,試圖找出對(duì)冠心病有診斷意義的miRNA。方法：將入院患者依據(jù)臨床診斷分為急性心梗組(10人)、不穩(wěn)定心絞痛組(10人)、穩(wěn)定性心絞痛(10人),并選擇健康成人(10人)為對(duì)照組,空腹抽取靜脈血(心梗患者發(fā)病12小時(shí)取血)分離出血清,提取exosome,對(duì) exosome進(jìn)行透射電鏡觀察和nanosight進(jìn)行粒徑測(cè)量以確定提取效果,提取exosomal RNA并測(cè)量含量、分子量分布,建立exosomal miRNA的cDNA文庫(kù)并純化,對(duì)cDNA文庫(kù)進(jìn)行鑒定后進(jìn)行高通量測(cè)序,對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果：電鏡下觀察exosome為囊泡狀,大小、分布不均,直徑在30-200nm,其外層為脂質(zhì)包裹,粒徑測(cè)量結(jié)果顯示exosome平均粒徑129 nm,混懸液濃度8.99×108/ml; Agilent2100測(cè)量各樣品exosomal RNA在20到30nt處有較高分布,測(cè)量純化后的cDNA峰值在146bp左右,符合miRNA測(cè)序要求。測(cè)序結(jié)果由信息生物學(xué)分析顯示,41個(gè)miRNA文庫(kù),與已知miRNA庫(kù)中相符的niRNA數(shù)量分別為AMI組915個(gè)、UA組859個(gè)、SCAD組775個(gè)、Health組822個(gè),各組樣品中勻以hsa-miR-451b, hsa-miR-451a、hsa-mir-486-1、hsa-mir-486-2、hsa-miR-486-5p、 hsa-miR-486-3p表達(dá)量較多,與對(duì)健康對(duì)照組相比急性心梗組患者血清e(cuò)xosome中miR-146b-5p表達(dá)水平明顯升高。小結(jié)：通過血清e(cuò)xosome中miR-146b-5p在急性心梗的患者中有明顯改變,對(duì)診斷一定指導(dǎo)意義。Analysis of expression profiling of serum exosomal microRNA on patients with coronary artery disease
【關(guān)鍵詞】：外泌體 微小RNA 高通量測(cè)序 冠心病
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R541.4
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-9
• 前言9-13
• 一、材料與方法13-25
• 二、結(jié)果25-34
• 三、討論34-40
• 四、結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-49
• 綜述49-62
• 參考文獻(xiàn)56-62
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文62-63
• 致謝63

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：715671