本文關(guān)鍵詞：阿霉素致大鼠慢性心力衰竭后c-kit與nanog基因表達(dá)變化

  更多相關(guān)文章： c-kit nanog 免疫組織化學(xué) 免疫印跡 RT-PCR 心肌干細(xì)胞 慢性心力衰竭 大鼠心臟

【摘要】：背景c-kit和nanog在干細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和分化中具有重要作用,探明c-kit與nanog陽(yáng)性細(xì)胞和疾病之間的關(guān)系近年來(lái)引起關(guān)注。心臟中的c-kit+和nanog+細(xì)胞為心肌干細(xì)胞,它們能夠分化成心肌細(xì)胞。我們以往的研究表明,在心肌梗死的邊緣區(qū)nanog的表達(dá)增加,有利于修復(fù)受損心肌。然而心臟干細(xì)胞在心衰心臟中是增加還是減少,心衰是加強(qiáng)還是減弱心肌再能力仍不明確。目的探討阿霉素致大鼠心力衰竭后心肌組織中c-kit與nanog的基因表達(dá)變化,為進(jìn)一步研究充血性心衰過(guò)程中心肌再生提供形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。方法1140只SD成年雄性大鼠,隨機(jī)分為正常對(duì)照組15只與心衰模型組125只。心衰模型的制造：阿霉素按4mg/kg腹腔注射,每周一次,共6周。正常對(duì)照組給予等量生理鹽水。在8周時(shí),利用小動(dòng)物彩超機(jī)對(duì)正常對(duì)照組和心衰模型組大鼠進(jìn)行心功能檢測(cè),證明心衰形成；2摘取大鼠心臟,取右心壁近房室環(huán)處組織制作冰凍切片；利用免疫組化、免疫熒光顯色等技術(shù)檢測(cè)心肌組織中nanog和c-kit的基因表達(dá)部位；3提取右心壁近房室環(huán)處組織蛋白和mRNA;利用Western Blotting和：RT-PCR等技術(shù)檢測(cè)和定量心肌組織中nanog和c-kit的基因表達(dá)量的變化。結(jié)果1 免疫組化顯示正常和心衰的心肌組織中均有少量nanog與c-kitl陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。正常心肌組織中nanog細(xì)胞較少,小而圓,可散在,也可成群存在,位于心肌細(xì)胞之間、血管周圍。大多數(shù)血管的內(nèi)皮細(xì)胞均表達(dá)nanog,少量心肌細(xì)胞也呈陽(yáng)性表達(dá)。心力衰竭大鼠的心肌組織內(nèi),nanog陽(yáng)性的三類細(xì)胞均減少,而且只有在心內(nèi)膜和心外膜下的心肌組織呈陽(yáng)性分布。在正常和心力衰竭大鼠心肌組織中c-kit陽(yáng)性細(xì)胞呈小圓形或橢圓形,三五成群存在,但未見到心肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞c-kit陽(yáng)性表達(dá)。與正常心肌相比,心力衰竭心肌內(nèi)c-kit陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少。2免疫熒光顯示在正常對(duì)照組中nanog蛋白表達(dá)于更多的心肌中,主要在部分心肌細(xì)胞表達(dá)、血管內(nèi)皮和小圓形細(xì)胞也呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),分布不均勻。心力衰竭心肌中nanog表達(dá)陽(yáng)性的細(xì)胞主要分布于心外膜下心肌和心內(nèi)膜下心肌,表達(dá)量較正常心肌明顯減少,且心內(nèi)膜側(cè)心肌表達(dá)量較心外膜側(cè)減少。c-kit蛋白主要表達(dá)于心肌中的小型細(xì)胞,這些細(xì)胞在心肌中往往成群分布,主要聚集于心外膜下的心肌內(nèi)。與正常心肌相比,心衰后c-kit陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少。未見到心肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)c-kit熒光。另外,還可以觀察到少數(shù)細(xì)胞共表達(dá)nanog和c-kit現(xiàn)象。3 Western blotting結(jié)果顯示：正常對(duì)照組中c-kit與nanog的表達(dá)量分別為451846.3+7029.35和301859.0±3549.73；心衰模型組中c-kit和nanog表達(dá)量分別為146428.7±8029.24和196803.3±3066.76；正常對(duì)照組c-kit蛋白和nanog蛋白表達(dá)明顯多于心衰模型組(P0.05)。4 RT-PCR結(jié)果顯示：在正常對(duì)照組中c-kit與nanog的表達(dá)水平分別為115696.33±8225.82和108401.7±12090.2；心衰模型組中c-kit和nanog表達(dá)水平分別為69273.7±16375和92935.67±14648.7；正常對(duì)照組c-kit mRNA和nanog mRNA表達(dá)明顯多于心衰模型組(P0.05)。結(jié)論心力衰竭可導(dǎo)致心肌內(nèi)c-kit和nanog陽(yáng)性干細(xì)胞減少,心肌再生潛能下降。
【關(guān)鍵詞】：c-kit nanog 免疫組織化學(xué) 免疫印跡 RT-PCR 心肌干細(xì)胞 慢性心力衰竭 大鼠心臟
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R541.6
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-26
• 結(jié)果26-28
• 討論28-30
• 小結(jié)30-31
• 附圖31-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 綜述：干細(xì)胞治療心衰的研究進(jìn)展38-61
• 參考文獻(xiàn)52-61
• 附錄：常見英文縮寫61-62
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況62-63
• 致謝63-64
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷64-65

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 武俊芳;韓金珠;郭志坤;蔡新華;;Nanog蛋白在小鼠心肌組織發(fā)育中的表達(dá)[J];解剖學(xué)雜志;2008年04期

2 常連生;郭志坤;嚴(yán)泉?jiǎng)?;“永生基因”Nanog的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2007年17期

，

本文編號(hào)：660846