本文關(guān)鍵詞：RP105抑制TLR4信號(hào)通路對(duì)大鼠心肌缺血再灌注凋亡損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： RP105 缺血再灌注損傷 心肌細(xì)胞凋亡 TLR4

【摘要】：目的：探討RP105心肌過表達(dá)對(duì)TLR4信號(hào)通路介導(dǎo)的心肌缺血再灌注凋亡損傷的保護(hù)作用，并探討其分子機(jī)制。 方法：將40只SPF級(jí)雄性SD大鼠(220-250g)隨機(jī)分為4組(n=10)：生理鹽水+假手術(shù)組(Sham組)、生理鹽水+缺血再灌注組(I/R組)、Ad-EGFP+缺血再灌注組(Ad-E組)、Ad-EGFP-RP105+缺血再灌注組(Ad-E-R組)。采用多點(diǎn)注射法，將重組腺病毒載體或生理鹽水在體轉(zhuǎn)染大鼠心肌，轉(zhuǎn)染后3天構(gòu)建心肌缺血再灌注損傷模型。缺血30min再灌注4h后空氣栓塞法處死大鼠，采用免疫熒光及Real-time PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染基因EGFP、RP105表達(dá)；Evans blue+TTC雙染法檢測(cè)大鼠心肌梗死面積；TUNEL法檢測(cè)大鼠心肌凋亡指數(shù)；Western blot檢測(cè)線粒體相關(guān)的凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)Bax、cytochrome c、Bcl-2、 caspase-9、 cleaved caspase-3表達(dá)情況以及RP105、 TLR4、 P38MAPK、p-P38MAPK、c-Jun/AP-1、p-c-Jun/AP-1蛋白表達(dá)。 結(jié)果：(1)重組腺病毒載體Ad-EGFP、Ad-EGFP-RP105轉(zhuǎn)染心肌組織3天后，轉(zhuǎn)染基因EGFP與RP105在心肌成功過表達(dá)。(2)與Sham組相比，I/R組、Ad-E組、Ad-E-R組心梗面積、心肌凋亡指數(shù)均顯著增加(p0.05)；線粒體依賴性凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)中促凋亡分子Bax、Cyt-c、caspase-9、cleaved caspase-3表達(dá)均明顯增加(p0.05)，而抗凋亡分子Bcl-2表達(dá)明顯降低(p0.05)；TLR4信號(hào)通路中TLR4、P38MAPK、p-P38MAPK、c-Jun/AP-1、p-c-Jun/AP-1蛋白表達(dá)水平均顯著增加(p0.05)。(3)與I/R組、Ad-E組相比，Ad-E-R組心梗面積、心肌凋亡指數(shù)顯著降低(p0.05)；線粒體依賴性凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)中促凋亡分子表達(dá)明顯降低，而抗凋亡分子表達(dá)顯著升高；TLR信號(hào)通路中TLR4、p-P38MAPK、p-c-Jun/AP-1蛋白表達(dá)均明顯降低(p0.05)。(4) I/R組、Ad-E組兩組間心梗面積、心肌凋亡指數(shù)、線粒體依賴性凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)中促凋亡分子、抗凋亡分子表達(dá)水平以及TLR4信號(hào)通路中TLR4、P38MAPK、p-P38MAPK、c-Jun/AP-1、p-c-Jun/AP-1蛋白表達(dá)水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。(5) I/R組、Ad-E組、Ad-E-R組三組間P38MAPK及c-Jun/AP-1蛋白表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。此外，，p-P38/P38MAPK、p-c-Jun/c-Jun相對(duì)表達(dá)率比值結(jié)果表明：與Sham組比較，I/R組、Ad-E組、Ad-E-R組比值明顯升高(p0.05);與I/R組、Ad-E組相比，Ad-E-R組比值顯著降低(p0.05)；I/R組、Ad-E組比值升高程度無顯著性差異(p0.05)。 結(jié)論：(1) Ad-EGFP及Ad-EGFP-RP105重組腺病毒成功轉(zhuǎn)染心肌組織，可顯著提高轉(zhuǎn)染基因EGFP、RP105mRNA與蛋白表達(dá)；(2) RP105心肌過表達(dá)可顯著降低缺血再灌注心肌損傷，降低再灌注心肌細(xì)胞凋亡；(3)心肌缺血再灌注中TLR4信號(hào)通路激活，促進(jìn)下游信號(hào)分子P38MAPK及轉(zhuǎn)錄因子c-Jun/AP-1磷酸化活化，從而參與缺血再灌注心肌細(xì)胞的凋亡損傷過程；(4) RP105心肌過表達(dá)可抑制線粒體依賴性的凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)，降低缺血再灌注誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡；(5) RP105可能通過抑制TLR4/P38MAPK/AP-1信號(hào)通路活化，從而抑制大鼠心肌缺血再灌注損傷。
【關(guān)鍵詞】：RP105 缺血再灌注損傷 心肌細(xì)胞凋亡 TLR4
【學(xué)位授予單位】：三峽大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R541.4
【目錄】：

• 內(nèi)容摘要4-6
• Abstract6-9
• 英文縮略詞表9-10
• 引言10-13
• 材料與方法13-21
• 結(jié)果21-28
• 第一部分：缺血再灌注損傷模型的構(gòu)建21
• 第二部分：腺病毒轉(zhuǎn)染心肌組織后轉(zhuǎn)染基因 EGFP、RP105 表達(dá)21-23
• 第三部分：腺病毒轉(zhuǎn)染心肌組織后 RP105 蛋白及 mRNA 表達(dá)水平23-24
• 第四部分：Evans blue+TTC 雙染法測(cè)定大鼠心肌梗死面積24-25
• 第五部分：TUNEL 法測(cè)定大鼠心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)25-27
• 第六部分：RP105 對(duì)線粒體依賴性凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)相關(guān)分子表達(dá)影響27
• 第七部分：RP105 對(duì)心肌組織 TLR4、P38MAPK、p-P38MAPK、c-Jun/AP-1和 p-c-Jun/AP-1 蛋白表達(dá)影響27-28
• 討論28-31
• 小結(jié)31-32
• 參考文獻(xiàn)32-36
• 綜述36-42
• 參考文獻(xiàn)40-42
• 后記42-43
• 附錄43

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張磊,馬虹,黃守堅(jiān),孫家鈞;補(bǔ)體耗竭對(duì)心肌缺血再灌注的保護(hù)作用及機(jī)制[J];中華心血管病雜志;2001年06期

2 邱志兵;;內(nèi)皮素與心肌缺血再灌注損傷[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(老年醫(yī)學(xué)分冊(cè));2001年04期

3 王大偉,莫成榮;中藥減輕心肌缺血再灌注損傷實(shí)驗(yàn)研究概述[J];中國(guó)中醫(yī)急癥;2002年03期

4 狄鳴,成蓓,郭蓮軍,曾玉杰,曲玲;硫氮怡酮對(duì)心肌缺血再灌注損傷內(nèi)皮功能的保護(hù)作用[J];臨床心血管病雜志;2002年12期

5 馬余鴻;熱休克蛋白70、腺苷與心肌缺血再灌注損傷[J];廣西醫(yī)學(xué);2003年02期

6 李春杰,余柏林;心肌缺血再灌注損傷機(jī)制研究進(jìn)展[J];人民軍醫(yī);2004年01期

7 嵇富海,薛張剛,蔣豪;p38 MAPK信號(hào)通路及其在心肌缺血再灌注損傷中的作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè);2004年03期

8 李斌,張樂之,周紅,何華美;心肌缺血再灌注時(shí)核孔復(fù)合體通透性變化與細(xì)胞核鈣含量關(guān)系探討[J];四川生理科學(xué)雜志;2004年04期

9 范書英,程文立,申玉良;心肌缺血再灌注損傷及其與間隙連接的關(guān)系[J];中日友好醫(yī)院學(xué)報(bào);2005年02期

10 王曙光;徐小虎;顧黎;竇建明;;急性心肌缺血再灌注對(duì)大鼠腦組織損傷及發(fā)生機(jī)制的探討[J];山東醫(yī)藥;2005年34期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 彭濤;徐明江;滕旭;管又飛;;AZ12417698對(duì)大鼠心肌缺血/再灌注損傷保護(hù)作用的研究[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第23屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

2 王彩歌;王永霞;;心肌缺血再灌注損傷研究進(jìn)展[A];第二屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合心血管病中青年論壇暨第二屆黃河心血管病防治論壇資料匯編[C];2011年

3 吳儀;謝中光;;心肌缺血再灌注,有關(guān)自由基的幾個(gè)問題(簡(jiǎn)報(bào))[A];第三次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];1990年

4 李長(zhǎng)嶺;蔣峻;樊友啟;丁芳;Wieming Fan;Ling Wei;;腫瘤壞死因子a受體1敲除對(duì)心肌缺血再灌注損傷作用的研究[A];2006年浙江省內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)、2006年浙江省老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

5 王彩歌;王永霞;;心肌缺血再灌注損傷研究進(jìn)展[A];2011年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心病分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨北京中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心血管病專業(yè)委員會(huì)年會(huì)論文集[C];2011年

6 陳協(xié)輝;李鵬;黃小平;王東明;陳宋明;楊澤民;陳智凡;許文敏;陳麗萍;;氣體信號(hào)分子硫化氫對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)心血管病學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2013年

7 李培軍;;心肌缺血再灌注損傷——基礎(chǔ)與臨床[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第一屆重癥心臟全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)暨第二屆西湖重癥醫(yī)學(xué)論壇、2013年浙江省重癥醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2013年

8 辛平;朱偉;李靜;劉銘雅;李京波;Andrew N.Redington;魏盟;;缺血后處理聯(lián)合遠(yuǎn)端缺血期處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷保護(hù)的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

9 吳志明;董麗莉;樊冰;潘翠珍;舒先紅;;斑點(diǎn)追蹤顯像技術(shù)評(píng)價(jià)心肌缺血再灌注對(duì)心肌扭轉(zhuǎn)影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];第十屆全國(guó)超聲心動(dòng)圖學(xué)術(shù)會(huì)議論文[C];2010年

10 袁肇凱;黃獻(xiàn)平;曹金枝;胡志希;簡(jiǎn)亞平;;心肌缺血再灌注損傷大鼠冠狀微循環(huán)改變的實(shí)驗(yàn)研究[A];中國(guó)微循環(huán)學(xué)會(huì)第五屆中國(guó)微循環(huán)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 陶春祥;何占德;中藥單體防治心肌缺血/再灌注損傷[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

2 陶春祥 何占德;中醫(yī)方藥防治MI／R損傷研究[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

3 廣文;讓心肌重現(xiàn)生機(jī)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

4 武開宏;心肌也能再生[N];健康報(bào);2005年

5 ;防治急性心肌缺血再灌注損傷實(shí)驗(yàn)研究通過鑒定[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2001年

6 江蘇省中醫(yī)藥研究院 李偉　沈明勤 陸曉暉;中藥防治心肌缺血再灌注損傷作用機(jī)制探討[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2011年

7 ;中藥可用于心臟保存[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

8 馮友根;黃芩苷對(duì)缺血心肌的保護(hù)作用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 閆福曼;心肌微環(huán)境誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞通道蛋白表達(dá)及丹參酮的干預(yù)作用研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2009年

2 吳成;心肌缺血再灌注損傷及藥物保護(hù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1992年

3 沈波;趨化因子受體5在大鼠心肌缺血再灌注損傷中的作用及機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2013年

4 徐世安;大鼠心肌缺血再灌注損傷中腫瘤壞死因子的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2002年

5 林運(yùn)靈;高遷移率族蛋白1在大鼠心肌缺血再灌注損傷中的作用及丙酮酸乙酯的療效[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

6 郭佳;脂聯(lián)素對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究—抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

7 吳錦波;促紅細(xì)胞生成素在大鼠心肌缺血再灌注損傷中的保護(hù)性作用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

8 張貴燦;腺病毒載體介導(dǎo)人白介素10轉(zhuǎn)基因?qū)Υ笫笮募∪毖俟嘧p傷的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2006年

9 李緒勇;維生素D_3對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的作用與機(jī)制探討[D];武漢大學(xué);2012年

10 杜秋香;Intermedin心血管保護(hù)作用及其機(jī)制的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王璋;長(zhǎng)期間歇性缺氧預(yù)適應(yīng)對(duì)心肌缺血再灌注損傷保護(hù)機(jī)制的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

2 陳唐葶;急性心肌缺血大鼠心肌α-輔肌動(dòng)蛋白含量變化及其與心功能的關(guān)系[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

3 方石虎;心肌缺血血漿尾加壓素Ⅱ變化機(jī)制及心肌細(xì)胞表達(dá)的研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 梁勝;血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2在心肌缺血再灌注損傷中的表達(dá)及氯沙坦預(yù)處理的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2007年

5 溫永金;機(jī)械創(chuàng)傷大鼠對(duì)心肌缺血/再灌注損傷的敏感性增加[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

6 繆文麗;中西醫(yī)防治心肌缺血再灌注損傷的研究現(xiàn)狀[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2002年

7 楊偉;氨基脲敏感型胺氧化酶在心肌缺血再灌注中的作用[D];汕頭大學(xué);2009年

8 李雙鳳;硫化氫延遲預(yù)處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D];中南大學(xué);2010年

9 楊冬;TNNI3K基因表達(dá)與心肌肥厚形態(tài)學(xué)變化的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

10 吳大盈;缺血再灌注大鼠心肌微循環(huán)障礙中纖維介素表達(dá)的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

本文編號(hào)：641648