本文關(guān)鍵詞：微小RNA-9在心肌纖維化中的作用及其相關(guān)機(jī)制的研究

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【摘要】：研究背景和目的：心肌纖維化是許多心血管疾病的終末期共同表現(xiàn),是以心肌成纖維細(xì)胞的過度增殖及Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)的過量沉積為特征。目前抑制心肌纖維化的主要方法是使用RAAS系統(tǒng)抑制劑如ACEI和ARB類藥物等。MiRNA是真核細(xì)胞內(nèi)一類具有負(fù)性調(diào)控作用的小RNA,通過與其靶基因的特異性結(jié)合,抑制基因的表達(dá)。MiRNA參與了真核生物基因表達(dá)的幾乎全部過程,越來越多的研究表明miRNA在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮了重要作用。本研究主要探討微小RNA-9 (miRNA-9, miR-9)在心肌纖維化中的作用及其相關(guān)機(jī)制。方法：PDGF-BB (20ng/ml、50ng/ml)或血清(10%)處理大鼠新生心肌成纖維細(xì)胞48小時(shí),采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)各組大鼠心肌成纖維細(xì)胞中miRNA-9的表達(dá)量。MiRNA-9、miRNA-9+miRNA-9抑制劑(anti-miR9)分別轉(zhuǎn)染大鼠心肌成纖維細(xì)胞,采用噻唑藍(lán)細(xì)胞增殖活性檢測(cè)法(MTT)、qRT-PCR、蛋白免疫印跡法(Western blotting)分別檢測(cè)各組大鼠心肌成纖維細(xì)胞增殖率、血小板衍生生長(zhǎng)因子受體-β (PDGFR-β)及Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白(collagen Ⅰ、 collagen Ⅲ)表達(dá)量。PDGFR-β過表達(dá)質(zhì)粒、PDGFR-β過表達(dá)質(zhì)粒+miRNA-9分別轉(zhuǎn)染大鼠心肌成纖維細(xì)胞,檢測(cè)各組PDGFR-β及collagen Ⅰ、collagen Ⅲ表達(dá)量。SiPDGFR-β轉(zhuǎn)染大鼠心臟心肌成纖維細(xì)胞,檢測(cè)PDGFR-β及collagen Ⅰ、collagen Ⅲ表達(dá)量。PDGFR-β雙熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒+miRNA-9轉(zhuǎn)染大鼠心肌成纖維細(xì)胞,檢測(cè)熒光素酶活性。結(jié)果：PDGF-BB或血清處理大鼠心肌成纖維細(xì)胞48小時(shí)后,miRNA-9表達(dá)量較對(duì)照組明顯下調(diào)(P0.05)。MiRNA-9組細(xì)胞增殖率,PDGFR-β、collagen Ⅰ、 collagen Ⅲ mRNA及蛋白表達(dá)量較對(duì)照組均明顯下調(diào)(P0.05), miR-9+ miRNA-9抑制劑組上述指標(biāo)較對(duì)照組變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。PDGFR-β過表達(dá)質(zhì)粒組PDGFR-β及collagen Ⅰ、collagen Ⅲ mRNA較對(duì)照組明顯上調(diào)(P0.05),較PDGFR-β過表達(dá)質(zhì)粒+miRNA-9組變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。SiPDGFR-β組PDGFR-β、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ mRNA及蛋白表達(dá)量較對(duì)照組明顯下調(diào)(P0.05), siPDGFR-β與miRNA-9對(duì)大鼠心肌成纖維細(xì)胞具有相似的抑制作用。PDGFR-β雙熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒+miRNA-9組熒光素酶活性較對(duì)照組明顯下調(diào)(P0.05)結(jié)論：MiRNA-9通過抑制靶基因PDGFR-β表達(dá)進(jìn)而抑制心肌成纖維細(xì)胞的增殖和膠原蛋白的表達(dá),發(fā)揮抑制心肌成纖維細(xì)胞的纖維化效應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：心肌纖維化 心肌成纖維細(xì)胞 miRNA-9 PDGFR-β
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R542.23
【目錄】：

• 英文縮略詞簡(jiǎn)表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 引言10-11
• 材料與方法11-22
• 結(jié)果22-35
• 討論35-39
• 結(jié)論39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 附錄44-46
• 致謝46-47
• 綜述(附參考文獻(xiàn))47-61
• 參考文獻(xiàn)55-61

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