本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)RyR2基因致SK2通道功能變化治療老齡房顫犬的機(jī)制研究

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【摘要】：目的：探討轉(zhuǎn)RyR2基因致SK2通道功能變化治療老齡性房顫犬的機(jī)制。方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分組,假手術(shù)組(A組)7只,僅植入起搏電極,不行心房快速起搏。模型組植入起搏電極,行心房快速刺激8周后,將造模成功的房顫組隨機(jī)分為兩個(gè)亞組(B組和C組),每組7只。假手術(shù)組(A組)：經(jīng)胸心包腔注射500μl生理鹽水后仍不行心房快速起搏。AAV1/EGFP+房顫組(B組)：快速心房起搏8周后經(jīng)胸心包腔內(nèi)注射500μl攜帶EGFP(綠色熒光蛋白)基因的腺相關(guān)病毒溶液后繼續(xù)行心房快速起搏14天。AAV1/RyR2- EGFP+房顫組(C組)：快速心房起搏8W周后經(jīng)胸心包腔內(nèi)注射500μl攜帶RyR2基因的腺相關(guān)病毒溶液后繼續(xù)行心房快速起搏14天。持續(xù)快速左心耳起搏建立慢性房顫犬模型,測(cè)定兩組心房和肺靜脈各部位ERP變化和HE染色和電鏡觀察心肌組織病理組織和超微結(jié)構(gòu)改變。然后采用免疫組化法,RT-PCR和Western blot檢測(cè)RyR2和SK2基因和蛋白變化。結(jié)果：1.手術(shù)成功并順利完成實(shí)驗(yàn)。模型組10只犬經(jīng)持續(xù)快速左心耳起搏8周,均出現(xiàn)典型的心房顫動(dòng)心電圖改變,ERP隨著時(shí)間明顯縮短。超微結(jié)構(gòu)顯示：肌溶解,肌小節(jié)的喪失常位于核周其內(nèi)可見肌小節(jié)碎片。肌小節(jié)缺失處可見大小和形狀發(fā)生典型改變的線粒體。線粒體變長(zhǎng)。閏盤扭模糊和不連續(xù)。2.經(jīng)胸心包腔注射AAV1/RyR2-EGFP基因轉(zhuǎn)染后,左、右心房冰凍切片均顯示大量綠色熒光蛋白表達(dá),呈強(qiáng)陽性。免疫組化檢測(cè)犬左心房RyR2和SK2表達(dá)顯示：可見大量棕色顆粒表達(dá)。犬左心房RyR2和SK2mRNA蛋白表達(dá)顯示可見RyR2和SK2與β-actin基因和蛋白比較表達(dá)增強(qiáng)。結(jié)論：1.建立RAP模型能模擬房顫發(fā)生早期的電生理改變,穩(wěn)定可靠,重復(fù)性好。與臨床房顫相似,具有結(jié)構(gòu)和電生理功能的異常。2.腺病毒導(dǎo)RyR2使其在心肌細(xì)胞內(nèi)過表達(dá),活性增加,可致RyR2蛋白和SK2蛋白上調(diào)。
【關(guān)鍵詞】：房顫 SK2通道 RyR2基因
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R541.75
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表5-9
• 摘要9-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-14
• 研究?jī)?nèi)容方法14-22
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料14-15
• 1.1 研究對(duì)象14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組14
• 1.3 實(shí)驗(yàn)器械和儀器14-15
• 1.4 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑15
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法15-22
• 2.1 持續(xù)快速心房起搏犬致房顫模型制作15-16
• 2.2 心房及肺靜脈各部位有效不應(yīng)期的測(cè)量16-17
• 2.3 標(biāo)本采集和病理學(xué)形態(tài)學(xué)觀察17
• 2.4 經(jīng)胸心包腔注射AAV1/RyR2-EGFP基因轉(zhuǎn)染17-18
• 2.5 AAV1/RyR2-EGFP表達(dá)檢測(cè)18
• 2.6 免疫組化測(cè)定RyR2和SK2在右心房組織中的表達(dá)18
• 2.7 提取心肌組織中的總RNA18-19
• 2.8 半定量RT-PCR檢測(cè)心肌組織中SK2和RyR2表達(dá)強(qiáng)度19-20
• 2.9 Western blot測(cè)定RyR2和SK2蛋白表達(dá)20-22
• 結(jié)果22-32
• 討論32-38
• 小結(jié)38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 綜述44-51
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文51-52
• 導(dǎo)師評(píng)閱表52

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 肖建民;付暉;;卡維地洛對(duì)RyR2介導(dǎo)的自發(fā)性鈣振蕩的抑制作用[J];中國(guó)病理生理雜志;2013年10期

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉海利;轉(zhuǎn)RyR2基因致SK2通道功能變化治療老齡房顫犬的機(jī)制研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：625419