本文關鍵詞：轉RyR2基因致SK2通道功能變化治療老齡房顫犬的機制研究

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【摘要】：目的：探討轉RyR2基因致SK2通道功能變化治療老齡性房顫犬的機制。方法：實驗動物隨機分組,假手術組(A組)7只,僅植入起搏電極,不行心房快速起搏。模型組植入起搏電極,行心房快速刺激8周后,將造模成功的房顫組隨機分為兩個亞組(B組和C組),每組7只。假手術組(A組)：經胸心包腔注射500μl生理鹽水后仍不行心房快速起搏。AAV1/EGFP+房顫組(B組)：快速心房起搏8周后經胸心包腔內注射500μl攜帶EGFP(綠色熒光蛋白)基因的腺相關病毒溶液后繼續(xù)行心房快速起搏14天。AAV1/RyR2- EGFP+房顫組(C組)：快速心房起搏8W周后經胸心包腔內注射500μl攜帶RyR2基因的腺相關病毒溶液后繼續(xù)行心房快速起搏14天。持續(xù)快速左心耳起搏建立慢性房顫犬模型,測定兩組心房和肺靜脈各部位ERP變化和HE染色和電鏡觀察心肌組織病理組織和超微結構改變。然后采用免疫組化法,RT-PCR和Western blot檢測RyR2和SK2基因和蛋白變化。結果：1.手術成功并順利完成實驗。模型組10只犬經持續(xù)快速左心耳起搏8周,均出現(xiàn)典型的心房顫動心電圖改變,ERP隨著時間明顯縮短。超微結構顯示：肌溶解,肌小節(jié)的喪失常位于核周其內可見肌小節(jié)碎片。肌小節(jié)缺失處可見大小和形狀發(fā)生典型改變的線粒體。線粒體變長。閏盤扭模糊和不連續(xù)。2.經胸心包腔注射AAV1/RyR2-EGFP基因轉染后,左、右心房冰凍切片均顯示大量綠色熒光蛋白表達,呈強陽性。免疫組化檢測犬左心房RyR2和SK2表達顯示：可見大量棕色顆粒表達。犬左心房RyR2和SK2mRNA蛋白表達顯示可見RyR2和SK2與β-actin基因和蛋白比較表達增強。結論：1.建立RAP模型能模擬房顫發(fā)生早期的電生理改變,穩(wěn)定可靠,重復性好。與臨床房顫相似,具有結構和電生理功能的異常。2.腺病毒導RyR2使其在心肌細胞內過表達,活性增加,可致RyR2蛋白和SK2蛋白上調。
【關鍵詞】：房顫 SK2通道 RyR2基因
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R541.75
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-9
• 摘要9-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-14
• 研究內容方法14-22
• 1. 實驗材料14-15
• 1.1 研究對象14
• 1.2 實驗動物分組14
• 1.3 實驗器械和儀器14-15
• 1.4 實驗藥品和試劑15
• 2. 實驗方法15-22
• 2.1 持續(xù)快速心房起搏犬致房顫模型制作15-16
• 2.2 心房及肺靜脈各部位有效不應期的測量16-17
• 2.3 標本采集和病理學形態(tài)學觀察17
• 2.4 經胸心包腔注射AAV1/RyR2-EGFP基因轉染17-18
• 2.5 AAV1/RyR2-EGFP表達檢測18
• 2.6 免疫組化測定RyR2和SK2在右心房組織中的表達18
• 2.7 提取心肌組織中的總RNA18-19
• 2.8 半定量RT-PCR檢測心肌組織中SK2和RyR2表達強度19-20
• 2.9 Western blot測定RyR2和SK2蛋白表達20-22
• 結果22-32
• 討論32-38
• 小結38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻40-44
• 綜述44-51
• 參考文獻48-51
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學位論文51-52
• 導師評閱表52

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中國期刊全文數(shù)據庫 前4條

1 肖建民;付暉;;卡維地洛對RyR2介導的自發(fā)性鈣振蕩的抑制作用[J];中國病理生理雜志;2013年10期

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中國碩士學位論文全文數(shù)據庫 前2條

1 劉海利;轉RyR2基因致SK2通道功能變化治療老齡房顫犬的機制研究[D];新疆醫(yī)科大學;2015年

2 盧霞;小鼠心房細胞RyR2鈣釋放通道對SK2通道的影響[D];鄭州大學;2011年

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本文編號：625419