發(fā)布時(shí)間：2017-07-03 11:27

  本文關(guān)鍵詞：無標(biāo)記定量法研究冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證的差異蛋白質(zhì)組

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【摘要】：應(yīng)用高解析離子淌度質(zhì)譜(HDMS)與納升級超高效液相色譜(UPLC)聯(lián)用,尋找冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證血漿差異蛋白,探索冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證的蛋白質(zhì)組學(xué)特點(diǎn).采用美國Agilent公司多克隆抗體親和柱去除冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證患者和健康人血漿中6種豐度最高的蛋白后,進(jìn)行無標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組(Label free proteome)分析.結(jié)果表明,本方法的離子強(qiáng)度變異系數(shù)小于5%,保留時(shí)間變異系數(shù)小于3%,具有良好的重現(xiàn)性.動態(tài)范圍約104數(shù)量級.總蛋白數(shù)3843種,差異倍數(shù)大于1.5倍的差異蛋白數(shù)25種,上調(diào)蛋白數(shù)13種(包括心絞痛血瘀證患者獨(dú)有蛋白3種),下調(diào)蛋白數(shù)12種.ACTA1,ITIH3和LBP僅在冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證患者血漿中表達(dá),Haptoglobin,SAA,CP,C6,MYH11,APOH和ANXA6在冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證患者中高表達(dá),而HBB,HBA,HBE,HBD,HBG,HRG,IGHG,GSN和TF在冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證患者中低表達(dá).表達(dá)上調(diào)的差異蛋白根據(jù)功能可分為:(1)急性時(shí)相反應(yīng)蛋白;(2)補(bǔ)體蛋白;(3)細(xì)胞骨架蛋白;(4)凝血相關(guān)蛋白.表達(dá)下調(diào)的差異蛋白根據(jù)功能可分為:(1)載脂蛋白;(2)運(yùn)輸?shù)鞍?(3)抗凝血相關(guān)蛋白;(4)免疫球蛋白;(5)細(xì)胞骨架調(diào)控蛋白.以上結(jié)果提示,冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證可能屬于一種炎癥反應(yīng);冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證患者可能同時(shí)存在心肌損傷、凝血因子異常、脂代謝紊亂與氧運(yùn)輸障礙;這些方面相互影響,互為因果.這些差異蛋白可為研究或發(fā)現(xiàn)抗心絞痛藥物作用的新靶標(biāo)提供線索.本研究結(jié)果表明,非標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)(Label freeproteomics)是疾病及證候生物標(biāo)志物研究的一種有效手段.
【作者單位】： 北京中醫(yī)藥大學(xué);北京蛋白質(zhì)組研究中心;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院國家生物醫(yī)學(xué)分析中心;
【關(guān)鍵詞】： 質(zhì)譜 心絞痛 血瘀證 無標(biāo)記 蛋白質(zhì)組學(xué) 生物標(biāo)志物
【基金】：國家“九七三”計(jì)劃項(xiàng)目(批準(zhǔn)號:2003CB517105) 國家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號:30902020)資助
【分類號】：R541.4
【正文快照】： 在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,質(zhì)譜的主要功能是鑒定蛋白質(zhì),定量分析則通過其它方法,如標(biāo)記或染色等[1~3]實(shí)現(xiàn).目前,不借助其它方法,質(zhì)譜可同時(shí)實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的定性和定量,即無標(biāo)記(Label-free)定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究.這是目前應(yīng)用于定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究的新方法[4~7],它直接利用蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒

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