發(fā)布時間：2017-07-01 17:12

  本文關(guān)鍵詞：直接接觸共培養(yǎng)誘導骨髓間充質(zhì)干細胞定向分化的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：應用SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells, BM-MSC)與乳鼠心肌細胞(cardiomyocytes, CMs)在體外直接接觸共培養(yǎng)的方法,研究BM-MSC向CMs的分化情況及心肌樣細胞特異性標記物的表達。方法：取四周齡SD大鼠,分離、培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞,倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài),用流式細胞儀鑒定BM-MSC表面抗原CD29、CD45、CD44、CD90、CDllb,用細胞誘導劑誘導BM-MSC向成骨、成軟骨、成脂方向分化。取出生1-2天乳鼠,分離培養(yǎng)心肌細胞,用免疫熒光法鑒定心肌細胞標志物cTnT、cTnI、α-actin。用DAPI標記BM-MSC,與乳鼠心肌細胞直接接觸共培養(yǎng)分化為心肌樣細胞,檢測心肌特異性蛋白的表達。結(jié)果：原代SD大鼠BM-MSC體外培養(yǎng)的形態(tài)學特點：原代BMMSCs形態(tài)多樣,以紡錘形、圓形、短梭形以及多角形等最為多見,細胞有聚集生長的趨向,多個細胞形成一個集落。細胞傳代后體積變大,形態(tài)較均一,以成纖維細胞樣多見,長梭形,細胞均一度較高,碎片或雜細胞數(shù)目也減少。分析細胞周期結(jié)果顯示BM-MSC約15%處于活躍的復制期,其余絕大部分細胞停滯在GO/G1(84.9%),即說明大部分細胞具有高度分化的潛能。采用流式細胞儀檢測BM-MSC表面特異性抗原CD44、CD29、CD90表達陽性,表面抗原CD45、CDllb表達陰性。直接接觸共培養(yǎng)的BM-MSC表達心肌特異性肌鈣蛋白T和心肌特異性肌鈣蛋白I及a-actin,其中a-actin的陽性表達率最高,CTnT次之,CTnI的陽性表達率最低。結(jié)論：骨髓間充質(zhì)干細胞在與心肌細胞直接接觸共培養(yǎng)條件下,BM-MSC可分化為心肌樣細胞,并且能表達心肌特異性肌鈣蛋白T和心肌特異性肌鈣蛋白I及a-actin。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細胞 直接接觸 共培養(yǎng) 分化 心肌細胞
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R54
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 1 材料與方法13-18
• 2 結(jié)果18-20
• 3 討論20-24
• 結(jié)論24-25
• 參考文獻25-29
• 附圖29-35
• 文獻綜述35-43
• 參考文獻40-43
• 致謝43-44
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文44

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